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冠状动脉粥样硬化血液生物标志谱与CT影像特征的相关性研究

2020-12-11阅读(121)

冠状动脉粥样硬化血液生物标志谱与CT影像特征的相关性研究

论文摘要

背景和目的研究表明血液中代谢紊乱的血脂及炎性因子可致血管内膜损伤,并逐步发展为动脉粥样硬化。目前临床上常用影像学征像评价冠状动脉管腔狭窄程度及粥样斑块的形状特征,但难以区分斑块性质及成分。本课题开展相关研究并提出”血管内斑块性质的血液印记学假说”,即通过血液相关基因表达谱、炎性因子谱与血脂代谢谱的分析,间接反映冠脉斑块性质及成分差异,以预警心血管疾病风险度。对象与方法通过双源CT分析健康对照组,无临床症状组与有临床症状组共205例冠状动脉影像特征,根据斑块性质分为A组（未见斑块对照）,B组（钙化斑块）,C组（非钙化斑块和混合斑块患者）。利用GeXP高通量技术分析外周血IL-1β,IL-6, IL-8, IFN-γ, MCP-1, VWF, MTHFR, L-Selectin, TNFα,Ubiquitin, MCSF, ICAM-1, ID2, HMOX-1, LDL-R等15种与心血管疾病相关基因的表达；液体芯片技术检测IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-y, MCP-1, TNFα, GM-CSF等10种细胞因子的水平；日立全自动生化分析仪检测血脂水平及超敏C-反应蛋白（hsCRP）等生化指标；气相色谱法检测外周血n-3多不饱和脂肪酸。结果一、C组与对照组比较,收缩压和GLU、TC、TG、APOB、APOC2及hsCRP共7项指标升高,差异具有统计学意义。利用SPSS16.0软件进行两类判别分析,判断C组的正确率为85.7%。ROC （receiver operating characteristic）分析显示外周血生化指标联合检测鉴别C组和对照组的曲线下面积（area under curve, AUC）为0.720,敏感性和特异性分别为60.5%和76.8%。钙化斑块组与对照组之间未见有统计学差异指标。二、利用GeXP技术建立和优化了同时检测17个基因的多重基因表达体系。批内（CV%）为3.695-12.537%,批间（CV%）为4.405-13.405%。用该方法对斑块组和对照组外周血基因表达水平进行检测,结果显示C组（排除糖尿病）IL-1β、IL-6、IL-8和MCP1基因表达增高。三、液体芯片技术检测外周血细胞因子的结果显示C组与对照组相比IL-6水平显著增高（P<0.05）。ROC分析显示外周血IL-6检测鉴别两组间的曲线下面积为0.592,敏感性和特异性分别为78.0%和39.7%。四、建立了用气相色谱检测n-3多不饱和脂肪酸（n-3 polyunsaturated fatty acids, n-3）的方法,初步分析了n-3在不同动脉粥样硬化斑块中的含量以及n-6与n-3比值,结果显示C组和钙化斑块组n-6/n-3有升高趋势。五、IL-6联合外周血生化指标建立了区分C组与对照组的诊断模型,ROC曲线分析显示该模型对两组间的鉴别效能较高（AUC为0.746）,敏感性和特异性分别为78.0%和65.1%。结论本研究建立了同时检测外周血17个基因的多重基因表达和气相色谱检测n-3的方法。联合外周血生化、基因表达、细胞因子水平等多指标检测,建立了区分冠状动脉粥样硬化非钙化斑块和混合斑块组的诊断模型,利用该模型将风险度较高的冠状动脉粥样硬化患者筛选出来,为早期发现和预警高风险心血管疾病提供实验室依据。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 第一章 冠状动脉粥样硬化斑块与血液生化指标相关性分析
  • 1 材料
  • 1.1 主要试剂
  • 1.2 主要仪器
  • 1.3 实验对象
  • 2 方法
  • 2.1 冠状动脉CTA检查分组方法
  • 2.2 全自动生化分析仪检测脂类代谢指标及炎症指标
  • 2.3 统计学方法
  • 3 结果
  • 3.1 不同性质斑块组外周血生化指标检测结果比较
  • 3.2 C组（非钙化斑块加混合斑块）与对照组间外周血生化指标结果比较
  • 3.3 外周血生化指标对C组斑块的判别分析
  • 3.4 外周血生化指标联合检测C组（非钙化斑块+混合斑块）的鉴别效能
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第二章 外周血多重基因表达方法的建立及评价冠脉粥样硬化斑块研究
  • 第一节 外周血多重基因表达方法的建立
  • 1 材料
  • 1.1 主要试剂
  • 1.2 主要仪器
  • 1.3 实验对象
  • 2 方法
  • 2.1 外周血总RNA的提取
  • 2.2 引物的设计与合成
  • 2.3 反应原理
  • 2.4 RNA的反转录
  • 2.5 PCR反应
  • 2.6 PCR产物的毛细管电泳
  • 2.7 GeXP样本分析
  • 2.8 多重PCR实验条件的优化
  • 2.9 GeXP多重基因表达分析仪的精密度评价
  • 3 结果
  • 3.1 单重PCR反应结果
  • 3.2 多重PCR实验条件的优化结果
  • 3.3 GeXP多重基因表达分析仪的精密度评价
  • 3.4 不同引物扩增同一基因不同产物大小比较
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第二节 外周血多重基因表达谱评价冠脉粥样硬化斑块研究
  • 1 材料
  • 1.1 主要试剂
  • 1.2 主要仪器
  • 1.3 实验对象
  • 2 方法
  • 2.1 外周血总RNA的提取
  • 2.2 外周血多重基因表达谱测定
  • 2.3 统计学方法
  • 3 结果
  • 3.1 不同性质斑块组外周血基因表达结果比较
  • 3.2 C组（非钙化斑块加混合斑块）与对照组外周血基因表达结果比较
  • 3.3 C组（非钙化斑块加混合斑块）外周血炎性因子基因表达相关性分析
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第三章 外周血细胞因子检测评价冠脉粥样硬化斑块研究
  • 1 材料
  • 1.1 主要试剂
  • 1.2 主要仪器
  • 1.3 实验对象
  • 2 方法
  • 2.1 检测方法
  • 2.2 统计学方法
  • 3 结果
  • 3.1 不同性质斑块外周血细胞因子水平比较
  • 3.2 C组（非钙化斑块加混合斑块）与A组（对照组）外周血细胞因子结果比较
  • 3.3 C组、钙化斑块和对照组间外周血细胞因子检测结果比较
  • 3.4 IL-6检测C组斑块的鉴别效能
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第四章 N-3多不饱和脂肪酸与冠脉粥样硬化斑块的相关性
  • 1 材料
  • 1.1 主要试剂
  • 1.2 主要仪器
  • 1.3 实验对象
  • 2 方法
  • 2.1 检测方法
  • 2.2 统计学方法
  • 3 结果
  • 3.1 C组、钙化斑块组和对照组间外周血n-3 index比较
  • 3.2 C组、钙化斑块组和对照组间外周血n-6/n-3比值比较
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第五章 冠脉粥样硬化斑块的多参数诊断模型的建立
  • 1 外周血标志物联合检测对C组的判别分析
  • 2 外周血标志物联合检测对C组斑块的鉴别效能
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 全文结论
  • 研究的创新点、局限性和展望
  • 参考文献
  • 综述
  • 参考文献
  • 附录（英文缩写词表）
  • 攻读学位期间发表论文及会议交流情况
  • 完成、参与课题与获奖情况
  • 致谢

    • 相关论文文献

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