论文摘要
目的:首先探讨保留全胃的3种不同类型胃食管反流大鼠模型的制备方法,旨在为研究胃酸、十二指肠液（主要为胆汁）及混合反流的作用机制及治疗提供较理想的慢性反流动物模型。在成功制备动物模型基础上进一步观察大鼠肺部的组织学改变并研究血红素加氧酶-1（HO-1）、NOS2在食管及肺部组织中的表达,再通过分组予以HO-1抑制剂和诱导剂干预,以探讨HO-1在GERD发生发展机制中的作用。方法:首先选择123只成年、SD雄性大鼠进行实验。造模时体重230±30g,动物被随机分成4组:假手术组（SO）、胃液反流为主（GER）模型组、十二指肠液反流为主（DER）模型组和十二指肠胃食管反流（DGER）模型组。SO组20只在常规开腹后游离食管下段和十二指肠,15分钟后关腹。GER模型组先采用幽门部分缝扎+贲门肌切开术制备模型9只（GER1）,因术后1周内死亡8只而放弃。后改行食管胃底吻合术制备模型20只（GER2）。DER模型组首先采用食管胃空肠侧侧吻合术制备模型3只（DER1）,亦因术后动物短期死亡而改为食管十二指肠（胆管开口远侧）吻合术制备模型21只（DER2）。DGER模型组采用食管胃十二指肠吻合术（EGDA）制备胃十二指肠液混合反流47只。术后存活动物给与颗粒饲料喂养,每周测量体重,观察营养状态。于术后喂养1个月、2个月、3个月、4个月各组分批（每次3～5只/组）经股静脉放血处死并观察食管局部大体形态变化,随之取动物食管和肺组织标本,部分以10%中性甲醛固定,制备组织切片,HE染色光镜下观察病理组织学改变,免疫组化检测HO-1、NOS2阳性细胞表达;低温冻存标本以RT-PCR方法检测HO-1mRNA,Western blotting检测HO-1蛋白表达。除麻醉意外死亡3只外,对术后非预期死亡37只大鼠随即进行尸体解剖,以分析其死因。剩余DGER组14只模型动物于术后16周时又随机分为HO-1诱导剂组、HO-1抑制剂组及生理盐水对照组,隔日分别给予腹腔注射Hemin、ZnPP及生理盐水,另选SO组动物作为空白对照。于干预处理第10次后次日处死动物取材,所取组织标本处理同上。统计学分析各组动物体重变化（术后4周内）、死
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