组织工程构建小口径人工血管的实验研究

论文摘要

第一部分 组织工程血管种子细胞的培养 目的：为构建组织工程血管提供种子细胞。方法：无菌条件下采集大鼠及兔的骨髓，肝素抗凝，经淋巴细胞分层液(相对密度为1.073 g·mL-1)密度梯度离心分离骨髓单个核细胞，进而贴壁培养，获得骨髓间充质干细胞（MSCs）并传代。倒置显微镜下形态学观察及流式细胞术鉴定。结果：成功地分离、培养出大鼠及兔MSCs并传代。倒置显微镜下MSCs呈栅栏状，旋涡状排列。流式细胞术结果显示培养的原代鼠MSCs干细胞表面标志CD90阳性，基质细胞表面标志CD44阳性，不表达内皮细胞表面标志CD31及造血系细胞表面标志CD45。结论：所培养的MSCs为研究组织工程血管提供了细胞来源。 第二部分 组织工程血管支架材料的制备及材料生物相容性比较 目的：为构建组织工程血管提供支架材料并比较材料生物相容性。方法：和清华大学化工系合作，用高分子可降解材料聚3．羟基戊酸共聚物（PHBV）与聚丁二酸丁二酯（PBS）作为支架材料，运用流延成膜的方法制成不同质量百分比共混材料膜片；将培养的第3代兔MSCs种植于膜片上，于培养的第1、3、7、10、14天，倒置显微镜下、苏木素-伊红染色、甲苯胺蓝染色、扫描电镜检查观察材料与兔MSCs种植情况；四唑盐比色法检测材料上细胞增殖率；乳酸脱氢酶实验检测材料的细胞毒性。结果：成功地制备出不同质量百分比的PHBV与PBS共混材料膜片；甲苯胺蓝染色、扫描电镜结果显示聚PHBV／PBS=50／50共混材料组上细胞生长最为密集；倒置显微镜下无法观察附着于材料上的细胞，苏木素-伊红染色制备过程中细胞丢失多，不能为材料提高准确的信息；甲苯胺蓝染色可快速观察材料上细胞附着情况；四唑盐比色法结果显示PHBV／PBS=50／50共混材料组的细胞增殖率最高；乳酸脱氢酶实验结果表明

论文目录

• 缩略语表
• 前言
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一部分：组织工程血管种子细胞的培养
• 第二部分：组织工程血管支架材料的制备和材料生物相容性的比较
• 第三部分：动态种植和培养在组织工程血管构建中的应用
• 综述1：血管组织工程
• 综述2：心血管组织工程生物反应器的研究进展
• 个人简历
• 致谢