黄芪多糖结构与抗肿瘤活性研究

论文摘要

本文以黄芪（Radix Astragalus）为原料,通过水提醇沉法提取多糖；酶-Sevag联合法除蛋白；无水乙醇洗涤去色素；乙醇分级沉淀、DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-100柱层析分离纯化后得到两种黄芪多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ,苯酚硫酸法测定其糖含量分别为94.59%和97.57%。紫外光谱扫描测定结果表明,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ都不含核酸和蛋白；旋光度测定分别为[a]DAPs-Ⅰ23℃=+185°（C,0.001g/mL, H2O）、[a]DAPs-Ⅱ23℃=+170°（C,0.001g/mL, H2O）;高效液相色谱法测定APS-Ⅰ和APS-Ⅱ重均分子量分别为4.77×106和8.68×103Da。GC分析表明,多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ主要由葡萄糖组成,还有少量的阿拉伯糖和木糖,其阿拉伯糖：木糖：葡萄糖的摩尔比分别为0.54：1：18.14和0.23：1：29.39；经红外光谱、甲基化分析、高碘酸氧化、Smith降解和核磁共振分析其多糖结构,结果表明,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ的结构相似,为α-（1→3）连接葡聚糖,其中少量1→4、1→6连接的葡萄糖、阿拉伯糖和木糖以分支存在。APS-Ⅰ和APS-Ⅱ结构的差异在于分子量即糖链聚合度的不同。通过对小鼠H22腹水瘤抑制效果的比较、小鼠血清聚丙烯酰胺凝胶电泳和肿瘤组织切片观察等发现,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ的抑瘤率分别为55.47%和47.72%, APS-Ⅰ的抑瘤效果要好于APS-Ⅱ;提示黄芪多糖抗肿瘤作用与其多糖结构存在一定的关系。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 引言
• 1.2 黄芪多糖的提取与分离纯化
• 1.2.1 多糖的提取
• 1.2.2 多糖的分离纯化
• 1.2.3 多糖的纯度鉴定
• 1.3 黄芪多糖的结构测定
• 1.3.1 化学法
• 1.3.2 仪器分析法
• 1.3.3 生物学方法
• 1.3.4 黄芪多糖的结构研究进展
• 1.4 黄芪多糖的药理研究
• 1.4.1 黄芪多糖对免疫功能的影响
• 1.4.2 降血糖作用
• 1.4.3 对心血管系统的作用
• 1.4.4 抗肿瘤作用
• 1.5 本课题研究的目的、意义和主要内容
• 2 材料与方法
• 2.1 仪器、试剂与材料
• 2.1.1 仪器
• 2.1.2 材料与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 黄芪多糖的提取与分离
• 2.2.2 黄芪多糖的结构研究
• 2.2.3 黄芪多糖抗肿瘤活性的研究
• 3 结果与讨论
• 3.1 黄芪多糖的提取与分离
• 3.2 黄芪多糖结构分析
• 3.2.1 理化性质分析
• 3.2.2 单糖组成结果分析
• 3.2.3 甲基化分析
• 3.2.4 高碘酸氧化和Smith降解
• 3.2.5 NMR结果分析
• 3.3 抗肿瘤活性
• 3.3.1 抑瘤率
• 3.3.2 血清电泳分析
• 3.3.3 组织切片观察
• 4 结论
• 5 展望
• 6 参考文献
• 7 攻读硕士期间发表的论文
• 8 致谢