细梗香草总皂苷制备工艺及质量标准研究

论文摘要

细梗香草（Lysimachia capillipes Hemsl.）又名香排草、满山香,为报春花科珍珠菜属植物细梗香草的干燥全草,民间用于治疗风湿痹痛、月经不调、咳喘,并有补虚、驱蛔、抗肿瘤等功效。为了更好地探索细梗香草的药用价值,开发具有抗肿瘤作用的新药,本课题以细梗香草中主要皂苷细梗香草皂苷B和细梗香草皂苷C为目标成分,建立了HPLC含量测定方法,通过指标成分的含量测定对药材提取纯化工艺进行了优选,并制定了药材及中间体的质量标准,旨在为开发出药效成分明确、有效成分含量高的中药新药奠定基础。1.细梗香草药材质量标准研究通过比较不同产地及不同批号细梗香草药材的性状,完善了药材鉴别方法；以细梗香草皂苷B和细梗香草皂苷C为目标成分,建立药材中两种皂苷的HPLC-ELSD含量测定方法,含量之和的限度为4.00%：测定了药材不同部位的皂苷含量；以烘干法测定药材的含水量,制定水分限度为12.00%。2.皂苷提取工艺研究通过单因素筛选以及正交试验,以细梗香草总皂苷得率为评价指标,对药材提取工艺进行优选。优选的工艺为：药材以70%乙醇为溶媒提取两次,第一次用20倍量溶媒浸泡0.5 h后提取1h,第二次用16倍量溶媒提取0.5 h。本工艺总皂苷得率和提取率分别为5.31%和91.2%。3.纯化工艺研究通过动态吸附解析试验筛选出本实验所用树脂为HPD 450型大孔树脂,以总皂苷得率和中间体总皂苷含量为综合评价指标,优选纯化工艺。优选的纯化工艺为：药液浓缩成0.25 g生药·mL-1,调节pH至7-8,加入径高比为1：4的大孔树脂柱,流速3 BV·h-1,重复上样3次,吸附0.5 h后依次用水、40%乙醇、70%乙醇冲洗4 BV,流速分别为4 BV·h-1、4 BV·h-1、6 BV·h-1。收集70%乙醇洗脱液,真空干燥即为总皂苷中间体。4.中间体质量标准研究根据中间体中细梗香草皂苷B和细梗香草皂苷C为指标对5批中间体质量进行检测,初步制定中间体皂苷含量限度为55.00%。5.制剂工艺研究以细梗香草皂苷中间体为原料,通过考察流动性、吸湿性等指标确定以微晶纤维素为辅料,并制得开培瑞肠溶胶囊,胶囊内容物总皂苷含量限度为434.5mg·g-1；建立了制剂的质量标准并初步进行了胶囊加速稳定性试验。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 第1章 文献综述
• 1.1 细梗香草研究
• 1.1.1 细梗香草化学成分
• 1.1.2 细梗香草成分含量测定
• 1.2 三萜类化合物研究
• 1.2.1 三萜类抗肿瘤活性研究
• 1.2.2 三萜类成分的含量测定方法
• 1.2.3 三萜皂苷提取方法研究
• 1.2.4 三萜皂苷纯化方法研究
• 第2章 细梗香草皂苷对照品制备
• 2.1 仪器与试药
• 2.2 方法与结果
• 2.2.1 细梗香草总皂苷粗品的制备
• 2.2.2 细梗香草皂苷精制
• 2.3 小结
• 第3章 细梗香草药材质量标准研究
• 3.1 仪器与试药
• 3.2 方法与结果
• 3.2.1 性状
• 3.2.2 鉴别
• 3.2.3 检查
• 3.2.4 含量测定方法学
• 3.2.5 样品测定
• 3.3 小结与讨论
• 第4章 细梗香草皂苷提取工艺的研究
• 4.1 仪器与试药
• 4.2 方法与结果
• 4.2.1 单因素试验
• 4.2.2 正交试验
• 4.2.3 拟选工艺与最佳工艺比较
• 4.2.4 验证试验
• 4.3 讨论
• 第5章 细梗香草皂苷纯化工艺的研究
• 5.1 仪器与试药
• 5.2 方法与结果
• 5.2.1 大孔树脂性能考察以及优选
• 5.2.2 单因素试验
• 5.2.3 正交试验
• 5.3 工艺验证试验
• 5.4 小结与讨论
• 第6章 中间体质量控制研究
• 6.1 仪器与试药
• 6.2 方法与结果
• 6.2.1 色谱条件选择
• 6.2.2 对照品溶液的配制
• 6.2.3 中间体的制备
• 6.2.4 样品溶液的制备
• 6.2.5 线性关系考察
• 6.2.6 精密度试验
• 6.2.7 稳定性试验
• 6.2.8 重复性试验
• 6.2.9 回收率试验
• 6.3 不同批次中间体含量测定
• 第7章 开培瑞制剂工艺研究
• 7.1 仪器与试药
• 7.2 方法与结果
• 7.2.1 辅料的选择
• 7.2.2 药粉与辅料混合比例的确定
• 7.2.3 临界相对湿度的测定
• 7.2.4 开培瑞胶囊质量标准
• 7.2.5 开培瑞胶囊稳定性考察
• 7.3 小结与讨论
• 第8章 总结与展望
• 8.1 总结
• 8.2 展望
• 参考文献
• 附图
• 附表
• 作者简历