不同钼水平对山羊组织自由基代谢及其金属含量的影响

论文摘要

本试验选用27只山羊为试验动物,随机分为对照组、低毒组和高毒组,每组3个重复,其中低毒组和高毒组的山羊通过定时定量按体重分别灌服MO+6浓度为15mg/kg和45mg/kg的[（NH4）6Mo7O24·4H2O],对照组灌服对应量单蒸水。试验的第0、10、20、30、40、50天,每组山羊采血分离血清,测定血清ALT（Alanine aminotransferase）、TP （Total protein）、CP （Caeruloplasmin）、ALB（Albumin）、T-AOC（Total antioxidative capacity）、SOD （Superoxide dismutase）、MDA（Malonaldehyde）、NO （Nitric oxide）、NOS（Nitrix oxide synthase）水平；在试验第0、25、50天,每组山羊在麻醉后宰杀3只,取少量肝脏组织提取线粒体,测定线粒体T-AOC、SOD、MDA、NO、NOS、CAT （Catalase）水平；取部分肝脏,福尔马林固定,用于组织学观察；另外再精确称量一定量的肝脏,用原子吸收法测定其钼、铜、铁和锌的含量。试验结果如下：（1）试验组山羊自灌服[（NH4）6Mo7O24·4H2O]第10天开始出现症状,最明显是采食量下降；随后被毛棕色处逐渐变白,脱毛现象逐渐加重；另一明显特征是体重显著下降,特别是试验后期,体重急剧下降,消瘦明显。证明山羊钼中毒病理模型复制成功。（2） 15mg/kg组和45mg/kg组山羊血清TP、ALB、CP的水平不同时期与对照组相比呈下降趋势（P<0.05或P<0.01）,而ALT呈升高趋势（P<0.05或P<0.01）。（3）15mg/kg组和45mg/kg组山羊血清T-AOC、SOD的水平不同时期与对照组相比呈下降趋势（P<0.05或P<0.01）,而MDA、NO、T-NOS、i-NOS均呈升高趋势（P<0.05或P<0.01）。（4）试验第50天时15mg/kg组和45mg/kg组山羊肝脏细胞肿胀,出现坏死、组织内见出血。对照组山羊不同时期无明显病理变化。（5） 15mg/kg组和45mg/kg组山羊肝线粒体T-AOC、SOD、CAT的水平不同时期与对照组相比均呈下降趋势（P<0.05或P<0.01）,而MDA、NO、T-NOS、i-NOS均呈升高趋势（P<0.05或P<0.01）。（6） 15mg/kg组和45mg/kg组山羊血清、肝组织的铝含量不同时期与对照组相比升高极显著（P<0.01）,血清铜下降明显（P<0.05或P<0.01）,肝组织铜含量升高（P<0.05或P<0.01）,血清铁、锌含量下降（P<0.05）,肝脏铁、锌含量变化不明显（P>0.05）。以上结果提示,高浓度铝对山羊肝脏有明显的损害作用。其作用机制可能是破坏肝细胞膜质量,降低肝脏线粒体抗氧化能力,机体出现自由基累积,肝脏Mo的过量沉积,阻止铜和铁吸收利用,引起机体铜缺乏。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 文献综述
• 1 家畜钼中毒研究进展
• 1.1 发病简史
• 1.2 发病原因
• 1.3 发病机理
• 1.4 影响动物钼中毒的因素
• 1.4.1 动物因素
• 1.4.2 饲料因素
• 1.5 临床症状和病理学变化
• 1.5.1 临床症状
• 1.5.2 病理变化
• 1.6 诊断
• 1.6.1 常规诊断
• 1.6.2 血清学诊断
• 1.7 综合防治措施
• 1.7.1 预防
• 1.7.2 治疗
• 2 线粒体应激在动物疾病发生中的作用
• 2.1 线粒体应激
• 2.2 线粒体在细胞凋亡中的介导作用
• 2.3 外源重金属中毒和线粒体应激
• 第二部分 试验研究
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 试验动物
• 1.1.2 主要试剂
• 1.1.3 主要仪器
• 1.1.4 试验耗材
• 1.1.5 主要试剂配制
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 饲养管理
• 1.2.2 样品收集与保存
• 1.2.3 肝脏线粒体的提取
• 1.2.4 肝脏线粒体蛋白浓度的测定
• 1.2.5 血清和线粒体生化指标的测定
• 1.2.6 组织石蜡切片的制作
• 1.2.7 血清、组织元素含量测定
• 1.3 数据处理
• 2 试验结果
• 2.1 临床症状
• 2.2 血清肝功能
• 2.2.1 血清总蛋白（TP）含量
• 2.2.2 血清白蛋白（ALB）含量
• 2.2.3 血清谷丙转氨酶（ALT）活性变化
• 2.2.4 血清铜蓝蛋白（CP）活性变化
• 2.3 血清自由基代谢指标
• 2.3.1 血清总抗氧化（T-AOC）活性变化
• 2.3.2 血清超氧化物歧化酶（SOD）活性变化
• 2.3.3 血清丙二醛（MDA）含量变化
• 2.3.4 血清一氧化氮（NO）含量变化
• 2.3.5 血清总一氧化氮还原酶（T-NOS）含量变化
• 2.3.6 血清诱导型一氧化氮还原酶（i-NOS）含量变化
• 2.4 线粒体自由基代谢指标
• 2.4.1 线粒体总抗氧化T-AOC的活性变化
• 2.4.2 线粒体超氧化物歧化酶SOD活性变化
• 2.4.3 线粒体过氧化氢酶CAT活性变化
• 2.4.4 线粒体一氧化氮NO活性变化
• 2.4.5 线粒体丙二醛（MDA）含量变化
• 2.4.6 线粒体总一氧化氮还原酶T-NOS活性变化
• 2.4.7 线粒体诱导型一氧化氮还原酶i-NOS活性变化
• 2.5 血清、肝组织的钼、铜、铁、锌的含量
• 2.5.1 血清中钼、铜、铁、锌含量
• 2.5.2 肝脏组织中钼、铜、铁、锌含量
• 2.6 病理学变化
• 2.6.1 病理解剖学变化
• 2.6.2 病理组织学变化
• 3 分析与讨论
• 3.1 山羊钼中毒病理模型的建立
• 3.2 钼中毒对山羊肝功能的影响
• 3.3 钼中毒对山羊血清自由基代谢指标的影响
• 3.3.1 钼中毒对山羊血清T-AOC、SOD、MDA的影响
• 3.3.2 钼中毒对山羊血清NO、T-NOS、i-NOS的影响
• 3.4 铝中毒对山羊线粒体自由基代谢指标的影响
• 3.4.1 钼中毒对山羊线粒体T-AOC、SOD、MDA、CAT的影响
• 3.4.2 钼中毒对山羊线粒体NO、T-NOS、i-NOS的影响
• 3.5 钼中毒对山羊血清、肝组织的钼、铜、铁、锌的含量影响
• 3.5.1 钼中毒对血清的钼、铜、铁、锌的含量影响
• 3.5.2 钼中毒对肝脏组织钼、铜、铁、锌的含量影响
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢