姜黄素对急性肺损伤大鼠HO-1表达及前炎症因子产生的影响

论文摘要

目的研究姜黄素对实验性急性肺损伤（acute lung injury, ALI）大鼠血红素加氧酶（hemeoxygenase, HO）-1表达的影响；研究HO-1对前炎症因子TNF-a, IL-1β和IL-6的表达的调控作用。方法将40只大鼠随机分为5组：A组（对照组）：舌静脉注入等量生理盐水；B组（ALI模型组）：按小鼠体重注入LPS（5mg/Kg）以构建ALI模型；C组（姜黄素+LPS组）：注入LPS后10min注入姜黄素（50mg/kg）;D组[LPS+姜黄素+氯血红素（Hm）]：在第C组的基础上补充Hm（10mg/Kg）;E组[LPS+姜黄素+锌原卟啉（ZnPP）]:在第C组的基础上按10mg/Kg补充ZnPP。肉眼及显微镜下观察肺组织的病理改变情况；免疫酶联吸附试验（ELISA）检测肺泡灌洗液（BALF）中TNF-a,IL-1β和IL-6的水平；获取肺组织,测量肺湿干重比例（W/D）和丙二醛（MDA）含量,并检测肺组织匀浆中HO-1的活性；最后采用逆转录PCR （RT-PCR）和Western blot检测肺组织中HO-1的mRNA和蛋白表达水平。结果1 ALI的病理组织学变化A组肺外观呈浅红色,包膜光滑,表面末见肿胀及出血点,显微镜下肺泡腔及支气管腔未见明显细胞及渗出物。B组肺体积增大,表面淤血,病理改变以肺间质病变为主,肺组织毛细血管明显扩张、充血,肺泡隔增宽,大量白细胞渗出、聚集。C组及D组病变有不同程度减轻,炎性细胞浸润减少,肺泡腔渗液减少,肺泡结构较完整。2肺组织湿干比及MDA含量变化注射LPS前后肺组织W/D比值分别为（3.96+0.44）和（4.92±0.37）,经统计学分析,P<0.05。姜黄素处理后,与B组以及E组比较,大鼠肺组织W/D比值有统计学意义。LPS注入2h后肺组织中MDA含量开始高于对照组（P<0.05）,注入6h和12h后更高（均P<0.05）：C组和D组MDA含量明显低于相应LPS组（P<0.05）；E组MDA含量分别高于相应LPS组。3 BLAF中TNF-α,IL-1β和IL-6水平对于ALI模型组,BALF中TNF-a,IL-1p和IL-6水平分别为（1563±36）pg/ml, （172±12） pg/ml和（402±36）pg/ml;姜黄素处理后,三者水平分别为。（965±42）pg/ml, （114±7） pg/ml和（153±16）pg/ml;ZnPP能逆转姜黄素对IL-1p和IL-6的降低效应,但对TNF-α含量无明显影响。4 HO-1的活性,mRNA水平以及蛋白表达药物处理6h和12h后,C组和D组肺组织中HO-1活性分别为（782.45±33.41） nmol/h.mg.protein, （892.18±62.44） nmol/h.mg.protein和（869.71±64.72） nmol/h.mg.protein,（966.79±52.81） nmol/h.mg.protein,明显高于B组（P<0.05）；E组肺组织中HO-1活性低于LPS组（P<0.05）。C组HO-1基因mRNA表达水平明显高于对照组和LPS组,但略低于D组（LPS+姜黄素+Hm组）。而E组与对照组相比无明显差异。内参β-actin的mRNA水平在所有处理组当中保持恒定。Western blotting结果显示,LPS处理后HO-1蛋白表达量有所增加,而姜黄素能进一步增加HO-1的量。E组与A组相比,HO-1的量无明显变化。结论1.姜黄素能有效改善ALI肺组织的病理状况,并能降低MDA的含量和BALF中TNF-α,IL-1β和IL-6含量,以及增加HO-1的活性,并促进其mRNA和蛋白表达。2.姜黄素对ALI的保护作用与上调HO-1的表达有关,后者通过抑制IL-1β和IL-6水平可能是其发挥保护作用的机制之一。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 主要英文缩写词索引
• 第一章 前言
• 第二章 实验材料
• 第三章 实验方法及步骤
• 第四章 实验结果
• 第五章 讨论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 成果目录
• 致谢