核果类果树胚珠培养及子叶再生体系构建

核果类果树胚珠培养及子叶再生体系构建

论文摘要

桃、李、杏等核果类果树具有丰富的种质资源,早熟品种选育取得了显著的成绩,远缘杂交研究在种质创新与品种选育方面意义深远,而早熟品种与远缘杂交种都存在胚败育问题以及桃、杏存在外植体再生困难的问题,制约着果树种质创新与育种研究的进程,研究并建立胚珠培养程序及桃、杏高效再生体系,有望解决缘远杂种胚及早熟品种胚的早期败育问题,同时为核果类果树组培快繁及遗传转化等相关研究提供技术支持,针对目前胚珠培养及再生研究在果树育种等相关研究中存在的局限性,试验以不同早熟桃品种、杏及桃×杏、杏×李胚珠为试材,研究了远缘杂种胚败育的发生,探讨了胚珠培养及幼胚子叶再生的相关影响因素,建立了凯特杏、桃早期胚珠培养程序,并对胚珠培养获得幼胚子叶进行不定芽诱导,建立了杏、桃幼胚子叶再生及后期培养整个培养程序,最终获得了健康正常的不定芽植株,主要研究结果如下:(1)盛花后25d的凯特杏胚珠(PF=0),尚未可见胚;生长培养中,SH培养基较MT适宜于胚珠生长,珠被划伤有利于胚珠的生长发育;以MS为基本培养基,BA与NAA结合诱导能力强;试验采用诱导方式获得了可见胚,诱导出胚率为80%。盛花后25d、35d取样的凯特杏胚珠,培养后获得幼胚子叶,诱导不定芽的适宜TDZ浓度为1.25mg/L,诱导出芽率分别为85.00%、80.00%;盛花后50d-55d之间取样的材料,适宜TDZ浓度为2.50mg/L,出芽率分别为:65.00%、60.00%,而盛花后60d取样的材料,适宜TDZ浓度为5.0mg/L,出芽率为61.11%,不定芽主要发生在子叶的近轴面、胚轴连接处及子叶近轴端两侧。在25℃进行21d暗培养,盛花后35d、50d、55d利60d材料出芽率分别为72.22%、65.00、60.00%和55.56%;4℃下28d暗培养,35d、50d、55d和60d依次为59.09%,71.42%、77.78%和86.36%。(2)不同桃品种间,胚珠培养成胚率有差异,盛花后28d、40d、48d的不同品种,均表现为早红2号最高,千年红次之,曙光最低;其中早红2号盛花后28d成胚率达42.86%。盛花后48d的早红2号胚珠培养获得的幼胚子叶,在TDZ浓度0.5mg/L下,诱导率为69.69%;盛花后48d的千年红、早红2号、早露蟠桃,在1.0mg/L的TDZ浓度下处芽率分别为:62.50%、50.00%、56.00%。(3)通过以上研究,建立了凯特杏、桃早期胚拯救四级培养体系,即①胚珠培养,获得可见胚(一级培养);②幼胚生长培养(胚培养),获得健壮幼胚(二级培养);③幼胚子叶再生,获得不定芽(三级培养);④不定芽组培苗快繁(四级培养)。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 绪论
  • 1.1 核果类果树远缘杂交
  • 1.1.1 远缘杂交概述
  • 1.1.2 研究进展
  • 1.1.3 远缘杂交存在的问题及解决办法
  • 1.2 胚培养研究进展
  • 1.2.1 胚培养在果树育种中的作用
  • 1.2.2 胚培养研究进展
  • 1.2.3 影响胚培养成苗率的因素
  • 1.2.4 胚培养存在的问题
  • 1.3 胚珠培养研究进展
  • 1.3.1 胚珠培养的意义
  • 1.3.2 胚珠培养研究现状
  • 1.3.3 胚珠培养存在问题
  • 1.4 幼胚子叶不定芽诱导研究进展
  • 1.4.1 不定芽诱导研究的作用
  • 1.4.2 幼胚子叶再生研究现状
  • 1.4.3 幼胚子叶不定芽诱导的影响因素
  • 1.5 研究目的与意义
  • 第二章 核果类果树远缘杂交研究
  • 2.1 材料和方法
  • 2.1.1 杂交组合的选配
  • 2.1.2 花粉的采集
  • 2.1.3 授粉
  • 2.1.4 坐果率的调查及杂种胚败育时期的确定
  • 2.2 结果与分析
  • 2.2.1 不同杂交组合亲和性的比较
  • 2.2.2 杂种胚败育发育情况分析
  • 2.2.3 杂种胚败育时期的确定
  • 2.3 讨论
  • 2.3.1 核果类果树远缘杂交不亲和及败育发生分析
  • 2.3.2 胚挽救技术用于远缘杂交育种
  • 第三章 杏、桃及杂种胚的胚珠培养研究
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 材料
  • 3.1.2 外植体制备及培养程序
  • 3.1.3 培养基筛选
  • 3.1.4 胚珠培养研究
  • 3.2 结果与分析
  • 3.2.1 凯特杏胚珠培养
  • 3.2.2 桃及杂交种胚珠培养
  • 3.3 讨论
  • 3.3.1 胚挽救技术用于果树杂交育种
  • 3.3.2 胚珠培养影响因素分析
  • 第四章 杏、桃及杂种胚的幼胚子叶不定芽诱导
  • 4.1 材料与方法
  • 4.1.1 材料
  • 4.1.2 方法
  • 4.1.3 不定芽诱导
  • 4.1.4 幼胚子叶不定芽后期培养
  • 4.1.5 统计方法
  • 4.2 结果与分析
  • 4.2.1 凯特杏幼胚子叶再生
  • 4.2.2 桃及杂交种幼胚子叶再生
  • 4.2.3 不定芽后期培养
  • 4.3 讨论
  • 4.3.1 影响幼胚子叶不定芽诱导的几个因子
  • 4.3.2 不定芽生长与发生特点
  • 第五章 全文结论
  • 5.1 结论
  • 5.1.1 胚珠培养
  • 5.1.2 幼胚子叶诱导不定芽
  • 5.2 主要创新点
  • 5.2.1 核果类果树四级培养体系的建立
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简历
  • 相关论文文献

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