论文摘要
目的 对比研究波动性高浓度葡萄糖与恒定性高浓度葡萄糖对体外培养的人脐静脉内皮细胞粘附分子VCAM-1、ICAM-1表达及NO分泌的影响,从而探讨波动性高血糖在糖尿病慢性血管并发症中的致病机制。 方法 从人脐静脉中提取并体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为4组,分别加入含不同浓度葡萄糖(5.5mmol/L、20mmol/L、5.5/20mmol/L每8小时轮换1次)及甘露醇(20mmol/L)的条件培养液,每间隔8小时更换新鲜条件培养液一次,一共作用7天。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测VCAM-1、ICAM-1基因mRNA的表达,免疫细胞化学检测VCAM-1、ICAM-1蛋白表达,硝酸还原酶法检测细胞培养液上清中NO的含量。 结果 (1) 恒定性高浓度葡萄糖(20mmol/L)与波动性高浓度葡萄糖(5.5/20mmol/L)作用于人脐静脉内皮细胞7天后,两组内皮细胞VCAM-1与ICAM-1mRNA的表达水平均增高。其中VCAM-1mRNA的表达水平分别为对照组的151%(P<0.01)、212%(P<0.001),以波动性高浓度葡萄糖组增高幅度尤为明显,与恒定性高浓度葡萄糖组比较,差异有显著性(P<0.01);两组内皮细胞ICAM-1mRNA的表达水平均增高,分别为对照组的173%(P<0.01)、198%(P<0.01),相对于恒定性高浓度葡萄糖组,波动性高浓度葡萄糖组ICAM-1mRNA表达水平的增高幅度更加明显,差异有显著性(P<0.01)。 (2) 恒定性高浓度葡萄糖(20mmol/L)与波动性高浓度葡萄糖(5.5/20 mmol/L)作用于人脐静脉内皮细胞7天后,两组内皮细胞VCAM-1与ICAM-1蛋白的表达水平均增高。其中VCAM-1蛋白的表达水平分别为对照组的222%(P<0.001)、487%
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