论文摘要
目的：肝纤维化是慢性肝炎和慢性肝损伤的共同特征，并导致肝硬化，其特征为细胞外基质的增加，到目前为止，仍缺乏有效的治疗策略。自身免疫反应在肝纤维化过程中发挥了重要的作用。槲皮素（Quercetin，3，3，4，5，7-pentahydroxy flavone）是广泛存在于蔬菜和水果的异黄酮类植物雌激素，槲皮素具有潜在抑制炎症的作用，并在一些体内体外实验中得到了验证。但是由于槲皮素难溶于水，血浆半衰期短，注射剂量大，因此在本研究中，利用PEG-PE脂质体包裹槲皮素以增加水溶性和延长血浆循环时间。本研究通过反复注射刀豆蛋白A（Con A）建立肝纤维化模型，利用PEG-PE脂质体槲皮素治疗，观察其疗效，探讨PEG-PE脂质体槲皮素的潜在临床应用。同时检测NF-κB与TGF-β1这两种重要的纤维化相关基因的表达水平，探讨其抗肝纤维化的机制。方法：经尾静脉以每只小鼠12．5 mg／kg注射6次，每周一次以构建肝纤维化模型。小鼠每日经尾静脉以0．5 mg／kg注射PEG-PE脂质体槲皮素。第6次Con A注射后1周处死小鼠，通过肝组织病理切片H&E染色和MassonTrichrome染色评价肝脏组织改变和胶原蛋白生成。同时利用免疫组化和real-time RT-PCR检测小鼠肝脏NF-κB与TGF-β1的表达。结果：H&E染色结果显示，PEG-PE脂质体槲皮素抑制了淋巴细胞浸润、肝成纤维细胞增生和纤维条索形成。Masson Trichrome染色结果显示，PEG-PE脂质体槲皮素抑制胶原纤维的生成，组织学定量分析光绿染色区域提示Con A对照组和空白脂质体组小鼠肝脏胶原蛋白生成分别为7．36％和8．13％，PEG-PE脂质体槲皮素组胶原蛋白生成为1．75％（P＜0．001）。另外，免疫组化发现PEG-PE脂质体槲皮素组NF-κB阳性细胞较Con A对照组和空白脂质体对照组显著减少，Real-time RT-PCR检测结果发现PEG-PE脂质体槲皮素治疗后小鼠肝组织中的NF-κB与TGF-β1的mRNA水平较Con A对照组低。结论：1、PEG-PE脂质体槲皮素能明显减轻Con A诱导的小鼠肝纤维化组织学改变和胶原蛋白生成。2、槲皮素可以抑制NF-κB在肝内的表达。3、槲皮素可以抑制提示TGF-β1在肝内的表达，提示槲皮素抗肝纤维化机制与此相关。