论文摘要
第一部分 无镁诱导体外培养大鼠海马神经元癫痫模型的建立 目的 研究体外原代培养新生大鼠海马神经元的方法，观察神经元的纯度、生长特性和生存状态，并观察在无镁培养液(Mg2+-free media)短暂作用后神经元产生癫痫样放电的情况，以建立一种海马神经元的癫痫模型，为进一步探讨癫痫的发病机制提供基础。 方法 取新生24h的wistar大鼠分离海马神经元培养，采用神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）鉴定神经元，倒置相差显微镜下观察神经元的生长情况。培养至第10天采用全细胞膜片钳技术记录神经元在无镁培养液处理不同时间后的放电情况，并应用透射电镜和流式细胞术检测神经元的生存状态。 结果 神经元种植12～24h后大部分贴壁，随时间延长形态多变，突起逐渐增多，神经元突起间互相接触形成网络。培养第7～10d时细胞最为丰满，到28d培养液中有悬浮的细胞碎片。NSE鉴定阳性反应细胞的纯度第3天为95.2±4.4％，第10天为90.3±6.8％。神经元经无镁液处理0.5h开始出现癫痫样放电，3h后放电达稳定状态，可持续至恢复正常细胞外液后96h。与对照组相比，无镁液
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