饥饿期粪肠球菌生物膜的形成及次氯酸钠溶液对其作用研究

饥饿期粪肠球菌生物膜的形成及次氯酸钠溶液对其作用研究

论文摘要

目的:体外建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型,研究不同浓度次氯酸钠溶液对其作用效果。方法:实验一:粪肠球菌(ATCC29212)保种株活化制备成菌悬液,将菌悬液滴加到新鲜配制的TSB培养液中,分别在培养0h、2h、4h、6h、8h、10h、24h、48h、、72h、96h后,取100μl菌液于96孔无菌平底组织培养板中,用MTT分析法检测不同时间点粪肠球菌的细菌活性,绘制粪肠球菌生长曲线。实验二:在玻片上建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型。PBS缓冲液轻柔冲洗两次,暗室下荧光染色15min后,湿润状态置于激光共聚焦显微镜下,观察对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜的形态特点。实验三:在24孔无菌平底组织培养板内,建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型,分别以1%、2.5%、5.25%次氯酸钠溶液作用于各时期粪肠球菌生物膜表面,30s、5min、10min后终止药物作用,以10倍连续稀释法,对用药前、后生物膜进行活菌计数,检测其用药后活菌降低量,并进行统计学分析。同时以共聚焦显微镜观察各时期生物膜在药物作用后,粪肠球菌生物膜样本的表面变化。结果:实验一:0-8h,粪肠球菌在充足的营养环境中细菌大量繁殖,具有高度的活性,呈对数期;8-24h,随着培养时间的延长,细菌活性达到高水平并维持在相对恒定的状态,为稳定期;48h后,随着培养液中营养物质的消耗,细菌开始大量死亡,但仍有细菌存活并保持一定活性,为饥饿期。实验二:共聚焦显微镜观察显示,粪肠球菌生物膜具有立体的空间结构、形态多样,由死细菌和活细菌组成。饥饿期生物膜较其它两时期生物膜细菌密度低。实验三:次氯酸钠溶液用药后,各时期粪肠球菌生物膜中的活菌降低量,饥饿期低于稳定期,也低于对数期,结果具有统计学意义(p<0.05)。各时期粪肠球菌生物膜药物作用30s、5min、10min时,5.25%次氯酸钠溶液作用下的活菌降低量分别高于2.5%、1%次氯酸钠溶液(P<0.05);药物作用30s时,1%与2.5%次氯酸钠溶液间具有统计学意义(P<0.05);而药物作用5min、10min时,1%与2.5%次氯酸钠溶液间无统计学意义(P>0.05)。结论:1.粪肠球菌可以忍受饥饿条件,在低营养环境中保持活性,长期存活。2.饥饿期粪肠球菌具有形成生物膜的能力,生物膜形态不规则,表面活细菌较少,具有典型的三维立体结构。3.饥饿期粪肠球菌生物膜与对数期、稳定期相比,在相同药物浓度、相同作用时间内对次氯酸钠更具有耐药性。相同作用时间内,5.25%次氯酸钠溶液对饥饿期粪肠球菌生物膜的杀菌效果最佳;相同药物浓度作用时,10min对饥饿期粪肠球菌生物膜的杀菌效果最佳。

论文目录

  • 一、摘要
  • (一) 中文摘要
  • (二) 英文摘要
  • 二、正文
  • (一) 前言
  • (二) 实验一
  • (三) 实验二
  • (四) 实验三
  • (五) 讨论
  • (六) 结论
  • (七) 参考文献
  • 三、附图
  • 四、综述
  • (一) 正文
  • (二) 参考文献
  • 五、致谢
  • 相关论文文献

    • [1].鹅饥饿综合征的病因及防治[J]. 畜牧兽医科技信息 2019(12)
    • [2].达氏鲟2种胰岛素样生长因子的克隆及其对饥饿胁迫的响应[J]. 西南农业学报 2020(02)
    • [3].3亿中国人正面临“隐性饥饿”,你的身体真的“吃好了”吗?[J]. 健康中国观察 2019(12)
    • [4].小康梦已经照进现实[J]. 当代广西 2020(20)
    • [5].饥饿还在[J]. 中国科技信息 2019(09)
    • [6].艺术家集体“饥饿”[J]. 小康 2018(22)
    • [7].四种原因导致“假饿”[J]. 心血管病防治知识(科普版) 2011(01)
    • [8].越冬饥饿蜂群解救方法[J]. 中国蜂业 2016(11)
    • [9].《干枯、黑暗、饥饿、节约、希望之希望》[J]. 中国机关后勤 2017(10)
    • [10].动力之源——改革[J]. 中国外汇 2015(16)
    • [11].感谢饥饿[J]. 小猕猴学习画刊 2019(24)
    • [12].饥饿能够“饿死”肿瘤,延缓衰老?[J]. 恋爱婚姻家庭(下半月) 2020(05)
    • [13].饿的恐惧与饱的困惑(外一篇)[J]. 青年作家 2020(06)
    • [14].饥饿的时候这10种食物千万别吃![J]. 保健文汇 2018(11)
    • [15].在饥饿地狱中[J]. 语数外学习(高中版中旬) 2019(07)
    • [16].注意饮食健康 警惕隐形饥饿[J]. 中国食品 2018(01)
    • [17].饥饿是孤独的[J]. 诗潮 2017(12)
    • [18].疯狂编辑部之拼音的发明[J]. 作文大王(中高年级) 2017(11)
    • [19].饥饿的磊编[J]. 意林(原创版) 2015(12)
    • [20].饥饿的种子[J]. 中学生 2016(03)
    • [21].关于饥饿的故事[J]. 参花(下) 2016(01)
    • [22].饥饿时一定别吃这六种食物[J]. 幸福家庭 2016(06)
    • [23].为何不饿胃也叫[J]. 家庭科技 2016(03)
    • [24].还他们一个美好童年[J]. 天天爱学习 2016(10)
    • [25].诚如饥饿,无法逃避——读《饥饿游戏》[J]. 学习博览 2014(12)
    • [26].愿世界更美好[J]. 学生之友(童花果) 2014(Z2)
    • [27].保持饥饿 保持愚蠢[J]. 杂文月刊(文摘版) 2015(03)
    • [28].饥饿基因[J]. 芳草(经典阅读) 2015(04)
    • [29].捕捉机会的“羊”[J]. 意林(少年版) 2015(13)
    • [30].感谢饥饿[J]. 少年文艺(中旬版) 2015(09)

    标签:;  ;  ;  ;  

    饥饿期粪肠球菌生物膜的形成及次氯酸钠溶液对其作用研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢