论文摘要
隐孢子虫是一种严重危害人和动物健康的寄生原虫,广泛寄生于人、哺乳动物、鸟类、两栖类和鱼类的消化道和呼吸道中,引起腹泻等症状。对免疫功能正常的动物,腹泻可自限,但免疫功能缺陷时,常表现水泻不止甚至死亡。隐孢子虫不同种性状有别,寄生宿主的对象不一。本研究利用PCR-RFLP技术成功鉴定了本实验室收集的上海地区分离的鼠源、兔源、鸡源、猪源、牛源隐孢子虫虫种和基因型,共有3个虫种和3个基因型,其中鼠源隐孢子虫虫种为微小隐孢子虫鼠基因型（C.parvum Mouse genotype）;兔源隐孢子虫虫种为微小隐孢子虫兔基因型（C.parvum Rabbit genotype）;猪源隐孢子虫虫种为微小隐孢子虫猪基因型II（C.parvum Pig genotype II）;鸡源隐孢子虫虫种为贝氏隐孢子虫（C.baileyi）;牛源隐孢子虫虫种为安氏隐孢子虫（C.andersoni）。成功克隆了上海地区分离的微小隐孢子虫鼠基因型、兔基因型、猪基因型II和安氏隐孢子虫的子孢子表面抗原CP15基因,其编码基因为大小为357bp,编码119个氨基酸残基,不同来源的CP15基因序列高度一致。其中安氏隐孢子虫的CP15基因成功克隆为本研究首次报道。成功克隆了上海地区分离的微小隐孢子虫鼠基因型、兔基因型和猪基因型II的子孢子表面抗原P23基因,大小为342bp,编码113个氨基酸,不同来源的P23基因序列高度一致。成功构建了微小隐孢子虫鼠基因型的原核重组表达质粒pET-28a（+）-CP15和pET-28a（+）—P23,实现了CP15和P23基因在大肠杆菌中的表达。ELISA初步分析表明CP15和P23基因具有良好的抗原性。上述工作的进展,为逐步查明上海地区目前流行的隐孢子虫病原种类、掌握隐孢子虫病流行状况和特点提供了基础,具有重要的公共卫生学意义。隐孢子虫子孢子表面抗原CP15和P23基因的成功克隆和表达,为进一步利用基因的表达产物进行免疫预防和诊断研究提供了条件。
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