论文摘要
目的:寻求不同温度下脂肪组织冻存时适宜的低温保护剂;研究冷冻脂肪组织的活力及移植成活率。方法:1、在-16℃(普通家用冻箱)、-80℃(深低温冰箱)及-196℃(液氮)条件下,加入不同的低温保护剂,冷冻脂肪组织,24小时后测定肌酸激酶活力进行低温保护剂的筛选。2、在上述温度条件下加入相应的低温保护剂,冻存脂肪颗粒,分别于2周、4周、8周时取出复温,采用肌酸激酶法、台盼蓝染色法测定其活力;采用生物移植法研究其移植成活率,于移植后7周切取移植物,测量其体积、行苏丹3染色。结果:1、-196℃组以15%二甲基亚砜,6%丙二醇为低温保护剂时脂肪组织活力最高;-80℃组为15%二甲基亚砜;-16℃组为5%二甲基亚砜+3%丙二醇+1%聚乙二醇。2、-196℃组及-80℃组较好保持了脂肪细胞活力,冻存8周后分别达冻存前的70%和60%,各时间点统计学比较无明显差异;而-16℃组冻存2周后活力已不到50%,各时间点统计学比较差异显著(P=0.001),随时间延长表现为进行性下降趋势。3、-196℃组及-80℃组移植成活率与新鲜脂肪移植成活率相比无统计学差异,-16℃组移植成活率与新鲜脂肪移植成活率比较统计学差异显著(P=0.000);-16℃组移植物苏丹3染色观察以炎性反应为主,几乎无成活脂肪细胞,其余各组均可见大量
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