论文摘要
本文以青春期雌性大鼠为研究对象,采用灌饲和日粮添加两种试验方法分别研究异黄酮染料木素（Genistein,Gen）和亚麻籽木脂素（Flaxseed Lignans,SDG）对大鼠乳腺发育及相关性激素的影响,结合RP-HPLC、RIA、组织切片、核酸比值等技术,对动物血清与乳腺发育相关的激素水平以及植物雌激素在血清及乳腺组织中代谢产物的浓度进行了初步的研究,并在此基础上探讨了两种植物雌激素对乳腺发育的作用机制,为其新功能的开发研究提供实验依据。本试验主要包括以下三章。1染料木素对青春期雌性大鼠乳腺发育及相关性激素影响的研究本试验通过灌饲和日粮添加染料木素两种给药方式,应用组织切片技术、核酸比值、放射免疫分析等方法研究染料木素对青春期雌性大鼠乳腺发育及性激素的影响。灌饲染料木素（6 mg/100 g体重）结果表明:试验组大鼠乳腺相对体重百分比与对照组比较提高35.41%（P＜0.01）;乳腺组织RNA与DNA含量分别提高27.24%（P＜0.01）和4.27%（P＞0.05）;RNA/DNA值升高22.07%（P＜0.01）。提示:染料木素主要能够促进大鼠乳腺细胞体积增大,促进乳腺发育。放射免疫分析结果显示:试验组大鼠血清17β-雌二醇水平较对照组升高26.68%（P＜0.01）;孕酮水平提高130.54%（P＜0.01）。提示:染料木素可能通过与下丘脑—垂体—卵巢、子宫的雌性激素的受体结合,促进与乳腺发育相关的雌激素和孕酮的生成和释放,从而增加血清性激素水平。日粮添加染料木素结果表明:试验组大鼠乳腺相对体重的百分比增加25.45%（P＜0.01）;乳腺组织RNA与DNA含量分别升高24.49%（P＜0.01）和10.54%（P＜0.05）,RNA/DNA值升高12.63%（P＜0.05）。试验组大鼠血清17β-雌二醇水平较对照组提高9.95%（P＜0.05）;孕酮水平提高247.92%（P＜0.01）。两系列试验结果表明,灌饲和日粮添加染料木素结果基本一致,提示可能通过神经内分泌途径促进大鼠的乳腺发育。2亚麻籽木脂素对青春期雌性大鼠乳腺发育及相关性激素影响的研究本试验通过灌饲和日粮添加亚麻籽木脂素两种给药方式,应用核酸比值、放射免疫分析、组织切片等方法,研究亚麻籽木脂素对青春期雌性大鼠乳腺发育及相关性激素的影响,并探讨其作用机制。灌饲含20%亚麻籽木脂素粗提物（30 mg/100 g体重）结果表明:与对照组比较,大鼠乳腺相对体重百分比升高23.11%（P＜0.01）,乳腺组织RNA含量升高26.34%（P＜0.01）,DNA含量增加不显著,乳腺组织RNA/DNA值升高23.11%（P＜0.01）.提示:亚麻籽木脂素能够促进大鼠乳腺细胞体积增大,乳腺呈肥大型发育。试验组大鼠血清17β-雌二醇和孕酮水平均较对照组升高（P＜0.01）。提示:亚麻籽木脂素可能通过下丘脑—垂体—性腺轴,促进与乳腺发育相关的雌激素和孕酮的生成和释放。日粮添加含20%亚麻籽木脂素粗提物100 mg/kg;试验组Ⅱ在每kg基础日粮中添加亚麻籽木脂素粗提物100 mg,并以杆菌肽锌、硫酸粘杆菌素预混剂,用于抑制消化道微生物。组织切片结果表明:试验组Ⅰ和试验组Ⅱ大鼠的乳腺导管增粗,腺泡体积增大,乳腺发育水平均高于对照组,而试验Ⅰ组高于Ⅱ组;乳腺组织DNA、RNA含量和RNA/DNA值均显著高于对照组（P＜0.05）。提示:亚麻籽木脂素能够促进乳腺细胞增殖,促进细胞体积增大。血清放免检测结果显示:试验组Ⅰ17β-雌二醇和孕酮水平较对照组分别显著（P＜0.05）、极显著增加（P＜0.01）;与试验组Ⅱ相比,17β-雌二醇和孕酮分别增加（P＞0.05）、极显著增加（P＜0.01）。提示:亚麻籽木脂素可能通过与下丘脑、垂体、性腺的雌激素受体结合,促进雌二醇和孕酮的生成和释放。两系列试验表明:灌饲和日粮添加20%亚麻籽木脂素粗提物结果基本一致,均能够促进青春期雌性大鼠乳腺发育。3亚麻籽木脂素及其代谢产物在大鼠血清及乳腺组织中含量的测定木脂素类化合物广泛存在于自然界植物中,能通过动物消化道微生物及相关酶的作用转化成动物木脂素,二者均具有雌激素样和抗雌激素样生物活性。本试验应用RP-HPLC检测大鼠血清及乳腺组织中亚麻籽木脂素及其两种主要代谢产物肠二醇和肠内脂的含量.样品为第五章两系列试验动物的血清及乳腺组织。灌饲含20%亚麻籽木脂素粗提物（30 mg/100 g体重）结果表明:试验组大鼠血清三种木脂素,即SDG、肠二醇（END）、肠内脂（ENL）含量分别为:30,17,39μg/mL,均较对照组升高（P＜0.01）。在大鼠乳腺组织三种木脂素含量分别为:0.364,0.174,0.102 mg/g,亦均较对照组极显著升高（P＜0.01）。日粮添加含20%亚麻籽木脂素粗提物100 mg/kg,结果表明:试验Ⅰ组血清和乳腺组织亚麻籽木脂素及其代谢产物肠二醇（END）和肠内脂（ENL）含量均极显著增加（P＜0.01）;而添加抗生素抑制消化道微生物作用后,木脂素在血清及乳腺组织的含量极显著降低。结论:亚麻籽木脂素通过消化道微生物作用能够转化成动物木脂素,可以被吸收入血,到达乳腺组织。提示:亚麻籽木脂素和/或其主要代谢产物END、ENL可能通过与乳腺细胞直接作用和神经内分泌途径共同促进大鼠的乳腺发育。
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