导读:本文包含了哇巴因结合肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:哇巴因,噬菌体展示肽库,结合肽,血管内皮细胞
哇巴因结合肽论文文献综述
徐忠伟,徐瑞成,陈小义,刘英富[1](2009)在《从噬菌体7肽库中筛选的哇巴因结合肽对血管内皮细胞的保护作用》一文中研究指出目的:寻找与哇巴因高亲和力结合并抑制其生物功能的相关小分子肽,为治疗原发性高血压提供新策略。方法:以哇巴因为筛选分子,应用M13噬菌体呈现随机7肽库进行筛选。经过3轮生物淘筛,并通过ELISA法鉴定,对噬菌体阳性克隆ssDNA电泳鉴定和基因测序分析。委托合成筛选获得哇巴因结合肽,采用放射配基受体结合法检测其结合活性;MTT法检测血管内皮细胞的增殖抑制率,Hoechst33342/PI双荧光染色检测细胞形态学变化;利用RT-PCR和细胞免疫荧光检测钠泵α1、β1的表达水平;荧光探针检测细胞内游离Na+浓度变化。结果:筛选获得14个阳性克隆,基因测序显示:哇巴因结合肽一致率达64.3%(9/14)。委托合成肽(Arg-Cys-Met-Thr-Ser-Arg-Ser)。放射性配基受体结合法检测显示,合成的哇巴因结合肽能够与哇巴因结合。哇巴因结合肽+哇巴因的EAhy926细胞组增殖抑制率小于哇巴因组(P<0.05);Hoechst33342/PI双荧光染色显示细胞死亡数量减少;RT-PCR和免疫细胞化学检测钠泵α1、β1亚单位转录和翻译水平,显示哇巴因结合肽能拮抗哇巴因所引起钠泵α1亚单位表达的上调、β1亚单位的下调作用;荧光探针显示哇巴因结合肽能够拮抗哇巴因对钠泵的抑制作用。结论:哇巴因特异性结合肽能够阻抑哇巴因对血管内皮细胞的抑制增殖和诱导死亡作用,为研究哇巴因与钠泵的相互作用机制及进一步研究抗哇巴因的分子药物奠定基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2009年10期)
张明娟,吕卓人[2](2004)在《哇巴因结合肽氨基酸序列的测定》一文中研究指出目的确定能与哇巴因特异性结合的多肽氨基酸及基因序列,为实现阻断或拮抗哇巴因与钠泵的作用奠定实验基础。方法采用噬菌体随机肽库表面呈现技术筛选出哇巴因特异性结合肽,通过测序,获得氨基酸序列,进行同源性分析、合成筛选出的12肽,人工合成哇巴因结合肽,并检测其与哇巴因的结合能力。结果从噬菌体12肽库中筛选出3种多肽。肽A(12肽)的筛选一致率达到667%(8/12);肽B(8肽)筛选一致率为167%(2/12);肽C(12肽)为83%(1/12);仅1例未见插入的多肽片段。GenBank中蛋白质同源性分析结果肽A、B、C均未见同源蛋白。获得特异性哇巴因结合肽的氨基酸序列为Leu-Leu-Ala-Asp-Thr-Thr-His-His-Arg-Pro-Trp-Thr。结论哇巴因特异性结合肽氨基酸及DNA序列的获得,为哇巴因的研究提供了实验基础;同时,本研究所采用的方法也为使用噬菌体随机肽库进行甾体类激素特异性受体(配体)的筛选提供了可靠的实验依据。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2004年09期)
张明娟,吕卓人,冯新利,雷在中[3](2004)在《哇巴因结合肽拮抗哇巴因抑制钠泵作用的研究》一文中研究指出目的 获得特异性的哇巴因结合肽 (OCP) ,拮抗或阻断哇巴因 (EO)对Na+ 、K+ ATP酶的抑制作用 ,为高血压的治疗提供理论和实验依据。方法 采用生物淘洗的方法 ,筛选噬菌体展示 12肽库。随机挑选所筛出的结合肽 ,经扩增、DNA提取及测序 ,获得其基因序列 ,然后推导出其氨基酸序列。选择序列一致率最高的肽序列 ,进行肽合成。采用红细胞86Rb摄取率实验测定OCP拮抗EO对Na+ 、K+ ATP酶的抑制作用。结果 Leu Leu Ala Asp Thr Thr His His Arg Pro Trp Thr为筛选肽序列一致率最高的肽序列。红细胞86Rb摄取实验结果表明 ,OCP可以阻断EO对红细胞膜钠泵的抑制作用 ,可以使红细胞摄86Rb率从 6 0 %升高到 80 %左右 ,呈现一定的剂量依赖关系。结论 本实验结果不仅获得了特异性OCP ,而且为高血压的治疗以及与EO相关疾病的诊断、治疗提供了一条新的途径。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2004年03期)
张明娟,吕卓人[4](2003)在《特异性哇巴因结合肽的筛选及其结合活性的测定》一文中研究指出目的 本研究的目的在于寻找特异性哇巴因结合肽(Ouabainconjugatedpeptide,OCP) ,降低哇巴因水平。 方法 利用噬菌体随机肽库表面呈现技术筛选出OCP ,通过测序 ,分析 ,获得氨基酸序列 ,合成筛选出的 12肽 ,采用放射性配基受体结合法 (radioligandbindingassay ,RRA)检测哇巴因结合肽与哇巴因的结合能力。结果 从噬菌体 12肽库中筛选出 3种多肽 ,其中肽A(12肽 )的筛选一致率达到 0 6 7(8/12 )。RRA实验结果显示 ,合成的肽与3 H ouabain具有一定的结合能力 ,平衡解离常数为 1 0 87nmol·L-1,受体密度为12 0pmol·g-1Pro ,IC50 =1 4 6× 10 -4mol·L-1,而且两者之间的结合无相互协同作用。结论 特异性OCP的获得 ,不仅获得了与哇巴因特异结合的蛋白质序列 ,而且为哇巴因的检测及高血压的治疗提供了有价值的实验室数据(本文来源于《中国药理学通报》期刊2003年03期)
张明娟,吕卓人,杨广笑,王全荥[5](2002)在《利用噬菌体肽库筛选特异性哇巴因结合肽》一文中研究指出目的 寻找与哇巴因特异性结合的多肽 ,为实现阻断或拮抗哇巴因与钠泵的作用 ,减少EO致高血压作用奠定实验及理论基础。方法 采用噬菌体随机肽库表面呈现技术筛选出哇巴因特异性结合肽 ,通过测序 ,获得氨基酸序列 ,进行同源性分析 ,合成筛选出的 12肽 ,采用放射性配基受体结合法检测哇巴因结合肽与哇巴因的结合能力。结果 从噬菌体 12肽库中筛选出叁种多肽 ,肽A(12肽 )的筛选一致率达到 6 6 .7% (8 12 ) ;肽B(8肽 ,插入片段中出现终止子 )筛选一致率为 16 .7% (2 12 ) ;肽C(12肽 )为 8.3% (1 12 ) ;仅 1例未见插入的多肽片段。Genbamk中蛋白质同源性分析结果 :肽A、B、C均未见同源蛋白。结论 哇巴因特异性结合肽蛋白质序列的获得 ,为哇巴因的研究提供了实验基础。(本文来源于《高血压杂志》期刊2002年05期)
哇巴因结合肽论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的确定能与哇巴因特异性结合的多肽氨基酸及基因序列,为实现阻断或拮抗哇巴因与钠泵的作用奠定实验基础。方法采用噬菌体随机肽库表面呈现技术筛选出哇巴因特异性结合肽,通过测序,获得氨基酸序列,进行同源性分析、合成筛选出的12肽,人工合成哇巴因结合肽,并检测其与哇巴因的结合能力。结果从噬菌体12肽库中筛选出3种多肽。肽A(12肽)的筛选一致率达到667%(8/12);肽B(8肽)筛选一致率为167%(2/12);肽C(12肽)为83%(1/12);仅1例未见插入的多肽片段。GenBank中蛋白质同源性分析结果肽A、B、C均未见同源蛋白。获得特异性哇巴因结合肽的氨基酸序列为Leu-Leu-Ala-Asp-Thr-Thr-His-His-Arg-Pro-Trp-Thr。结论哇巴因特异性结合肽氨基酸及DNA序列的获得,为哇巴因的研究提供了实验基础;同时,本研究所采用的方法也为使用噬菌体随机肽库进行甾体类激素特异性受体(配体)的筛选提供了可靠的实验依据。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
哇巴因结合肽论文参考文献
[1].徐忠伟,徐瑞成,陈小义,刘英富.从噬菌体7肽库中筛选的哇巴因结合肽对血管内皮细胞的保护作用[J].细胞与分子免疫学杂志.2009
[2].张明娟,吕卓人.哇巴因结合肽氨基酸序列的测定[J].中国病理生理杂志.2004
[3].张明娟,吕卓人,冯新利,雷在中.哇巴因结合肽拮抗哇巴因抑制钠泵作用的研究[J].西安交通大学学报(医学版).2004
[4].张明娟,吕卓人.特异性哇巴因结合肽的筛选及其结合活性的测定[J].中国药理学通报.2003
[5].张明娟,吕卓人,杨广笑,王全荥.利用噬菌体肽库筛选特异性哇巴因结合肽[J].高血压杂志.2002