纳米载药微粒对粪肠球菌的体外抗菌研究

论文摘要

目的比较红霉素纳米羟基磷灰石缓释微球（nHA-PHBV-PEG-EM）、红霉素纳米脂质体（EMNP）和氢氧化钙（Ca（OH）2）在体外对粪肠球菌的抑菌杀菌作用,分析其优缺点,为临床推广使用纳米载药微粒作为根管消毒剂提供实验依据。方法1.利用溶剂蒸发法制备nHA-PHBV-PEG-EM,采用乙醇注入-硫酸铵梯度-电机搅拌法制备EMNP,完成后检测纳米载药微粒的形态、粒径、载药量及包封率,并研究其体外释药特性。2.称量一定量成品Ca（OH）2粉剂,加入脑心浸液培养基（BHI）搅拌均匀,制备成氢氧化钙悬浊液。3.采用液体稀释法进行药敏实验,37℃厌氧培养粪肠球菌24小时后,肉眼观测I nHA-PHBV-PEG-EM. EMNP和Ca（OH）2在体外对粪肠球菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,并用MTT辅助确定MIC。4.运用液体扩散法比较不同浓度nHA-PHBV-PEG-EM、EMNP和Ca（OH）2在体外肉眼观察下对粪肠球菌抑菌圈的大小,评估纳米载药微粒的抗菌效果。5.制备2.0mg/ml nHA-PHBV-PEG-EM、2.5mg/ml EMNP和3.5mg/ml Ca（OH）2各2ml,加入0.1ml菌液后放入37℃厌氧培养箱内,分别在1天,2天,3天,4天,5天,6天时用灭菌移液枪从试管中取O.1m1液体移植于脑心浸液琼脂培养基（BHIA）上,平行各做三皿,作厌氧培养24h后,记录所得平板菌落数,用统计软件分析处理。结果1. nHA-PHBV-PEG-EM粒径分布较均匀,平均粒径控制在106.6nm,载药量为8.34%,包封率达85.84%,体外释药持续稳定。2.EMNP粒径分布较均匀,平均粒径控制在102.7nm,包封率为82.40%,载药量达8.22%,体外释药持续稳定。3.液体稀释法MIC和MBC实验结果：nHA-PHBV-PEG-EM的MIC为2.5mg/ml, MBC为3.0mg/ml; EMNP的MIC为3.0mg/ml, MBC为3.5mg/ml;Ca（OH）2的MIC为4.0mg/ml,MBC为4.5mg/ml。加入MTT后测得的MIC与液体稀释法所得的MIC相同。4.液体扩散法实验结果：浓度在2.0mg/ml以上的nHA-PHBV-PEG-EM组和EMNP组,及浓度在3.0mg/ml以上的Ca（OH）2组对粪肠球菌的生长均有抑制作用。nHA-PHBV-PEG-EM组与EMNP组比较,其差异性不具有统计学意义（P>0.05）；nHA-PHBV-PEG-EM组与Ca（OH）2组以及EMNP组与Ca（OH）2组,其组间差异具有统计学意义（P<0.05）。5.用药时间对抑菌效果的影响：2.0mg/ml nHA-PHBV-PEG-EM的抑菌作用随时间延长而增强,第5天以后抑菌作用趋于稳定；2.5mg/ml EMNP的抑菌作用随时间变化而增强,具有较佳的缓释效果；3.5mg/ml Ca（OH）2抑菌效果随时间延长而减弱,在第6天时药物作用消失,出现菌落突增现象。结论1.体外抑菌实验表明,nHA-PHBV-PEG-EM、EMNP及Ca（OH）2对粪肠球菌均具有一定抗菌作用。纳米载药微粒的抑菌效果优于氢氧化钙。2. nHA-PHBV-PEG-EM和EMNP具有缓释药物效果,抑菌作用在一定时间范围内随时间增长而增强。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 英文縮略语词表
• 前言
• 第一章 nHA-PHBV-PEG-EM的制备
• 1.1 引言
• 1.2 材料与方法
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 第二章 EMNP的制备
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 2对粪肠球菌MIC和MBC的测定'>第三章 nHA-PHBV-PEG、EMNP和Ca（OH）₂对粪肠球菌MIC和MBC的测定
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.3 结果
• 3.4 讨论
• 2抑菌圈大小测定'>第四章 nHA-PHBV-PEG-EM、EMNP和Ca（OH）₂抑菌圈大小测定
• 4.1 引言
• 4.2 材料与方法
• 4.3 结果
• 4.4 讨论
• 2抑菌效果影响'>第五章 用药时间对nHA-PHBV-PEG-EM、EMNP和Ca（OH）₂抑菌效果影响
• 5.1 引言
• 5.2 材料与方法
• 5.3 结果
• 5.4 讨论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 综述 纳米材料作为药物载体的研究进展
• 参考文献
• 附图
• 致谢