康氏抗纤颗粒抗肝纤维化大鼠的疗效和机理的研究

论文题目: 康氏抗纤颗粒抗肝纤维化大鼠的疗效和机理的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 中医临床基础

作者: 章亭

导师: 陈杨荣,邱全瑛

关键词: 肝纤维化,大鼠,康氏抗纤颗粒,实验研究,细胞培养,药物血清,增殖,凋亡,细胞周期

文献来源: 北京中医药大学

发表年度: 2005

论文摘要: 康氏抗纤颗粒抗肝纤维化大鼠的疗效和机理的研究肝纤维化是指各种致病因素引起的肝脏损害和炎症,在修复过程中导致肝脏细胞外基质异常增多和过度沉积的病理过程。轻者称为肝纤维化,严重者使肝小叶结构改建,假小叶及结节形成,称为肝硬化。其本质是通过细胞因子及其网络的调控,激活肝星状细胞,导致细胞外基质各成分合成增多,而降解相对不足,两者失去动态平衡,导致细胞外基质在肝内过度沉积而引起肝纤维化。目前多认为肝纤维化是可逆性病变,而肝硬化则是很难或不可逆转。肝星状细胞已被证实是肝纤维化中产生细胞间基质最主要的效应细胞。肝星状细胞活化后,生物学性状发生很大的改变,细胞增殖,分泌细胞因子,产生胶原和胶原酶抑制物等,这些功能状态的改变直接或间接地关系到肝纤维化的转归。因此肝星状细胞已经成为肝纤维化研究中的重点和防治肝纤维化的重要靶点。康氏抗纤颗粒是全国首批500名名老中医之一的康良石教授,根据其康氏疫郁理论组成,几十年来运用于临床,取得良好的抗肝纤维化效果。进一步从动物实验及细胞,分子水平探讨该方抗肝纤维化的疗效及作用机理有重要意义。本研究分为整体动物实验和细胞培养实验两个部分: 1 整体动物实验部分: 1.1 目的:观察康氏抗纤颗粒抗肝纤维化的疗效,并初步探讨其抗肝纤维化的作用机制。 1.2 方法:用复合四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,分为正常对照组,模型对照组,康氏抗纤颗粒大剂量组、康氏抗纤颗粒等效剂量组,干扰素组和鳖甲软肝片组。观察动物一般状态、体重、主要脏器体重指数、肝功能、肝纤维化指标、肝组织羟脯氨酸、肝脏病理组织学改变及用免疫组织化学法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。 1.3 结果:康氏抗纤颗粒可以提高实验动物体重,改善动物一般状态,显著改善肝功能、降低肝纤维化指标及肝组织羟脯氨酸水平,减少肝纤维化面积,减少α-SMA及TGF-β1的表达。 1.4 结论:康氏抗纤颗粒具有良好的抗肝纤维化作用,其机制可能与保护肝细胞,调节胶原代谢,减少活化的肝星状细胞有关。 2 细胞培养实验部分 2.1 目的:观察康氏抗纤颗粒药物血清对活化的肝星状细胞(HSC)的增殖、凋亡和细胞周期的影响,并初步探讨其可能的作用机理。 2.2 方法:培养的HSC T6细胞株,加入正常大鼠血清,康氏抗纤颗粒大剂量、康氏抗纤颗粒等效剂量,康氏抗纤颗粒小剂量,干扰素组和鳖甲软肝片药物血清共同培养。用MTT法观察他们对HSC T6的增殖的影响,用流式细胞计数仪观察他们对HSC T6凋亡及细胞周期的影响,用细胞免疫组化染色,病理图像分析方法观察他们对HSC T6表

论文目录:

中文摘要

英文摘要

英文缩略词表

综述部分

综述一中药复方抗肝纤维化动物实验研究进展

综述二肝星状细胞凋亡机制研究进展

前言

整体动物实验部分

实验一肝纤维化大鼠模型的复制

实验二康氏抗纤颗粒对实验性肝纤维化大鼠主要脏器重量及肝功能的影响

实验三康氏抗纤颗粒对实验性肝纤维化大鼠肝纤维化指标及病理形态学影响

实验四康氏抗纤颗粒对肝纤维化大鼠肝组织a-SMA及 TGF-β_1表达的影响

整体动物实验小结

细胞培养实验部分

实验一康氏抗纤颗粒药物血清的制备

实验二康氏抗纤颗粒药物血清对大鼠肝星状细胞增殖的影响

实验三康氏抗纤颗粒药物血清对大鼠肝星状细胞凋亡和细胞周期的影响

实验四康氏抗纤颗粒药物血清对大鼠肝星状细胞TGF-β_1、PDGF-b及 ICAM-1表达的影响

实验五康氏抗纤颗粒药物血清对培养的肝星状细胞Bax、P27及细胞周期调控蛋白CyclinE表达的影响

细胞培养实验小结

总结

致谢

个人简介

附图

发布时间: 2005-07-11

康氏抗纤颗粒抗肝纤维化大鼠的疗效和机理的研究

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