论文摘要
第一部分HIF-1α、SOCS-3、Bax在心脏性猝死心肌中的表达目的检钡HIF-1α、SOCS-3、Bax在心脏性猝死者心肌中的表达及其与心脏性猝死的关系,并探讨HIF-1α、Bax相关性,进而为法医学鉴定心脏性猝死提供客观依据。方法选取25例心脏性猝死者为实验组,25例非心脏性猝死者为对照组。应用免疫组织化学方法检测HIF-1α、SOCS-3、Bax在心肌中的表达。结果1.常规HE染色:在心脏性猝死组中冠心病猝死者20例均可见心肌纤维断裂,心肌间质水肿,间质内见少量出血及淋巴细胞浸润,心肌间质纤维结缔组织增多,部分心肌细胞肥大并脂肪浸润,嗜伊红性增强,部分心肌细胞灶性变性、坏死,细胞轻度水肿,部分心肌细胞核轻度增大,并见畸形核,染色质疏松。冠状动脉左前降支、左旋支、右冠状动脉均见内膜增厚,管腔狭窄程度均>50%,部分管腔闭塞,部分管腔血栓形成。2.免疫组织化学染色:(1)心脏性猝死组每例心肌细胞中可见HIF-1α阳性表达,位于细胞浆中;阴性对照组仅有3例心肌细胞中可见HIF-1α阳性表达,余为阴性;心脏性猝死者心肌HIF-1α的表达明显高于对照组(Uc=6.083,P<0.01)。(2)心脏性猝死组中有22例心肌细胞中可见SOCS-3阳性表达,位于细胞浆中;阴性对照组仅有2例心肌细胞细胞可见阳性表达,余为阴性:心脏性猝死者心肌SOCS-3的表达明显高于对照组(Uc=5.8306,P<0.01)。(3)心脏性猝夕死组每例心肌细胞中可见Bax阳性表达,位于细胞浆中:阴性对照组仅有3例心肌细胞中可见Bax阳性表达,余为阴性;心脏性猝死者心肌Bax蛋白的表达明显高于对照组(Uc=5.573,P<0.01)。(4)在心脏性猝死心肌组织中,HIF-1α表达与Bax表达呈正相关(rs=0.736,P<0.01)。结论1.HIF-1α是反映心肌缺氧、缺血的非常敏感的指标,心脏性猝死患者心肌中HIF-1α的表达在急性心肌缺血早期显著增加。HIF-1α可作为一个早期心肌缺血的敏感的辅助诊断指标,并用于急性心肌缺血缺氧性死亡和其他原因(例如窒息)缺氧造成的死亡的鉴别。2.心脏性猝死患者心肌中SOCS-3的表达在急性心肌缺血早期显著增加,提示它可能参与了心脏性猝死的发病机制,可能成为诊断心脏性猝死的早期、快速、灵敏的病理形态学辅助指标。3.Bax在心脏性猝死患者心肌中有阳性表达,表明在心脏性猝死的心肌缺血中有凋亡调控机制参与。Bax的表达是心肌缺血的早期表现,可能成为诊断心脏性猝死灵敏、可靠的辅助诊断指标。4.HIF-1α与Bax表达的增高与心脏性猝死的发生可能有一定的相关性,二者可能在心脏性猝死的病理变化过程中起协同作用,共同参与调控心肌细胞的凋亡。HIF-1α可能调控Bax,进而促进心肌细胞凋亡第二部分甲醛固定石蜡包埋尸检组织中提取DNA的研究目的比较甲醛固定石蜡包埋尸检组织中3种提取DNA的方法对DNA质量的影响,寻找一种操作简便、污染较少、经济实用的石蜡包埋尸检组织中提取DNA的方法。方法取尸检存档的经甲醛固定石蜡包埋的心肌组织10例,分别以二甲苯脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、试剂盒提取DNA法提取其DNA,然后进行电泳分析、紫外分光光度计测定A260/A280比值及PCR扩增。结果二甲苯脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法提取效率相同。改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法抽提DNA法、二甲苯脱蜡-酚氯仿法分别与试剂盒法所提取DNA的A260/A280值相比较,差异有显著性意义(P<0.01)。以改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法所得DNA为模板,扩增的目的条带亮度与阳性对照相当。结论结果证实改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法简便有效,所用试剂价格低廉,是一种经济实用的甲醛固定石蜡包埋尸检组织DNA提取方法。
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