论文摘要
目的:在手外科领域中,肌腱粘连是肌腱损伤后常见的并发症,其防治一直是外科学界普遍关注的问题。肌腱粘连是指肌腱损伤修复过程中周围组织的增生和侵入,一定的粘连有利于断端获得血管输送血液的营养,同时还可促使成纤维细胞接触肌腱而发挥修复作用。但粘连过多会使修复后的肌腱功能受到限制,严重影响手部的各种运动功能,往往需要通过手术来松解粘连的肌腱,改善肌腱的滑动功能。精细的手术操作和早期的功能锻炼虽可减轻肌腱粘连的程度,但仍不能完全防止粘连的形成,因此,防止粘连是手外科领域至今尚未能解决的难题。由于肌腱的愈合需要有滑液的营养,因此单纯的物理阻隔会影响肌腱的愈合,这就需要找到一种既不影响肌腱愈合,又能阻止其与周围组织粘连的适合材料。壳聚糖是自然界唯一带正电荷多糖,其特有的理化性质已成为医药界及生物医学领域的研究热点。研究证明,壳聚糖具有良好的成胶成膜性、生物可降解性、降解速度可控性,在医用材料领域应用前景广阔。本实验研究旨在制备一种可预防粘连的壳聚糖复合膜,并对其功能、作用机理及应用前景进行探讨。方法:1、实验所需壳聚糖及其衍生物等原料的制备、纯化和性质评价。2、确定复合膜各组分比例,以1,4丁二醇双缩水甘油醚为交联剂,流延法制备羧甲基壳聚糖、N-乙酰化壳聚糖、羟丙基壳聚糖复合膜（CM-C-HP复合膜）,运用扫描电镜、红外光谱、细胞培养、体内植入等方法对复合膜的理化性质、生物相容性、生物降解性进行系统评价。3、以鸡为实验模型,切除趾浅屈肌腱,横断趾深屈肌腱,形成趾深屈肌腱断裂动物模型。设置实验组、阳性对照组、阴性对照组和正常对照组,运用生物力学测试、组织学检测、彩超声像图等方法对复合膜预防肌腱粘连作用进行评价。4、利用MTT、透射电镜、凝胶电泳、流式细胞仪等测定方法研究羧甲基壳聚糖和羟丙基壳聚糖共混糖溶液对L929成纤维细胞生长的影响,从复合膜抑制成纤维细胞生长的角度探讨复合膜预防肌腱粘连的机理。结果:1、制备出的材料样品符合医用材料要求,无菌无热原,生物相容性好,生物降解性可控。综合评价各材料多方面性质,选择乙酰化壳聚糖、羧甲基壳聚糖和羟丙基壳聚糖作为制备复合膜的基本原料。2、CM-C-HP复合膜具有良好的柔韧度、机械强度、通透性,无溶血现象,无细胞毒性和全身急性毒性,对L929成纤维细胞生长有明显抑制作用,体内植入实验显示了良好的生物相容性和生物可降解性,具有比壳聚糖更为优良的手术缝合可操作性。3、在以鸡为肌腱断裂模型的预防粘连实验中,CM-C-HP复合膜组肌腱吻合口周围的粘连带、肉芽组织、胶原纤维及成纤维细胞均明显少聚乳酸薄膜组,肌腱活动度生物力学测试结果明显优于阴性对照组,说明CM-C-HP复合膜具有良好的防粘连作用。4、L929细胞经不同浓度羧甲基壳聚糖和羟丙基壳聚糖共混糖溶液培养24h、48h和96h后,测定MTT、透射电镜、凝胶电泳、细胞周期等指标,结果表明共混糖溶液对成纤维细胞生长有明显抑制作用,细胞周期发生中断,细胞被阻滞于G0-G1期。该部分内容提示复合膜通过抑制成纤维细胞生长来预防肌腱粘连,从细胞和分子水平初步探讨了复合膜预防肌腱粘连的机理。结论:本研究中的CM-C-HP复合膜作为预防粘连的生物膜材料,柔软光滑,机械强度高,具有良好的通透性、生物相容性、生物可降解性、降解速度可控性及手术缝合可操作性,预防粘连作用显著,效果优于聚乳酸薄膜产品,而且取材方便,价格低廉,是一种具有广阔应用前景的预防粘连复合膜。