春剑花器官离体培养研究

论文摘要

本研究以春剑（Cymbidum longibracteatum）花器官（花蕾、花梗、花小梗、合蕊柱、萼片）为外植体进行离体培养研究。重点研究了不同切割方式、基本培养基及激素配比对不同花器官培养时褐化、生长和愈伤组织发生的影响；同时详细研究了不同防褐处理对花梗切段培养褐化的影响。通过完全设计、正交设计、结合方差分析、新复极差分析、多重比较等统计方法,确定各个花器官离体培养可能的途径以及适宜的培养条件。结果表明：1、切割方式研究中表明,花蕾、花梗和花小梗的切割方式以纵切最佳,萼片以横向刻伤方式最佳,合蕊柱以不切培养效果最好。2、花梗切段愈伤组织诱导的最佳配方为：B5+2,4-D2.Omg/L+TDZO.6mg/L +GA30.5mg/L,诱导率为7.32%。2,4-D对花梗切段愈伤组织诱导有显著影响,最适浓度为2.0mg/L；花蕾、合蕊柱、萼片、花小梗均未诱导出愈伤组织,但生长变化显著,合蕊柱、花小梗培养后有突点出现,表面凹凸不平,有发生愈伤组织的趋势。3、当花芽长度为2cm时,切割培养的花梗褐化较低；花梗的切割厚度为8mm时,外植体褐化率较低；PVP、VC、柠檬酸、8-HQS对花梗切段褐化都有显著的抑制作用,其中以8-HQS效果最好,褐化率比对照组低33.82%；冷预处理对花梗切段褐化有显著抑制作用,以2℃冷处理24h效果最佳,比对照组低35.99%；处理中以植株在45℃热激处理00min后,切割的花梗褐化率最低,比对照低39.11%。花芽在50℃下热激处理120S后接种培养,褐化率高于对照组5.40%；转瓶越频繁,花梗褐化率越低,每天转一次瓶对减轻花梗褐化的效果最好,比对照组低44.52%；培养温度中以15℃培养时褐化率最低,褐化率比对照组低30.42%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 兰花花器官的培养
• 1.1.1 国兰花器官的培养
• 1.1.2 洋兰花器官的培养
• 1.2 影响国兰离体培养的因素
• 1.2.1 基本培养基
• 1.2.2 生长物质
• 1.2.3 切割方式
• 1.2.4 其它影响国兰离体培养的因素
• 1.3 离体培养中的褐化问题
• 1.3.1 褐化现象
• 1.3.2 控制褐化的措施
• 2 本研究的目的和意义
• 3 实验材料和方法
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 外植体准备
• 3.2.2 切割方式对不同花器官离体培养的影响
• 3.2.3 不同基本培养基及激素配比对不同花器官培养的影响
• 3.2.4 不同处理对花梗切段褐化的影响
• 3.3 培养条件
• 3.4 实验结果的观察项目和统计分析
• 4 结果与分析
• 4.1 不同切割方式对花器官培养的影响
• 4.1.1 不同切割方式对花蕾培养的影响
• 4.1.2 不同切割方式对花梗培养的影响
• 4.1.3 不同切割方式对花小梗培养的影响
• 4.1.4 不同切割方式对合蕊柱培养的影响
• 4.1.5 不同切割方式对萼片培养的影响
• 4.2 不同基本培养基及激素配比对花器官培养的影响
• 4.2.1 不同激素配比对花蕾培养的影响
• 4.2.2 不同基本培养基及激素配比对花梗切段培养的影响
• 4.2.3 不同激素配比对花小梗培养的影响
• 4.2.4 不同激素配比对合蕊柱培养的影响
• 4.2.5 不同激素配比对萼片培养的影响
• 4.3 不同处理对花梗切段褐化的影响
• 4.3.1 不同花芽大小对花梗切段褐化的影响
• 4.3.2 不同切割厚度对花梗切段褐化的影响
• 4.3.3 不同浸泡液对花梗切段褐化的影响
• 4.3.4 不同冷预处理对花梗切段褐化的影响
• 4.3.5 不同热激处理对花梗切段褐化的影响
• 4.3.6 不同转瓶天数对花梗切段褐化的影响
• 4.3.7 不同培养温度对花梗切段褐化的影响
• 5 讨论
• 5.1 不同切割方式对不同花器官离体培养的影响
• 5.2 愈伤组织的发生
• 5.3 不同基本培养基及激素配比对外植体培养的影响
• 5.4 不同处理对花梗切段褐化的影响
• 6 小结
• 7 下一步工作建议
• 参考文献
• 致谢