论文摘要
牙髓炎是以G-厌氧菌感染为主的感染性疾病,是口腔科常见疾病之一。G-菌细胞壁外膜中的脂多糖是主要的毒力因子,LPS可引起牙髓组织明显的炎症反应,且对牙髓组织细胞有明显的毒性作用。HDPCs是牙髓组织中的主体细胞,HDPCs不仅具有合成牙髓有机质的能力,而且必要时还能分化为成牙本质细胞保护牙髓。LPS可以通过2条途径作用于HDPCs,直接作用:主要表现为抑制HDPCs增殖和分化,损伤HDPCs超微结构,刺激HDPCs产生细胞因子;间接作用:LPS刺激免疫细胞产生细胞因子,再作用于HDPCs。因此,采取有效措施拮抗LPS对HDPCs的毒性作用意义重大。中药五倍子具有抗菌、抗病毒、抗氧化和收敛等作用,能降解LPS,阻断其生物学效应。本研究通过细胞培养技术、MTT实验、放射免疫检测法及透射电镜观察等方法观察五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs增殖和HDPCs的ALP活性,LPS损伤HDPCs超微结构,LPS诱导HDPCs分泌IL-6的影响,探讨五倍子水提取物拮抗LPS对HDPCs的毒性作用。实验一五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs增殖的影响本实验采用MTT法检测五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs增殖的影响。结果显示,培养液中加入浓度为50μg/ml、100μg/ml的LPS时,HDPCs的增殖活性受到明显抑制,加入低浓度（1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml）五倍子水提取物能明显拮抗100μg/ml的LPS对HDPCs增殖的抑制作用,2.5μg/ml五倍子水提取物拮抗100μg/ml的LPS对HDPCs增殖抑制作用第3天开始明显增加,并呈时间依赖性。由此说明,低浓度五倍子水提取物能够拮抗LPS对HDPCs增殖的抑制作用。实验二五倍子水提取物对LPS损伤HDPCs超微结构影响本实验采用透射电镜观察五倍子水提取物对LPS损伤HDPC超微结构的影响。结果显示100μg/ml内毒素对牙髓细胞超微结构有不同程度的损伤,加入5μg/ml五倍子水提取物后,牙髓细胞超微结构损伤明显减轻,细胞器结构基本恢复正常。由此说明,低浓度五倍子水提取物能够抑制内毒素对HDPCs超微结构的损伤作用。实验三五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs的ALP活性影响本实验采用酶动力学法检测五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs的ALP活性的影响。结果显示,低浓度（2.5、5、10μg/ml）五倍子水提取物能明显拮抗100μg/ml内毒素对细胞ALP活性的抑制作用,5μg/ml五倍子水提取物拮抗100μg/ml内毒素对细胞ALP活性的抑制作用第2天开始明显增加,并呈时间依赖性。由此说明,低浓度五倍子水提取物能够拮抗内毒素对HDPCs的ALP活性的抑制作用。实验四五倍子水提取物对LPS诱导HDPCs产生IL-6影响本实验采用放免法检测五倍子水提取物对LPS诱导HDPCs产生IL-6的影响。结果显示2.5、5、10、20μg/ml五倍子水提取物能明显抑制25μg/ml的LPS诱导HDPCs分泌IL-6,并呈浓度依赖性。由此说明,一定浓度范围内五倍子水提取物能够抑制LPS诱导HDPCs分泌IL-6。
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