Survivin-siRNA抑制视网膜母细胞瘤生长的实验研究

Survivin-siRNA抑制视网膜母细胞瘤生长的实验研究

论文摘要

目的:探讨Survivin-siRNA真核重组质粒对视网膜母细胞瘤生长抑制作用及诱导细胞凋亡作用。方法:以基因重组技术构建Survivin-siRNA质粒,分别将其转染视网膜母细胞瘤Y79细胞系及视网膜母细胞瘤裸鼠玻璃体腔移植瘤,采用RT-PCR、Western blot、MTT、AO/EB染色、流式细胞仪、免疫组化染色、TUNEL法等技术观察其抑瘤作用及细胞凋亡。结果:体内、体外实验均证明Survivin-siRNA质粒对视网膜母细胞瘤Y79细胞系及视网膜母细胞瘤裸鼠玻璃体腔移植瘤具有生长抑制作用及促进凋亡作用。结论:成功构建的Survivin-siRNA重组质粒可以抑制视网膜母细胞瘤中Survivin基因转录和蛋白表达,并诱导细胞凋亡。

论文目录

  • 提要
  • 主要英文缩写词表
  • 前言
  • 第一章 文献回顾
  • 第一节 Survivin 研究进展
  • 一、Survivin 的结构
  • 二、Survivin 与细胞周期
  • 三、Survivin 与细胞凋亡
  • 四、Survivin 在正常组织中的表达
  • 五、Survivin 在肿瘤组织中的表达
  • 六、Survivin——新型抗癌药物的靶点
  • 第二节 视网膜母细胞瘤研究进展
  • 一、流行病学
  • 二、遗传学
  • 三、自然病程
  • 四、临床表现
  • 五、诊断
  • 六、分类
  • 七、治疗
  • 第二章 视网膜母细胞瘤中Survivin 的表达
  • 第一节 材料与方法
  • 一、实验对象
  • 二、实验方法
  • 三、统计学方法
  • 第二节 结果
  • 第三节 讨论
  • 第三章 Survivin-siRNA 真核重组质粒的构建及鉴定
  • 第一节 材料与方法
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 第二节 结果
  • 第三节 讨论
  • 第四章 Survivin-siRNA 抑制视网膜母细胞瘤体外生长实验
  • 第一节 材料与方法
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 三、统计学处理
  • 第二节 结果
  • 一、siRNA 重组质粒转染Y79 细胞
  • 二、半定量RT-PCR 检测Survivin mRNA 的表达
  • 三、Western blot 方法分析Survivin 蛋白的表达
  • 四、MTT 法检测质粒对细胞增殖的抑制作用
  • 五、AO/EB 染色凋亡细胞
  • 六、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡峰
  • 第三节 讨论
  • 第五章 Survivin-siRNA 抑制视网膜母细胞瘤体内生长实验
  • 第一节 材料与方法
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 三、统计学处理
  • 第二节 结果
  • 一、裸鼠移植瘤模型建立
  • 二、抑瘤实验观察
  • 三、半定量RT-PCR 检测肿瘤组织Survivin mRNA 的表达
  • 四、Western blot 方法分析Survivin 蛋白的表达
  • 五、组织形态学观察
  • 六、免疫组化染色
  • 七、TUNEL 法检测肿瘤组织凋亡
  • 第三节 讨论
  • 第六章 结论
  • 参考文献
  • 攻读博士学位期间发表文章及成果
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 致谢
  • 相关论文文献

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