论文摘要
目的:研究纳米雄黄的制备方法,优化制备工艺参数,得到纳米级雄黄粉体;研究纳米雄黄中砷在小鼠体内的药代动力学行为,并比较纳米雄黄与传统水飞雄黄中砷在小鼠体内的药动学差异,为新药的研发及临床用药提供一定的实验基础。方法: （1）利用温度可控惰性气氛高能球磨机的机械粉碎作用,制备纳米雄黄;对球料比、球磨时间、球磨转速、球磨介质去离子水量、球磨温度等五个球磨参数,在不考虑交互作用条件下,进行四个水平的正交试验设计,采用L16（45）正交表,进行16次实验,并重复2次;对样品粒度分布的测定和表观形貌的观察分别采用激光光散射法和扫描电镜、原子力显微镜法进行研究,结果以小于100 nm的雄黄颗粒所含百分含量为评价指标进行分析,从而得出制备纳米雄黄的最佳生产工艺条件。（2）药动学研究以140只小鼠为研究对象,随机分为两组,每组70只,服药前禁食12 h,两组分别单次灌胃2.062 mg/mL的纳米雄黄和水飞雄黄混悬液0.5 mL,于服药后0、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、5、6、8、10、和12 h摘眼球采血,全血经消化处理后,用ICP-MS测得As元素浓度,血药浓度-时间数据用3P97软件处理,拟合其药动学模型,计算主要药动学参数。（3）统计方法以SPSS13.0统计软件进行数据统计分析,所有计量资料以均数±标准差（mean±SD）表示,P<0.05认为差异具有统计学意义。结果: （1）经过正交设计实验筛选,得出制备纳米雄黄的最佳工艺参数为球料比16:1、球磨温度-20℃、球磨时间12 h、球磨转速38 Hz、球磨介质去离子水量各水平间的差异无统计学意义,根据经验取50 mL,上述因素中球料比的影响最大,然后依次为球磨温度,球磨时间和球磨转速。雄黄在上述最佳制备工艺条件下进行球磨后,所得样品经过N4 Plus粒度分布分析,证实所得粉末中粒径小于100 nm的颗粒可达90%以上;粉末经扫描电镜、原子力显微镜的观察分析可见,较大的雄黄颗粒是由精细结构为30 nm以下的微小晶粒和其周围的非晶体聚集而成。（2）小鼠灌胃给纳米雄黄和传统水飞雄黄1.031mg/只后,砷的药代动力学行为均符合开放性血管外给药一室模型一级速率过程,主要药动学参数纳米雄黄组和传统水飞雄黄组Tmax分别为0.8083±0.1185 h、1.3300±0.3467 h,Cmax分别为0.6230±0.1928 mg/L、0.1833±0.0512 mg/L,AUC0→∞分别为2.4238±0.6542 （mg/L）h、1.5601±0.3349 （mg/L）h,CL/F分别为0.4254±0.0912 L/（kg﹒h）、0.6609±0.1233 L/（kg﹒h）,Vd/F分别为75.8299±9.1087 L/kg、264.3590±46.5237 L/kg。纳米雄黄组与传统雄黄组Ka之比为3.6:1 ,T1/2Ka之比为1:5.5;Ke之比为1:3 ,T1/2Ke之比为1.5:1。（3）纳米雄黄组与传统水飞雄黄组中砷的药代动力学参数经统计学分析均有显著差异（P<0.05）。纳米雄黄中砷达峰时间早、峰浓度高、AUC大,均优于传统水飞雄黄组,前者砷的消除半衰期较长,吸收速率常数较大。结论: （1）利用高能球磨机的机械粉碎作用,通过调整球料比、球磨温度、球磨时间、球磨转速、球磨介质去离子水量等工艺参数,可以制得粒径小于100 nm的雄黄颗粒达90%以上。（2）纳米雄黄组与传统水飞雄黄组中砷在小鼠体内的药动学行为均符合开放性血管外给药一室模型一级速率过程。（3）纳米雄黄组在达峰时间、峰浓度、AUC等方面明显优于传统雄黄组。（4）纳米雄黄组与传统水飞雄黄组相比,砷吸收快,消除慢,药物在体内维持时间长,说明雄黄经过纳米化后,其药代动力学发生明显变化,吸收相增大而消除相减小,为纳米雄黄的研究提供了实验依据。