论文摘要
目的:研究早期干预及康复训练对宫内感染致脑损伤仔鼠脑组织MAG表达及脑白质有髓神经纤维直径的影响。方法:1.动物模型的制备:选用清洁级Wistar雌性大鼠40只,雄性大鼠10只,在室温21±1℃下常规饲养、自由饮食,适应环境2周后于17时分两批,每批20只,按2:1(雌:雄)合笼,第二天上午8时查阴道涂片,若查到精子记为妊娠0天,孕鼠另外单独饲养。将孕鼠随机分为脂多糖组(LPS组)32只和生理盐水组(NS组)8只,分别在孕17d,18d对32只雌鼠腹腔注射脂多糖420ug/kg.d,另8只按同样方法注射无菌生理盐水。去除22天前出生的早产仔鼠,随机将LPS组孕鼠所生仔鼠分为干预组(training,T组)和非干预组(no training,NT组)各60只,随机选取生理盐水组孕鼠所生仔鼠60只为NS组。2.早期干预和康复训练:干预组仔鼠生后第2d起进行早期干预和丰富环境刺激,14d起进行康复训练,其余各组常规饲养。3.行为学及病理学检测:对14d、21d、28d各组仔鼠进行行为学检测,方法选用悬吊实验和改良BBB运动功能评分进行,病理学检测采用HE染色观察孕鼠胎盘及仔鼠脑组织病理学形态学改变。4.免疫组织化学检测:对1d、7d、14d、21d、28d仔鼠进行脑组织MAG免疫组织化学检测其表达情况。5.体视学检测:对14d、21d、28d各组仔鼠行体视学检测,测量有髓神经纤维直径的大小及变化情况。6.统计学分析脑损伤仔鼠脑组织MAG表达量及脑白质有髓神经纤维直径有无相关性。结果:1.孕鼠分娩及其仔鼠出生情况:LPS组孕鼠注射脂多糖后5只死亡,4只提前分娩,其余23只顺利生产,共娩出足月仔鼠138只,产后死亡仔鼠13只。生理盐水组注射生理盐水后无明显异常,共分娩生产仔鼠83只,均为足月活产鼠。2.HE染色结果:LPS组孕鼠胎盘病理检测可见胎盘组织中大量中性粒细胞浸润,血管充血水肿等明显的炎症反应;NS组仔鼠胎盘未见异常;LPS组脑组织病理检测可见明显炎症改变,如白质结构疏松,毛细血管扩张充血或破裂出血,胶质细胞聚集,脑室内出血等明显炎症改变;NS组新生脑组织未见明显病理改变。3.各组仔鼠行为学检测:①悬吊试验结果:与对照组比较,干预组和非干预组活动明显减少,平衡协调能力差,肌张力高,肌力低,反应迟钝,悬吊时间短,测试得分明显降低(P<0.01);干预组得分明显高于非干预组(P<0.01);②改良BBB结果:14与21日龄干预组和非干预组得分明显低与生理盐水组(P<0.01);干预组评分明显高于非干预组(P<0.01);28日龄干预组与生理盐水组评分无显著性差异(P>0.05);非干预组评分明显低于生理盐水组(P<0.01)。4.免疫组织化学染色结果:各日龄仔鼠中,LPS组仔鼠脑组织MAG表达量要明显高于生理盐水组(P<0.05),非干预组仔鼠表达量要高于干预组(P<0.05)。5.体视学检测结果:在各日龄中,生理盐水组仔鼠脑白质有髓神经纤维直径的长度要明显大于非干预组和干预组(P<0.05,P<0.05),其中干预组有髓神经纤维直径长度要大于非干预组(P<0.05)。6.脑损伤组仔鼠脑组织MAG表达量与有髓神经纤维直径长度不具有相关性。结论:1.早期干预和康复训练可以促进脑损伤组仔鼠运动功能的提高。2.早期干预和康复训练可以抑制MAG的表达。3.早期干预和康复训练可以促进脑损伤仔鼠脑白质有髓神经纤维直径的生长。4.脑损伤组仔鼠脑组织MAG表达量与其有髓神经纤维直径变化不具有相关性。
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