水稻抗瘟性鉴定及稻瘟菌粗提物对水稻愈伤组织的影响

论文摘要

稻瘟病是世界各水稻产区广泛分布的重要病害之一。选育优良的抗病品种是稻瘟病综合防治的一项经济而有效措施，而抗性鉴定是选育抗病品种的首要工作。本研究采用苗期水稻离体和非离体（活体）叶片，用不同接种方法研究了16个水稻品种对稻瘟病菌强致病菌株193(ZB25)的抗性，并对其中有代表性的6个水稻品种进行了抗瘟生化机制的初步研究。在此基础上，选出2个高感病水稻品种成熟胚进行处理，研究稻瘟病菌193粗提物对水稻组织培养的影响，为进行抗稻瘟病菌突变体的筛选，为水稻抗病品种的选育做一些工作。试验结果如下：1．利用水稻苗期离体叶片和活体幼苗进行品种抗叶瘟鉴定。试验表明，利用幼苗离体叶片对品种的鉴定结果与常规的利用活体幼苗鉴定结果中品种抗性类型的一致符合率均达90％以上，且苗期离体叶片接种鉴定具有快速、节省空间等优点，可以应用于品种抗叶瘟的鉴定。2．生化测定结果表明，接种193后，各抗感品种的中各种生化因子大部分具有明显差异，且这种差异具有一定的规律，具体表现在：抗病品种的POD、PPO、PAL活性高于感病品种，接种后无论是抗病品种还是感病品种酶活性均表现为先升后降的趋势，且抗病品种的酶活性增加幅度显著大于感病品种；抗病品种和感病品种的APX酶活性变化呈先上升后下降趋势，但抗病品种活性增加比较早，活性增强持续时间也较长：而感病品种的APX活性增加较迟，在接种后期下降较剧烈；抗病品种的ASA含量没有太大变化，与接种前水平接近，而感病品种的ASA含量呈先降后升的趋势。抗病品种的可溶性蛋白量上升速度快、上升幅度大。3．通过稻瘟病病菌粗提物处理的水稻成熟胚的组织培养，试验结果表明：经粗提物处理后，对水稻成熟胚的愈伤组织诱导和分化都有一定的抑制作用，愈伤组织再生植株的蛋白质含量显著提高。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.水稻稻瘟病的危害
• 2.稻瘟病的病原菌及其侵染机理
• 2.1 稻瘟病的病原菌
• 2.2 稻瘟病菌侵染机理
• 3.稻瘟病菌的生理小种
• 3.1 生理小种的鉴别与命名
• 3.2 稻瘟病菌生理小种的演变
• 4.稻瘟病致病性变异及水稻品种抗瘟性的研究
• 4.1 稻瘟病致病性变异
• 4.2 抗性基因的研究进展
• 4.3 抗瘟性基因型研究的重要意义
• 5.与植物抗病机制相关的研究
• 5.1 结构抗性
• 5.2 诱导抗性
• 5.2.1 苯丙烷类代谢与抗病性的关系
• 5.2.2 抗氧化系统与抗病性的关系
• 5.2.3 抗病蛋白的生成与抗病性的关系
• 6.苗期品种抗性鉴定技术及评价标准
• 6.1 品种抗性鉴定技术研究
• 6.2 稻瘟病品种抗性调查标准
• 7.稻瘟菌粗毒素的研究概况
• 8.本研究的目的意义及研究内容
• 第二章 水稻品种苗期抗瘟性鉴定技术研究
• 1.材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 供试品种
• 1.1.2 病原菌
• 1.1.3 供试培养基
• 1.1.4 供试器具
• 1.1.5 孢子悬浮液的制备
• 1.2 鉴定方法
• 1.2.1 离体接种鉴定
• 1.2.1.1 育苗
• 1.2.1.2 离体叶片接种方法
• 1.2.2 苗期活体喷雾接种鉴定
• 2.结果与分析
• 2.1 离体叶片抗性鉴定技术
• 2.1.1 不同苗龄叶片的离体接种效果
• 2.1.2 离体叶片接种方法对不同品种的鉴定
• 2.2 活体幼苗喷雾接种法对不同品种的鉴定结果
• 2.3 离体叶片接种与活体幼苗接种鉴定结果比较
• 3 结论与讨论
• 第三章 水稻品种抗瘟性生化机制初步研究
• 1.材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.1.1 供试水稻品种
• 1.1.2 供试菌株
• 1.1.3 供试培养基
• 1.1.4 仪器和设备
• 1.2 接种及病情调查
• 1.2.1 水稻苗的准备
• 1.2.2 菌株活化
• 1.2.3 孢子悬浮液的制备
• 1.2.4 苗期接种
• 1.2.5 病情调查
• 1.3 酶活性的测定
• 1.3.1 苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的测定
• 1.3.1.1 采集供试水稻叶片
• 1.3.1.2 酶液提取方法
• 1.3.1.3 酶活性检测
• 1.3.2 过氧化物酶活性的测定（POD）活性的测定
• 1.3.2.1 采集供试水稻叶片
• 1.3.2.2 酶液提取方法
• 1.3.2.3 酶活性检测
• 1.3.3 多酚氧化酶（PPO）活性的测定
• 1.3.3.1 采集供试水稻叶片
• 1.3.3.2 酶活性测定
• 1.3.3.3 活性计算
• 1.3.4 抗坏血酸过氧化物酶（ASA）活性测定
• 1.3.4.1 酶液制备
• 1.3.4.2 酶活性测定
• 1.4 与抗性相关的其他物质的测定
• 1.4.1 叶片中抗坏血酸含量测定
• 1.4.2 可溶性蛋白含量测定
• 2.结果与分析
• 25)菌株的抗性反应'>2.1 6个品种对193(ZB₂₅)菌株的抗性反应
• 2.2 接种前后苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的变化
• 2.3 接种前后过氧化物酶（POD）活性的变化
• 2.4 接种前后多酚氧化物酶（PPO）活性的变化
• 2.5 接种前后抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的变化
• 2.6 抗坏血酸(（ASA）含量变化
• 2.7 可溶性蛋白含量变化
• 3.结论与讨论
• 第四章 稻瘟菌粗提物对水稻愈伤组织的影响研究
• 1.实验材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 供试水稻品种
• 1.1.2 供试菌株
• 1.1.3 供试培养基
• 1.1.4 供试蛋白染色试剂
• 1.1.5 仪器和设备
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 稻瘟菌的培养
• 1.2.2 稻瘟菌粗提物的制备
• 1.2.3 稻瘟病菌粗提物对水稻成熟胚组织培养的影响
• 1.2.3.1 稻瘟病菌粗提物浸泡水稻成熟胚对水稻出芽及组织培养的影响
• 1.2.3.2 稻瘟病菌粗提物浸泡水稻成熟胚后的水稻诱导分化苗的蛋白质含量测定
• 2.结果与分析
• 2.1 稻瘟病菌粗提物浸泡水稻成熟胚对水稻出芽率的影响
• 2.2 稻瘟病菌粗提物浸泡水稻成熟胚对水稻愈伤组织诱导率的影响
• 2.3 稻瘟病菌粗提物浸泡水稻成熟胚对水稻愈伤组织分化率的影响
• 2.4 稻瘟病菌粗提物浸泡对水稻成熟胚诱导分化苗蛋白含量的影响
• 3.讨论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介