鸭胚蛋中激素检测方法的研究

论文摘要

近年来,保健食品特殊功能作用的开发以及保健食品原料外源性污染对人体产生的不良影响,特别是以动物性原料生产的保健食品中含有天然的内源性激素,引起人们的高度关注。食用动物养殖过程中滥用激素,以及动物体自身含有的内源性激素,造成肉类制品非细菌性食物中毒及其他健康影响,使消费者对此类食品产生一定的恐慌。因此,食品中激素的残留污染问题得到各国政府和国际组织的广泛重视。本文研究确立了樱桃谷SM3型鸭胚蛋中的内源性激素17β-雌二醇、丙酸睾酮的HPLC测定方法。用甲醇提取鸭胚蛋匀浆液中的17β-雌二醇、丙酸睾酮,再经高效液相色谱仪（HPLC）进行定性、定量分析。该方法线性范围为0.05-3.50μg/mL,标准曲线线性关系良好,其回归方程和相关系数分别为17β-雌二醇y=2278.8x+31.46 , R2=0.9999 ,丙酸睾酮y=925.32x-14.812,R2=0.9996;最低检测限为17β-雌二醇2.7ng/g,丙酸睾酮3.4ng/g;回收率在89.1%-94.6%之间,相对标准偏差小于2.3%。该方法操作简便快捷,有较好的回收率和准确度,适合检测大量胚胎类保健食品中的内源性激素。本研究还确立了测定樱桃谷SM3型肉鸭胚蛋中外源性激素己烯雌酚、丙酸睾酮激素残留的HPLC分析方法。样品经甲醇超声波提取、离心,提取液浓缩后经0.45μmFH滤膜过滤,进HPLC分析。该方法线性范围为0.025-3.0μg/mL,标准曲线线性关系良好,其回归方程和相关系数分别为己烯雌酚y=414012x+5728.5, R2=0.9996,丙酸睾酮y=237175x+923.51, R2=0.9996,最低检测限为己烯雌酚2.1ng/g,丙酸睾酮3.2ng/g,回收率在89.7%-92.8%之间,相对标准偏差小于1.9%。该方法操作简便快捷,有较好的回收率和准确度,适合检测大量胚胎类保健食品中性激素的残留。通过放射免疫法测出14-24日胚龄的鸭胚蛋血清中的10种激素的含量。以上的研究结果,为了解以樱桃谷SM3型鸭胚蛋为原料的保健食品中激素的功能和作用,以及探讨该保健食品中激素对人体健康的影响奠定基础。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 1. 前言
• 1.1 食品中激素的概况
• 1.1.1 激素进入食品的途径
• 1.1.2 激素污染的主要原因
• 1.1.3 食品中激素成分的作用
• 1.1.4 有激素残留的食品的健康危害
• 1.1.5 国内外激素的使用管理
• 1.1.6 食品中激素的安全性评价
• 1.2 鸭胚蛋中的激素
• 1.2.1 与鸭胚蛋发育相关的激素
• 1.3 激素的分泌
• 1.3.1 胰腺
• 1.3.2 肾上腺
• 1.3.3 甲状腺
• 1.3.4 甲状旁腺
• 1.3.5 胸腺
• 1.3.6 松果体
• 1.3.7 垂体
• 1.4 激素提取的经典方法
• 1.5 食品中激素的检测方法
• 1.5.1 高效液相色谱法的特点
• 1.5.2 放射免疫法
• 1.6 本课题研究的目的、意义与内容
• 1.6.1 研究的目的
• 1.6.2 研究的意义
• 1.6.3 研究的内容
• 2 材料与方法
• 2.1 实验原料
• 2.1.1 高效液相色谱法测激素所需材料的处理方法
• 2.1.2 放射免疫法所需血清的处理方法
• 2.2 主要试剂
• 2.3 主要仪器设备
• 2.4 检测方法
• 2.4.1 高效液相色谱法检测内源性激素17β-雌二醇和丙酸睾酮
• 2.4.2 高效液相色谱法检测外源性激素己烯雌酚和丙酸睾酮
• 2.4.3 放射免疫法检测血清中10 种激素
• 3. 结果与分析
• 3.1 样品中内源性激素 17β-雌二醇和丙酸睾酮的提取
• 3.1.1 提取溶剂的选择
• 3.1.2 样品的净化
• 3.1.3 激素提取的步骤
• 3.1.4 激素的浓缩
• 3.1.5 过滤除杂
• 3.2 内源性激素高效液相色谱条件的优化
• 3.2.1 色谱柱的选择
• 3.2.2 检测波长的选择
• 3.2.3 流动相的选择
• 3.2.4 流速的选择
• 3.2.5 柱温的选择
• 3.2.6 内源性激素高效液相色谱方法的线性和检出限
• 3.2.7 方法的回收率和精密度
• 3.2.8 样品的分析结果
• 3.2.9 小结
• 3.3 外源性激素己烯雌酚和丙酸睾酮的提取
• 3.3.1 提取溶剂的选择
• 3.3.2 样品的净化
• 3.3.3 激素提取的步骤
• 3.3.4 激素的浓缩
• 3.3.5 过滤除杂
• 3.4 外源性激素的高效液相色谱条件的优化
• 3.4.1 色谱柱的选择
• 3.4.2 检测波长的选择
• 3.4.3 流动相的选择
• 3.4.4 流速的选择
• 3.4.5 柱温的选择
• 3.4.6 方法的线性和检出限
• 3.4.7 方法的回收率和精密度
• 3.4.8 样品分析结果
• 3.4.9 小结
• 3.5 放免法测定鸭胚蛋中10 种激素的研究
• 3.5.1 小结
• 4. 讨论
• 4.1 鸭胚蛋中激素提取的方法摸索
• 4.2 高效液相色谱法检测激素手段的摸索
• 4.3 放射免疫法检测激素手段的摸索
• 4.4 高效液相色谱法和放射免疫法检测结果的对比
• 4.5 本实验方法与其它近似物质中激素的提取及HPLC 检测方法的对比
• 4.6 进一步研究方向
• 6. 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文目录