二维液相色谱系统的构建及在生物样品分离中的应用

二维液相色谱系统的构建及在生物样品分离中的应用

论文题目: 二维液相色谱系统的构建及在生物样品分离中的应用

论文类型: 硕士论文

论文专业: 分析化学

作者: 王智聪

导师: 赵中一,李彤

关键词: 二维液相色谱,系统,接口,峰容量,生物样品

文献来源: 中国地质大学

发表年度: 2005

论文摘要: 二维液相色谱是近年来发展起来的一种高效分离技术,正交的二维系统在分辨率、峰容量方面比一维情况都有所增加,已成为复杂体系组分分离和分析的强有力工具,在生命科学尤其是蛋白质组研究中得到了广泛的应用。 本论文是在“十五”国家科技攻关重大项目《科学仪器研制与开发》、“973”《人类重大疾病蛋白质组学研究》以及国家自然科学基金资助项目《多维分离系统的输运特征与正交性研究》的支持下完成的。论文在阐述二维液相色谱基本原理的基础上,对二维液相色谱在近年蛋白质组研究中的应用加以系统总结,重点探讨不同接口形式二维液相色谱系统的构建,并进行系统评价,对复杂生物样品进行了分离分析。论文主要包括:在线二维液相色谱系统的构建与评价,离线二维液相色谱系统的构建与应用,对特殊结构二维液相色谱系统构建的探讨。 将第一维洗脱的样品组分有效地切割导入第二维是整个二维系统接口设计的关键。样品环交替储存转移样品、平行柱交替富集分析样品、捕集柱富集样品以及整体两相式色谱柱无接口的形式是常用的柱切换技术。 论文第二章以平行柱交替富集分析形式接口的WAX/RP及GFC/RP两种在线二维系统为例说明在线二维系统构建的一般方法,并以标准蛋白质混合物的分离进行系统评价。两种二维系统的总峰容量分别为189和225,在一维模式无论是WAX、GFC还是RP都不能完全分开的测试样品,在二维系统中得到了较好的分离。但这种接口构成的二维系统的峰

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研究生学位论文原创性声明

摘要

ABSTRACT

目录

第一章 文献综述

1.1 引言

1.2 二维液相色谱的原理与方法

1.2.1 多维分离的基本概念

1.2.2 二维液相色谱系统组成

1.2.3 多维分离模式及其偶联方式

1.3 二维液相色谱系统的接口形式

1.3.1 样品环交替储存转移接口形式

1.3.2 平行柱交替富集分析接口形式

1.3.3 捕集柱富集接口形式

1.3.4 整体式无接口形式

1.3.5 几种切换技术的比较

1.3.6 其他辅助切换技术

1.4 二维液相色谱在蛋白质组研究中的应用

1.4.1 样品环及平行柱交替储存分析形式接口二维分析系统的应用

1.4.2 捕集柱富集形式接口在线二维系统的应用

1.4.3 离线二维系统的应用

1.4.4 整体无接口两相式色谱柱二维系统的应用

1.5 本论文的工作

第二章 在线二维液相色谱系统的构建与评价

2.1 引言

2.2 在线二维液相色谱系统构建的一般策略

2.3 提高第二维分析速度方法的探讨

2.3.1 第二维柱系统的选择

2.3.2 分析方法的优化选择

2.3.3 柱平衡体积的研究

2.3.4 切换接口的选择

2.4 不同分离模式一维分离的条件优化

2.4.1 仪器与试剂

2.4.2 一维WAX分析

2.4.3 一维GFC分析

2.4.4 一维RP分析

2.5 WAX/RP二维在线系统的构建与应用

2.5.1 系统构建

2.5.2 分流

2.5.3 二维分析

2.5.4 讨论

2.6 GFC/RP二维在线系统的构建与应用

2.6.1 系统构建

2.6.2 二维分析

2.6.3 结果与讨论

2.6.4 GFC/RP二维系统在山羊血清分离中的应用

2.7 本章小结

第三章 离线二维液相色谱系统的构建与应用

3.1 引言

3.2 离线二维分离的方法发展

3.2.1 仪器与试剂

3.2.2 色谱柱与流动相

3.2.3 样品处理

3.2.4 检测波长的选择

3.2.5 一维 SCX分析

3.2.6 一维RP分析

3.3 离线二维系统的构建与应用

3.3.1 系统构建

3.3.2 二维分析及结果

3.3.3 讨论

3.4本章小结

第四章 对特殊结构二维液相色谱系统构建的探讨

4.1 引言

4.2 捕集柱接口在线二维系统的构建与应用

4.2.1 仪器与试剂

4.2.2 色谱柱与流动相

4.2.3 系统构建

4.2.4 接口设计

4.2.5 一维分析条件的优化

4.2.6 捕集柱对分离的影响

4.2.7 二维分析及结果

4.3 高通量分析二维系统的构建与应用

4.3.1 仪器与试剂

4.3.2 色谱柱与流动相

4.3.3 系统构建

4.3.4 平行分析原理

4.3.5 二维切换条件优化选择

4.3.5 二维分析

4.3.6 结果与讨论

4.4 阀接口两相直接连接二维系统的构建与应用

4.4.1 两相式二维色谱系统介绍

4.4.2 仪器与试剂

4.4.3 色谱柱与流动相

4.4.4 系统构建

4.4.5 二维分析及结果

4.4.6 讨论

4.5 几种系统的比较

4.6 本章小节

第五章 结论与创新点

5.1 结论

5.2 创新点

致谢

参考文献

发布时间: 2007-01-12

参考文献

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