硒对实验性大鼠氟中毒的拮抗作用及其机制研究

论文摘要

目的：通过对饮用同一浓度氟化钠的大鼠饲以含有不同浓度的亚硒酸钠饲料,观察比较大鼠体重、尿氟浓度、血清GSH-PX活性、血清CAT活性、Hb含量、牙胚成釉细胞及smad3、shh表达水平的差异,探讨不同剂量硒对大鼠氟中毒的拮抗作用。方法：清洁级雄性SD大鼠60只,体重80g-110g,在贵阳医学院动物实验室适应性喂养一周后随机分为6组,即对照组、氟组、氟硒一组、氟硒二组、氟硒三组、氟硒四组。每组10只,分笼人工喂养,自由饮水、饮食。对照组饮蒸馏水饲普通饲料,实验组（氟组、氟硒一组、氟硒二组、氟硒三组、氟硒四组）饮含氟（F）45mg/L的蒸馏水,氟组饲普通饲料,氟硒一组饲含硒1.37mg/kg的饲料,氟硒二组饲含硒1.6mg/kg的饲料,氟硒三组饲含硒2.3mg/kg的饲料,氟硒四组饲含硒4mg/kg的饲料,实验2个月。每周观察大鼠的一般情况,称取大鼠体重。每隔2周每组8只大鼠收集24小时尿液,大鼠禁饮、禁食,参照《尿中氟的离子选择电极测定方法（WS/T30-1996）》测定尿氟含量及根据氟斑牙分级标准对大鼠氟斑牙进行分级。分别于实验1月末和2月末每组8只大鼠采取尾血,用氧化指标专用测试试剂盒测大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶和血清过氧化氢酶的活性及用氰化高铁Hb法测Hb含量。实验结束断头处死大鼠,将包含下切牙的部分下颌骨固定、脱钙、切片,运用免疫组织化学检测技术检测smad3、shh在分泌期成釉细胞中的表达并采用图像分析软件对免疫组化结果进行半定量分析。用SPSS17.0统计软件对所有结果进行统计检验。结果：实验第四周,氟组大鼠开始出现氟斑牙,随着染氟时间的延长,氟斑牙的症状逐渐加重,8周末氟组大鼠出现中度氟斑牙。实验第6周,氟硒组开始出现氟斑牙,到实验结束时,氟硒各组氟斑牙症状比氟组轻,氟硒三组与氟硒一组、氟硒二组、氟硒四组比较,差异有统计学意义（p<0.05）,氟硒四组氟斑牙症状略比氟组重。8周末,各组大鼠体重均增长,但实验组大鼠体重增长慢于对照组（p<0.05）；氟硒三组大鼠体重增长比氟组、氟硒一组、氟硒二组、氟硒四组快,差异有统计学意义（p<0.05）；各组大鼠尿氟浓度随着染氟时间的延长逐渐升高,除对照组外；实验组尿氟浓度在实验1月和实验2月均比对照组高（p<0.05）；氟组大鼠尿氟浓度低于氟硒一组、氟硒二组、氟硒三组；氟硒三组高于氟硒一组、氟硒二组（p<0.05）；从第四周开始,氟硒四组尿氟开始略低于氟组。通过氧化指标专用测试试剂盒对大鼠血清中GSH-PX和CAT活性检测,结果显示为：实验1月和实验2月,实验组血清GSH-PX活力均较对照组下降（p<0.05）；氟硒二组、氟硒三组高于氟组,他们之间的差异有统计学意义（p<0.05）。1月和2月差异无统计学意义（p>0.05）。血清CAT活性各组无显著性差异。Hb各组也无明显变化（p>0.05）。免疫组化结果为：对照组大鼠成釉细胞中smad3、shh为阳性表达,氟组大鼠成釉细胞中smad3、shh表达比对照组明显减弱（p<0.01）；氟硒组smad3、shh表达强于氟组,其中氟硒三组与氟组差异有统计学意义（p<0.05）。结论：1.过量氟能抑制大鼠体内抗氧化酶的活性,引起机体氧化损伤。硒能纠正自由基代谢紊乱,对高氟具有一定的拮抗作用。2.硒在一定的范围内才表现为对氟的拮抗作用,硒过量则表现为对氟有协同作用。3.硒通过恢复调控牙胚发育的信号转导因子smad3、shh的表达,促进牙胚发育。硒拮抗氟中毒作用的机制可能与调控牙胚发育作用的信号转导因子Smad3和Shh的表达有一定的关联。4.硒具有降低氟的毒性,减轻氟斑牙症状的作用,不同浓度的硒对氟中毒的拮抗作用存在差异,以2.3mg/kg硒对氟中毒的拮抗效果最好。

论文目录

• 主要英文缩略对照词表
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 实验一 硒对氟中毒大鼠体内氟代谢的影响
• 材料与方法
• 结果
• 实验二 硒对氟中毒大鼠体内抗氧化酶及血红蛋白的影响
• 材料与方法
• 结果
• 实验三 硒对牙胚发育的影响及其相关机制
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 全文小结
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介