论文摘要
第一部分高压氧对大鼠胶质瘤动物模型生长影响的临床研究目的：研究高压氧对大鼠颅内胶质瘤生长的影响。方法：250-280g雄性SD大鼠40只,在右侧尾状核注入浓度为105/ul的C6细胞悬液10ul。实验组（20只）于术后2d、4d、6d、8d、10d、12d予高压氧治疗,方案为3.0标准大气压、100%纯氧气维持1h,对照组（20只）假治疗方案采用1.0标准大气压空气中维持1h。所有实验组及对照组大鼠分别于术后1d、3d、5d、7d、9d、11d、13d通过触须试验进行双侧前肢神经功能评定,术后16d,所有大鼠称量体重计算体重变化、每组随机取5只大鼠进行头颅MRI平扫计算肿瘤体积。每组各取10只过度麻醉、断头取脑测定肿瘤重量、干湿重法测定脑组织水含量,每组其余10只等待自然死亡时间、计算平均生存天数、最短及最长生存期。结果：1.经过立体定向手术建立SD-C6颅内右基底节胶质瘤模型,所有大鼠于术后1d出现左侧肢体功能评分显著下降,且两组评分无显著差异（P>0.05）,经过高压氧治疗一次后,HBO组大鼠左侧肢体功能评分即明显高于对照组（P<0.01）,该差异一直持续至术后13d最后一次评分；两组大鼠于术后7d左右开始出现右侧肢体评分下降,术后9d、11d、13d HBO组大鼠右侧肢体功能评分高于对照组（P<0.01）。2.术后16d,HBO组大鼠体重增长11.0±10.5g,对照组大鼠体重增长18.2±9.8g,两组数据无统计学差异（P>0.05）。3.术后16d头颅MRI平扫提示两组大鼠颅内均有肿瘤形成,HBO组肿瘤体积为0.410±0.121cm3,高于对照组的0.272±0.135cm3（P<0.05）。4.术后16d HBO组大鼠肿瘤重量为0.26±0.08g,大于对照组的0.20±0.11g（P<0.05）。5.术后16d两组右（患）侧半球水含量显著高于左（对）侧半球（P<0.05）,而HBO组与对照组相比,患侧、对侧半球及小脑水含量均无统计学差异（P>0.05）。6.HBO组大鼠4周生存率为50%（5/10）,平均生存期28.3±1.9d,最短生存期23d,最长生存期35d；对照组4周生存率为60%（6/10）,平均生存期29.4±2.6d,最短生存期24d,最长生存期37d,两组平均生存期及四周生存率无显著差别。结论：1.HBO（3ATA,1h×6次）对C6-SD大鼠胶质瘤有促进肿瘤生长作用；2.HBO对手术创伤及肿瘤生长引起的神经功能缺损有显著康复疗效；3.HBO（3ATA,1h×6次）对C6-SD大鼠生存期无显著影响。第二部分高压氧对大鼠胶质瘤模型VEGF/HIF-1α表达、微血管形成及肿瘤细胞凋亡的影响目的：研究高压氧对大鼠颅内胶质瘤模型VEGF、HIF-1α表达、微血管形成及肿瘤细胞凋亡的影响。方法：250-280g雄性SD大鼠20只,在右侧尾状核注入浓度为105/ul的C6细胞悬液10ul,实验组（10只）于术后2d、4d、6d、8d、10d、12d予高压氧治疗,方案为3.0标准大气压、100%纯氧气维持1h,对照组（10只）假治疗方案采用1.0标准大气压空气中维持1h。术后16d两组大鼠均过度麻醉,心脏灌注取脑,石蜡包埋、切片,行HE染色、免疫组化染色,检测肿瘤组织、肿瘤周边vWF、VEGF、HIF-1α表达,以vWF阳性血管数作为微血管密度,TUNEL法标记肿瘤内部及周边凋亡细胞。结果：1.HE染色证实HBO组及对照组基底节部位均有肿瘤形成,瘤细胞排列密集呈梭形,核大深染,病理性分裂象多见,典型者可见瘤内小瘤巢呈漩涡状排列,肿瘤周边部分细胞浸润正常组织但界限仍清楚,部分可有被膜形成。HBO组肿瘤细胞排列更为密集,分裂更旺盛,微血管形成多见；而对照组肿瘤分裂旺盛,坏死、出血多见。2.VEGF瘤内表达率HBO组高于对照组（P<0.05）,瘤周及正常组织罕见表达；HIF-1α瘤内表达率HBO组明显高于对照组（P<0.05）,瘤周表达率两组无显著差异（P>0.05）,对侧正常脑组织罕见表达。3.HBO组瘤内微血管密度为15.5±2.1,高于对照组的9.8±2.1（P<0.05）；两组瘤周微血管密度无统计学差异（P>0.05）。4.TUNEL标记荧光成像显示HBO组肿瘤内、瘤周组织阳性细胞数明显低于对照组,DAB复染证实瘤内及瘤周凋亡细胞比例对照组均明显高于HBO组。结论：HBO可上调大鼠胶质瘤内HIF-1a、VEGF因子表达,使肿瘤内部微血管形成增多,抑制瘤内及瘤周细胞凋亡。