论文摘要
目的:同时使用Hoechst 33258/FITC-Pisum sativum agglutinin （FITC-PSA）复合荧光染色法检测精子顶体反应和存活率,以评价此染色法的有效性和临床应用价值。材料方法:18名既往有生育史的男性提供新鲜精液标本。使用上游法收集标本中的存活精子。Hoechst 33258加入标本染色10分钟,洗脱后涂片,吹干,再用FITC-PSA染色30分钟。使用荧光显微镜观测结果。同时进行CTC金霉素染色法检测顶体完整率,及伊红染色检测精子的存活率用以对照。实验中使用钙离子载体A23187诱发顶体反应,比较使用钙离子载体A23187前后的顶体反应情况。结果:观察到4种不同染色结果的精子:a)存活的顶体反应的精子,b)存活的顶体完整的精子,c)死亡的顶体反应的精子,d)死亡的顶体完整的精子。Hoechst 33258染色的结果和伊红染色检测的精子活率结果具有显著相关性（r=0.633,P<0.01）。FITC-PSA和CTC检测精子顶体完整率结果具有显著相关性（r=0.928, P<0.001）。Hoechst 33258/FITC-PSA复合染色可以发现钙离子载体A23187具有诱发顶体反应的效果。经钙离子载体A23187处理后存活的顶体完整的精子百分比显著降低（P<0.01）,死亡的顶体反应的精子和存活的顶体反应的精子百分比显著升高（P<0.01,P<0.05）。死亡的顶体完整的精子百分比基本没有变化。结论:Hoechst 33258/FITC-PSA复合染色能够简便有效的同时检测精子顶体反应和活率。此复合染色法简便快捷,能够有效评价精子功能,具有临床应用价值。