论文摘要
本文采用悬浮交联法制备出了一种新型的壳聚糖衍生物微珠,探讨了不同反应操作条件对微珠形成的影响,并测定了该微珠的某些物理、化学性质,用扫描电镜对合成的微珠进行了形貌观察。结果表明许多因素如25%戊二醛用量和乳化剂tween-60用量、壳聚糖乙酸溶胶浓度等因素对微珠合成和理化性能有直接的影响;反应在40℃～60℃能顺利进行;合成的微珠对热和一些有机溶剂、弱酸、弱碱等有很高的化学稳定性。 在第一部分完成的基础上,应用正交设计以及统计分析软件SPSS13.0,进行了特异性河豚毒素（Tetrodotoxin,TTX）亲和壳聚糖微珠的合成和分析,目前尚无此类报道。用通用的小鼠生物法检测毒素量,考马斯亮蓝检测杂蛋白。相对于活性炭对TTX的吸附,特异性TTX亲和壳聚糖微珠对于TTX的吸附具有较强的特异性,吸附量为10μg/g左右（湿珠）;回收率高于活性炭提取分离方法,同时对于除去杂蛋白也有很好的效果,提取TTX粗毒液收率达85%,杂蛋白降低3倍左右,毒素损失15%左右:直接处理粗提液回收率达到80%,杂蛋白降低了4倍,毒素损失20%左右。 壳聚糖分子中含有大量的氨基和羟基,可与Cu2+形成稳定的络和物,对Cu2+的富集作用非常突出,具有极强的选择分离效果,可应用于水处理,Cu2+的回收等。本文研究了Cu2+浓度、pH、吸附时间、温度、微珠用量等不同吸附条件下特异性TTX亲和壳聚糖微珠对Cu2+吸附的影响,探讨了吸附的可能内在机理。用分光光度法测定吸附前后溶液中Cu2+浓度。实验结果表明该微珠吸附容量可达178mg/g,而且再生方便,可重复使用,是性能良好的Cu2+吸附剂。 由于壳聚糖是溶菌酶的底物,所以理论上推断其衍生物对溶菌酶应有较强的亲和力。应用两种强弱阳离子交换树脂（D724,D155）和特异性TTX亲和壳聚糖微珠吸附鸡蛋清中的溶菌酶。所得结果:特异性TTX亲和壳聚糖微珠提纯溶菌酶,所得酶比活力为最高7793U/mg蛋白,纯化倍数为36.2倍,效果优于D724,D155的纯化效果。微珠吸附量也比两种树脂高,同时残留的杂蛋白较少,本实验为壳聚糖的应用于鸡蛋清溶菌酶的提取研究奠定了初步的基础。