郑州人民医院病理科河南郑州450000
摘要:目的探究宫颈病变筛查采用HPV-DNA检测的临床意义。方法采用SPR生物传感器法对我院840例受检者进行HPV-DNA检测，并进行统计分析。结果本次研究中，共有190位受检者检出HPV感染，HPV高危型以基因型16较多见，其次为58型、18型；低危型以基因型6较多见，其次是43型、11型；提示宫颈炎症性病变和低级别上皮内病变以感染HPV低危型为主，高级别上皮内病变和癌变以高危型占优势。结论宫颈癌前病变的HPV感染高于宫颈炎症的感染率，HPV-DNA检测对宫颈病变具有较高的敏感度和阴性预测值，同时在宫颈病变筛查和HPV疫苗研发中具有重要临床意义。
关键词:宫颈病变；HPV-DNA检测；
[Abstract]Objective:TostudytheclinicalsignificanceofHPV-DNSdetectionforscreeningofcervicallesions.Method:ThroughSPRbiosensor,840patientsinourhospitalreceivedHPV-DNSdetection.Thedatawerestatisticallyanalyzed.Result:Inthisresearch,190subjectswereconfirmedwithHPVinfection.ForHR-HPV,thecommongenetype16wasfollowedbytype58and18.ForLR-HPV,thecommongenetype6wasfollowedbytype43and11.Thecervicitisandlow-gradeintraepitheliallesionsweremajorlycausedbyinfectionofLR-HPV.Thehigh-gradeintraepitheliallesionsandcancerationweremajorlycausedbyHR-HPV.Conclusion:Forprecancerouslesionsofcervicalcancer,HPVinfectionrateishigherthanthatofcervicitis.HPV-DNSdetectionhasahighersensitivityandnegativepredictivevalueaswellasanimportantclinicalsignificanceforscreeningofcervicallesionsandvaccinedevelopmentofHPV.
[Keywords]CervicalLesions;HPV-DNSDetection;
宫颈病变是临床育龄女性中的常见疾病，主要包括炎症、肿瘤、畸形及癌前病变等。其中宫颈癌是临床妇科肿瘤中的恶性肿瘤，其发病率高，病情严重，在一定程度上危及了女性的健康和生命。据有关数据统计，90%以上宫颈癌患者均可检查出HPV感染，HPV感染是宫颈癌主要危险因素。因此，建立合适的宫颈病变筛查方案具有重要的临床意义[1]。我国以往的传统筛查方法是“巴氏5级细胞分类法”，但这种方法在临床取样送检时容易出现大量的白细胞、粘液及红细胞等，影响到异常细胞的检出率，故此法已被薄层细胞学检查（TCT）所取代，但TCT法虽然提高了临床准确性，对于早期未出现的细胞内瘤变尚不能筛查出来。因此，早期进行HPV检测是育龄妇女宫颈病变筛查的有效手段[2]。本次研究HPV-DNA检测在宫颈病变筛查中的意义，现报告如下。
1资料和方法
1.1一般资料选取我院2013年3月-2014年3月收治840例受检者，年龄20-55岁，平均年龄（25.3±3.6）岁。采用SPR生物传感器法进行HPV-DNA检测，以病理活检结果作为临床确诊的依据。
1.2主要试剂刷取宫颈处表皮脱落细胞的专用采样刷，HPV基因扩增分型检测试剂，HPV分型基因芯片与SPR平台均由北京金菩嘉医疗科技有限公司提供。
1.3方法提取1ml的细胞悬液加入离心管内，12000r/min离心5分钟，弃去上清，使用1ml的细胞洗涤液洗涤细胞，离心后加入200µl的DNA快速裂解提取液中，于95℃水浴15分钟后继续离心，吸取上清液5µl加入到PCR反应体系中，依据扩增条件进行扩增（每次均设有阳性对照），取20µl阳性对照扩增产物和60µl杂交缓冲液加入每个扩增反应试管内，置于水浴锅或PCR仪器中变性5分钟后，开始杂交，杂交的过程在W2600型SPR平台上进行。HPV分型芯片可同时检测24种亚型（高危型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68型；低危型：6、11、40、42、43、44、54、70型）。
2结果
2.1临床确诊的不同程度宫颈病变所对应的HPV基因型情况本次研究中，共有190位受检者检出HPV感染，HPV高危型以基因型16较多见，其次为58型、18型；低危型以基因型6较多见，其次是43型、11型；提示宫颈炎症性病变和低级别上皮内病变以感染HPV低危型为主，高级别上皮内病变和癌变以高危型占优势，见表1。
3讨论
近些年，HPV感染成为临床常见的性传播疾病。目前，我国尚未组织规模的HPV分子流行病学调查，但HPV引起的生殖道感染发病率已呈现逐年上升趋势，跃居我国性病的第二位，严重影响了女性的健康和生命[3-4]。同时HPV的持续感染导致宫颈上皮内瘤变和宫颈癌发生已被世界范围内公认。因此，临床对女性患者进行HPV检测干预，阻断宫颈细胞进一步恶变，降低宫颈癌的发生率具有重要的临床意义。本次研究对临床宫颈病变筛查中实施HPV-DNA检测，提高了临床宫颈癌前病变的检出率，对早期发现癌前病变、病情监测及预后评估都起到了重要的作用，尤其临床将HPV-DNA与TCT法联合应用，是育龄妇女宫颈病变筛查的有效手段[5-6]。HPV基因组较小，只有近8000bp，其编码基因主要包含三组：三个癌基因、两个调节基因及两个结构蛋白。HPV感染可以激活癌基因，使宫颈上皮发生不典型增生，逐步出现不同程度的癌前病变，这也是临床导致宫颈癌的重要因素。有研究表明，宫颈癌样品中约有96.6%可以检测出HPV，也有不断的数据表明HPV型与宫颈癌有关，但其致癌性机制尚需要更深入的研究和探讨。本次研究发现，HPV-DNA检测列为宫颈癌细胞学筛查的有效手段[7-8]，具有以下几个优点：一是HPV检测的应用价值属于独立细胞学，临床采用HPV检测，不仅能有效的诊断和追踪液基细胞学检查提示的轻度至高度核异形妇女，还可以降低假阴性图片引起的风险，尤其是难以取到完整的宫颈鳞柱交界处或不满意的细胞学图片而无法确诊的病变，使更多的宫颈病变得到及时、正确的诊断和治疗，进而减少宫颈癌的发生，做到真正意义上的早期诊断、早期治疗。二是对于宫颈高度病变且手术治疗后的患者，HPV检测可以作为其疗效判断与随访监测的可靠指标。三是HPV检测可以预测宫颈癌的发病风险，并指导筛查的时间间隔。因此，HPV-DNA检测成为临床筛查宫颈癌的主要手段，同时了解HPV感染的情况、亚型分布对临床发现HPV感染的高危人群，并对其进行积极有效的控制和治疗具有重要的临床意义，也是降低宫颈癌发生率的主要因素[9-10]。本次研究的结果显示：本次研究中，共有190位受检者检出HPV感染，HPV高危型以基因型16较多见，其次为58型、18型；低危型以基因型6较多见，其次是43型、11型；提示宫颈炎症性病变和低级别上皮内病变以感染HPV低危型为主，高级别上皮内病变和癌变以高危型占优势。综上所述，宫颈癌前病变的HPV感染高于宫颈炎症的感染率，HPV-DNA检测对宫颈病变具有较高的敏感度和阴性预测值，同时在宫颈病变筛查和HPV疫苗研发中具有重要临床意义。
参考文献：
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作者简介：
闫琛，职称，初级，性别：女，学历：硕士，出生年月：1984年6月，研究方向：分子病理，科室：病理科，工作单位：郑州人民医院；
杨广英,郑州人民医院病理科；
通讯作者及基本信息，闫琛。