论文摘要
目的:为探讨抑制复合物IV在缺血再灌注损伤中的作用,采用CN-（氰根离子）选择性抑制呼吸链复合物IV,观察缺血再灌注后线粒体活性氧生成速率、呼吸链功能以及心磷脂含量变化。方法:利用Langendorff离体心脏灌注模型,用含KCN（氰化钾）的ST.Thomas停博液（KCN停跳液）以及含羟钴胺的Kerbs-Henseleit液(VB12缓冲液)进行离体心脏常温缺血再灌注实验。56只大鼠随机分为7组:平衡组（B）、续灌组（C）、对照组（CON）、KCN停搏组（KCN）、缺血组（IS）、KCN停博液+VB12缓冲液再灌注组（KVB）和VB12缓冲液再灌注组（VB）。B组平衡灌注15min;C组用Kerbs-Henseleit液（K-H液）持续灌注85min;KCN组平衡灌注15min后,KCN停跳液停搏并全心缺血40分钟;IS组平衡灌注15min后,ST.Thomas停跳液停搏并全心缺血40分钟;KVB在KCN组的基础上VB12缓冲液续灌30 min;CON在IS组的基础上K-H液续灌30min;VB组在IS组的基础上VB12缓冲液再灌注30min。采用Powerlab离体灌注系统记录心功能变化;CK,LDH评价心肌酶学变化;TTC染色法测定心肌梗死面积;Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能;线粒体ROS生成速率和膜电位采用荧光探针法;线粒体心磷脂含量测定采用HPLC法。结果:再灌注末,KVB组心肌酶升高程度较CON组更低,多数心功能指标更好,心肌梗死面积亦有所减少。缺血末无论采用苹果酸/谷氨酸为底物还是以琥珀酸为底物,KCN组ROS生成速率较IS组低。再灌注末,KVB组ROS生成速率均较CON组低,主要的呼吸功能指标要好;膜电位KVB组较CON组要高。心磷脂含量无论在缺血末还是再灌注末,采用KCN停博液均可减少心磷脂丢失。结论:缺血期采用CN-抑制线粒体呼吸链,可减轻再灌注后心肌梗死面积;可更好的保存再灌注后线粒体呼吸功能、膜电位和心磷脂含量;对呼吸链复合物IV的抑制作用,可能是内源性气体分子的信号感应机制之一。
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