益气活血复方对局灶性脑缺血模型大鼠IL-6mRNA表达的影响

益气活血复方对局灶性脑缺血模型大鼠IL-6mRNA表达的影响

论文摘要

目的 通过观察益气活血复方对MCAO大鼠的神经功能、脑梗死体积、脑组织中IL-6mRNA表达水平的作用,探讨益气活血复方影响脑梗死后炎性细胞因子IL-6表达的相关机理。 方法 大鼠随机分成模型组、益气活血复方高剂量组、中剂量组、低剂量组、环磷酰胺组、正常组和假手术组(未闭塞大脑中动脉)。造模前8天开始灌胃大鼠,每天一次。通过电凝法造成大鼠右侧大脑中动脉永久性闭塞,制备成大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。造模后观察大鼠神经功能缺损情况,测量脑梗死体积,并于24h、48h、72h三个时间点分批处死大鼠,取出脑组织,进行逆转录聚合酶链式反应,观察各组IL-6mRNA表达情况。实验结果使用ONE-WAY ANOVA检验。 结果 与模型组比较,中药各组、环磷酰胺组的神经功能缺失评分减少,脑梗死体积缩小。正常组和假手术组IL-6mRNA表达微弱,模型组IL-6mRNA表达水平明显高于正常组和假手术组,24h水平高于48h和72h水平。与模型组相比,高、中、低剂量益气活血方和环磷酰胺组均能不同程度下调MCAO模型大鼠IL-6mRNA表达,随着用药量的增加,IL-6mRNA表达呈递减趋势,具有一定的量效关系,高剂量的益气活血复方结果与环磷酰胺类似。 结论 中药各组能改善神经功能缺失情况,缩小脑梗死体积,降低大鼠脑内炎性细胞因子IL-6mRNA表达水平。早期抑制脑梗死后炎性细胞因子,减少炎症反应可能是益气活血复方治疗急性脑梗死,改善神经功能缺失和缩小脑梗死体积的作用机理之一。

论文目录

  • 前言
  • 摘要
  • abstract
  • 缩略词表
  • 实验研究
  • 1 实验材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 实验用药
  • 1.3 实验仪器和试剂
  • 1.3.1 造模试剂和仪器
  • 1.3.2 RT-PCR试剂和仪器
  • 1.3.3 器械处理和试剂配制
  • 2 实验方法
  • 2.1 分组
  • 2.2 给药
  • 2.3 MCAO模型制备
  • 2.4 大鼠神经症状观察
  • 2.5 标本制取
  • 2.5.1 脑梗死体积标本制取
  • 2.5.2 RT-PCR标本制取
  • 2.6 RT-PCR两步法测IL-6mRNA表达
  • 2.6.1 总RNA的提取
  • 2.6.2 逆转录合成cDNA(RT)
  • 2.6.2.1 RT1
  • 2.6.2.2 RT2
  • 2.6.2.3 RT3
  • 2.6.3 PCR反应
  • 2.6.3.1 引物的设计和合成
  • 2.6.3.2 PCR反应
  • 2.6.4 电泳
  • 3 统计学处理
  • 4.结果与分析
  • 4.1 大鼠造模情况
  • 4.2 手术后大鼠神经功能缺损结果
  • 4.3 大鼠脑梗死体积结果
  • 4.4 各组各时点IL-6mRNA表达结果
  • 讨论
  • 1.实验方法的选择
  • 1.1 实验动物的选择
  • 1.2 造模方法的选择
  • 1.3 假手术组的选择
  • 1.4 内参GAPDH的选择
  • 2.急性脑缺血后的IL-6mRNA表达
  • 2.1 IL-6的生物学特性
  • 2.2 IL-6与脑梗死
  • 3.益气活血复方的组方依据
  • 4.益气活血复方对脑梗死体积的影响
  • 5.益气活血复方对神经功能的影响
  • 6.益气活血复方下调炎性细胞因子IL-6
  • 结论
  • 问题与展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 综述
  • 中药益气活血复方治疗缺血性卒中的研究进展
  • 1.病机研究
  • 2.方药配伍与组成
  • 3,临床疗效观察
  • 4,基础实验研究
  • 4.1 动物模型制备
  • 4.2 基础药理研究
  • 4.2.1.改善脑血流量及能量代谢
  • 4.2.2.改善脑水肿
  • 4.2.3.对血液流变学的影响
  • 4.2.4.减轻兴奋性氨基酸的毒性
  • 4.2.5.抑制细胞凋亡
  • 4.2.6.清除氧自由基,改善神经功能
  • 4.2.7 减轻白细胞粘附和炎性细胞浸润,抑制炎症反应
  • 4.3 益气活血方单味药物主要药理
  • 5,问题和展望
  • 参考文献
  • 附件一
  • 公汁友表的学术论文、专著和科研成果
  • 附件二
  • 声明
  • 相关论文文献

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