龙爪槐抑藻化感物质的分离、抑藻机理及应用效果研究

论文摘要

铜绿微囊藻随着水体富营养化的发展,正在全世界蔓延泛滥。这种单细胞蓝藻产生的七肽化合物（微囊藻毒素）能引起人类的肝癌,也会影响水生植物和动物的正常生长,造成严重的生态系统失衡。本论文以龙爪槐为材料,研究了其抑制铜绿微囊藻的（Microcysis aeruginosa）生长现象极其抑藻机理,提取分离并鉴定其中的抑藻物质。本论文分四部分：（1）龙爪槐叶片浸提液对铜绿微囊藻的抑制作用：处理得到的浸提液,以其配置BG11培养液,作铜绿微囊藻的培养试验。结果表明浸提液抑制藻细胞生长,促进藻细胞黄化死亡。（2）用乙醇溶剂萃取法从龙爪槐中得到的抑藻物质作初步分离和鉴定：分别用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂依此进行萃取,各萃取液经浓缩处理,分别作铜绿微囊藻实验。结果表明,正己烷相的抑藻率达到97.89%。（3）抑藻机理实验结果表明：实验过程中藻细胞的生理指标都发生变化,藻细胞生长量和叶绿素含量显著降低；可溶性蛋白含量和SOD酶活性呈先升高后下降趋势。（4）龙爪槐叶片中提取得到的化感物质,经HPLC、GC-MS鉴定,这些化和物中主要含有醇类,酮类和萜类物质。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 文献综述
• 1 铜绿微囊藻
• 1.1 铜绿微囊藻及其危害
• 1.2 铜绿微囊藻的防治
• 2 高等植物的化感作用
• 2.1 化感作用的定义和特征
• 2.2 化感作用的研究方法
• 2.3 水生维管束植物对藻类的生长抑制作用
• 2.4 藻类对藻类的化感抑制作用
• 3 化感物质
• 3.1 化感物质的定义
• 3.2 化感物质的种类
• 3.3 化感物质的作用机理
• 4 化感物质的分离鉴定和生物学检测
• 4.1 化感物质的提取
• 4.2 化感物质的分离和纯化
• 4.3 化感物质的鉴定和检测
• 5 本学位研究目的意义和研究内容
• 5.1 研究目的意义
• 5.2 研究的主要内容
• 第一章 龙爪槐叶片提取物的抑藻效果研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 主要仪器设备
• 1.3 铜绿微囊藻培养基组分
• 1.4 实验方法
• 1.5 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 龙爪槐叶片浸提液对铜绿微囊藻的抑制作用
• 3 结论
• 4 讨论
• 第二章 龙爪槐化感物质的初步提取及抑藻能力的生物学检测
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 主要溶液的配制
• 1.3 藻的培养
• 1.4 龙爪槐叶片抑藻活性成分粗提
• 1.4.1 提取原理
• 1.4.2 龙爪槐叶片活性物质的提取
• 1.4.3 分离组分的抑藻机理
• 2 结果与分析
• 2.1 龙爪槐叶化感物质的分离
• 2.2 龙爪槐叶片化感物质各分离组分的抑藻作用比较
• 2.3 龙爪槐正己烷相组分对铜绿微囊藻生长特性的影响
• 3 结论
• 4 讨论
• 第三章 龙爪槐化感物质抑藻机理研究
• 1 材料与方法
• 1.1 主要仪器和试剂
• 1.2 材料
• 1.3 实验方法
• 1.3.1 叶绿素a含量的测定
• 1.3.2 细胞膜透性的测定
• 1.3.3 蛋白质含量的测定
• 1.3.4 超氧化物歧化酶（SOD）活力的测定
• 2 结果与分析
• 2.1 龙爪槐化感物质对铜绿微囊藻叶绿素a含量的影响
• 2.2 龙爪槐化感物质对铜绿微囊藻膜透性的影响
• 2.3 蛋白质标准曲线
• 2.4 龙爪槐化感物质对铜绿微囊铜绿微囊藻蛋白质含量的影响
• 2.5 龙爪槐化感物质对铜绿微囊铜绿微囊藻SOD活性的影响
• 3 讨论
• 第四章 龙爪槐叶片化感物质的分离与鉴定
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 仪器与试剂
• 1.3 实验方法
• 1.3.1 龙爪槐叶片成分的提取分离
• 1.3.2 化感物质分离和活性检测
• 1.3.3 化感物质纯化和活性检测
• 1.3.4 龙爪槐叶抑藻活性成分的GC-MS分析
• 2 结果与分析
• 2.1 柱层析
• 2.2 纯化
• 2.3 龙爪槐叶化感物质结构初步鉴定
• 2.3.1 F-02组分的GC-MS分析结果
• 2.3.2 F-05组分的GC-MS分析结果
• 2.3.3 F-06组分的GC-MS分析结果
• 2.3.4 F-07组分的GC-MS分析结果
• 2.3.5 F-08组分的GC-MS分析结果
• 2.3.6 F-09组分的GC-MS分析结果
• 2.3.7 F-10组分的GC-MS分析结果
• 3 结论
• 4 讨论
• 第五章 总结
• 参考文献
• 附表
• 致谢