论文摘要
杜仲属于杜仲科植物(Eucommia ulmoides Oliv),始载于《神农本草经》,是我国的传统经济作物。杜仲中含有丰富的化学物质,如苯丙素类、环烯醚萜类、木脂素类等,并具有多种药效,如保肝利胆、抑菌消炎、增强抵抗力、降血脂、降血压等。本论文对杜仲中的活性成分进行提取、分离纯化、检测等技术深入的研究,为杜仲深加工、综合开发获取最佳工艺路线。1、对杜仲皮中活性成分的提取工艺进行研究。通过对索氏提取法、浸提法、超声波提取法这三种提取方法的比较,所得出的京尼平苷酸(GPA)、京尼平苷(GP)、绿原酸(CA)、松脂醇二葡萄糖苷(PDG)的含量结果显示,超声波提取法提取快速、高效,并确定了较好的工艺参数。2、建立了PR-HPLC检测方法。突破前人的研究方法,本方法可同时检测出三大类化合物四种有效成分(GPA、CA、GP、PDG)含量,并且操作简单、快速准确、重现性好,为杜仲药材及健康食品的质量控制提供检测依据。检测方法为:采用Kromasil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,线性洗脱梯度:0-7min, 7%B,7-35min,14%B,35-45min,15%B,流速为1.0mL/min,检测波长235nm,柱温30℃。在该色谱条件下,京尼平苷酸,绿原酸,京尼平苷,松脂醇二葡萄糖苷的质量浓度分别在0.1025-0.5125μg/mL(R2=0.9999),0.0925-0.4625μg/mL(R2=0.9999),0.120-0.600μg/mL(R2=0.9996),0.090-0.450μg/mL(R2=0.9998)范围内与色谱峰面积呈现良好的线性关系,平均加标回收率(n=5)为96.06%,96.22%,96.12%,96.08%,RSD分别为1.39%,1.82%,1.53%和1.59%。3、试验研究了杜仲中绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷分离纯化工艺。通过对杜仲中绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷的静态吸附分离,从9种大孔树脂中获得XDA-1为最优纯化材料。确定优化分离纯化工艺为:绿原酸和松脂醇二葡萄糖苷分别取pH值为3-4、5-6,杜仲粗体液上样液体积为40mL,上柱吸附6h后,用纯净水去杂后,分别用50%、80%的乙醇水以1.0mL/min的流速冲洗,绿原酸洗脱液体积为4BV,松脂醇二葡萄糖苷的洗脱液体积为7BV,收集乙醇洗脱液,浓缩干燥后。得初步纯化的绿原酸和松脂醇二葡萄糖苷。
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