我国山女鳟引进群体遗传多样性评估及其改良

论文摘要

山女鳟（Oncorhynchus masou masou）,冷水性鲑科鱼类,原产于日本,我国1996年引入黑龙江水产研究所渤海冷水鱼试验站进行养殖。由于最初引进群体较小,加之累代自繁,导致目前该鱼生产性状已出现明显退化。为了保证这种鱼的健康、稳定、可持续发展有必要对其进行遗传多样性评估和遗传改良。本文根据近年来山女鳟养殖出现的问题,对其种质资源进行了遗传多样性分析;通过与虹鳟杂交,得到了具有商业推广价值的杂交鳟,并初步探讨了杂交鳟的胚胎及仔鱼发育,为杂交鳟的批量生产和养殖开发提供了一定的基础资料。1、虹鳟SSR引物在山女鳟中的通用性分析及引物筛选选用63对虹鳟引物,通过山女鳟DNA模板筛选后,除5对外其余均检测到特异性扩增片段,可见虹鳟的引物在山女鳟上具有很高的通用性。对有特异性扩增的引物进行多态性检测后,其中的OMM5017、OMM5010、OMM5009、OMM5008、OMM5000、OMM1045、OMM1044、OMM1036、OMM1035、OMM1012、OMM1000、G73805、AF352738、AF352763、AF352750、AF352746、AF352744、AF352740、AF352758、OMM5004、OMM5006、OMM5020、OMM5025共23对扩增效果好,等位基因数较多。AF352748、AF352749、AF352755、OMM1007、OMM1011、OMM1018、OMM1019、OMM1023、OMM5002、OMM5003、OMM5005、OMM5012只出现一个等位基因,呈现出单态。OMM5126、OMM5125、OMM5020、OMM5019、OMM5007、OMM5006、OMM5004、OMM1068、OMM1046、OMM 1037出现两个等位基因,无多态。其它引物没有扩增出特异性片段。2、我国山女鳟引进群体遗传多样性微卫星分析利用筛选出的23对具有多态性的微卫星引物对渤海冷水鱼试验站两个山女鳟群体和北京顺通虹鳟鱼养殖中心的山女鳟群体进行了遗传多样性分析,旨在对其种质资源的保护、监测和遗传育种等进行指导。结果显示:（1）各有效等位基因数比实际观察到的要少,表明等位基因间相互影响;（2）另外位点OMM5008、OMM1044、OMM1036、OMM1012、AF352763、AF352758、OMM5004在三个群体中观测等位基因数和有效等位基因数都存在着显著差异,表明各等位基因在群体内和群体间分布都不均匀;（3）大多数位点在各个群体内都表现出高度的多态性,OMM5025、OMM5020、OMM5006、AF352758在三个群体中都表现为中度多态;（4）OMM1000、AF352738、AF35274、OMM5004的多态信息含量在这三个群体中具有显著差异,可以很好的把它们区分开来;（5）Fis和Fit的平均值分别为0.0015和0.0014,表明在群体内存在近交现象;（6）经过UPGMA法聚类得出1996年引进的山女鳟形成的两个群体的遗传距离为0.1175,亲缘关系较近,它们聚为一支,而2008年新引进的山女鳟单独成为一支。3、红鳟（♀）和山女鳟（♂）杂交种胚胎和仔鱼发育的研究利用人工繁育技术对虹鳟（♀（）Oncorhynchus mykiss）和山女鳟（♂）（Oncorhynchus masou masou）进行了种间杂交实验,并对杂交胚胎和仔鱼的发育进行了观察,通过观察,详细描述了其胚胎发育和仔鱼发育各个阶段的发育时序和形态特征。结果表明:在水温为4.3-9.2℃的条件下,杂交受精卵的有效发育积温达到206.01℃·d发眼,完成胚胎发育所需的有效积温为387.44℃·d,杂交鳟的胚胎发育速度介于双亲之间;初孵仔鱼,全身透明,血液循环和心跳清晰可见,肛突明显,背鳍原基出现;破膜后20d,全长为21.25±1.40 mm,此时约半数卵黄囊体积明显减小,可以看见背鳍、臀鳍与尾鳍的出现;破膜后40d,个别发育较快的个体开始在水中游动,主动摄食;破膜后45d,卵黄囊基本吸收完全,仔鱼具有游泳能力,50d后几乎全部上浮。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1. 遗传多样性及其评估方法
• 1.1. 什么是遗传多样性
• 1.2. 遗传多样性的评估方法
• 2. 鱼类遗传改良常用方法
• 2.1 选择育种
• 2.2 杂交育种
• 2.3 其它育种
• 第二章、虹鳟SSR 引物在山女鳟中的通用性分析及引物筛选
• 1、实验仪器及试剂
• 2、基因组DNA 提取
• 3. 微卫星引物的筛选
• 3.1 引物退火温度的确定
• 3.2 引物扩增效果检测
• 第三章、我国山女鳟引进群体遗传多样性微卫星分析
• 1、实验材料基因组DNA 提取
• 2、实验方法
• 3、微卫星标记等位基因的数据统计
• 3.1 数据分析
• 4. 结果与讨论
• 4.1 微卫星等位基因及其分布
• 4.2 群体内的遗传变异
• 4.3 群体间的遗传变异
• 4.4 小结
• 第四章、虹鳟（♀） 和山女鳟（♂）杂交种胚胎和仔鱼发育的 研究
• 1、材料与方法
• 1.1 受精卵的获取及孵化
• 1.2 采样和固定
• 1.3 观察方法
• 1.4 有效发育积温的计算
• 1.5 数据处理和统计分析
• 2 结果与分析
• 2.1 胚胎发育
• 2.2 仔鱼发育
• 3、讨论
• 3.1 杂交鳟与亲本胚胎发育的比较
• 3.2 水温对杂交鳟胚胎发育的影响
• 3.3 杂交鳟畸形仔鱼的出现
• 参考文献
• 科研成果
• 致谢