论文摘要
目的: 心功能衰竭的早期诊断与干预在心脏疾患的诊治中非常重要。脑钠肽（BNP）作为一种主要来源于心室肌细胞的循环激素,在心室壁张力升高时迅速、大量分泌,其血浆浓度与心功能的相关性已被广泛认识。但目前国内检测BNP浓度靠进口国外的各种不同试剂盒,每种试剂盒检测范围及参考值不同,结果亦不尽相同,缺乏可比性,且价格昂贵。为使BNP检测国产化,本研究制备了BNP单克隆抗体,初步用于正常人及心脏病患者的血浆BNP浓度检测,以评价自制BNP单抗检测所得的BNP浓度与心功能的关系,为进一步研制国产BNP单抗试剂盒奠定基础。 方法: 1.根据GenBank中检索到的人BNP成熟蛋白序列,拼接BNP的基因。以原核表达系统pET32构建pET32a.BNP重组质粒,经诱导提取纯化,制备人Trx-BNP融合蛋白。 2.以Trx-BNP融合蛋白作抗原,免疫小鼠,获得分泌BNP抗体的杂交瘤细胞株。将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔,进行BNP单克隆抗体的大量制备。检测杂交瘤细胞的培养上清抗体效价及腹水抗体效价。以Western blot及免疫组化检测制备的BNP抗体特异性。 3.用制备的BNP单克隆抗体以ELISA间接法检测正常人及各级心功能的心脏病患者的血浆BNP浓度。正常人20例,心脏病患者92例,后者按纽约心脏病学会（NYHA）心功能分级分为:心功能Ⅰ级（24例）、Ⅱ级（23例）、Ⅲ级（20例）、Ⅳ级（25例）,同时经超声心动图评价心脏收缩（EF值）及舒张功能（E/A值）。将心脏功能与BNP浓度作相关性分析,数据进行统计学处理。 结果: 1.利用原核表达系统pET32成功构建了pET32a.BNP重组质粒,并制备出高纯度的人Trx-BNP融合蛋白。 2.以Trx-BNP融合蛋白作抗原成功制备BNP单克隆抗体。抗体效价高,特异性强。
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- [1].脑钠肽对慢性充血性心力衰竭患者的预后及危险分层的临床诊断价值[J]. 中国社区医师 2019(34)
- [2].床边即时脑钠肽检测对心力衰竭患者的诊断价值[J]. 中西医结合心血管病电子杂志 2019(35)
- [3].重组人脑钠肽间歇性给药联合左西孟旦治疗难治性心力衰竭的效果观察[J]. 右江医学 2020(01)
- [4].心理调适对慢性心衰患者情绪及脑钠肽的影响[J]. 健康研究 2020(02)
- [5].重组人脑钠肽治疗顽固性心力衰竭的疗效与安全性分析[J]. 上海医药 2020(12)
- [6].保元汤对冠心病慢性心力衰竭患者B型脑钠肽的影响探讨[J]. 基层医学论坛 2020(20)
- [7].脑钠肽在老年慢性充血性心力衰竭中的诊断及预后评估中的临床意义[J]. 北方药学 2018(02)
- [8].脑钠肽在心血管临床的应用分析[J]. 现代医学与健康研究电子杂志 2018(04)
- [9].脑钠肽在心血管临床的应用探讨[J]. 中西医结合心血管病电子杂志 2018(29)
- [10].小剂量冻干重组人脑钠肽治疗慢性充血性心力衰竭失代偿病人的疗效性和安全性观察[J]. 安徽医药 2017(05)
- [11].重组人脑钠肽对风湿性心脏瓣膜置换术后心肾功能的保护作用[J]. 中国循证心血管医学杂志 2016(10)
- [12].重组人B型脑钠肽治疗急性失代偿性心衰的临床研究[J]. 中国医刊 2010(07)
- [13].N末端B型脑钠肽原的检测在慢性心力衰竭诊断中的应用[J]. 中国现代药物应用 2015(16)
- [14].重组人脑钠肽在心肌梗死所致急性心力衰竭患者临床治疗中的效果观察[J]. 微量元素与健康研究 2015(05)
- [15].急性脑梗死患者B型脑钠肽监测及临床意义[J]. 中外女性健康研究 2019(23)
- [16].血清脑钠肽检测在老年人甲状腺功能亢进性心脏病中的诊断观察[J]. 中国医药指南 2020(04)
- [17].脑钠肽测定在慢性充血性心力衰竭诊断中的应用研究[J]. 临床检验杂志(电子版) 2018(02)
- [18].对肺心病患者进行脑钠肽监测的临床意义[J]. 当代医药论丛 2018(06)
- [19].脑钠肽在老年慢性充血性心力衰竭患者中的诊断及预后评估中的临床意义[J]. 转化医学电子杂志 2016(12)
- [20].慢性肺心病患者急性期血清脑钠肽与血沉的相关性研究[J]. 深圳中西医结合杂志 2016(22)
- [21].慢性阻塞性肺疾病并肺心病患者与超敏C-反应蛋白、N端前脑钠肽相关性研究[J]. 黑龙江医学 2017(01)
- [22].血浆超敏C反应蛋白和B型脑钠肽检测对老年慢性心力衰竭患者院内恶性室性心律失常发生的临床应用意义分析[J]. 中国现代药物应用 2017(13)
- [23].重组人脑钠肽的应用进展[J]. 中国循证心血管医学杂志 2017(08)
- [24].螺内酯治疗慢性充血性心力衰竭的疗效及其对血浆B型脑钠肽的影响[J]. 实用医学杂志 2016(10)
- [25].进展型脑梗死患者血清脑钠肽、C反应蛋白和D-二聚体水平变化的临床分析[J]. 现代诊断与治疗 2016(11)
- [26].老年心力衰竭患者B型脑钠肽测定的临床意义[J]. 中西医结合心血管病电子杂志 2016(15)
- [27].冻干重组人脑钠肽治疗扩张型心肌病心力衰竭的临床观察[J]. 岭南心血管病杂志 2016(04)
- [28].重组人脑钠肽治疗急性心力衰竭的研究进展[J]. 医学综述 2015(01)
- [29].重组人脑钠肽治疗充血性心力衰竭患者50例临床分析[J]. 岭南急诊医学杂志 2015(01)
- [30].B型脑钠肽、同型半胱氨酸水平及踝臂指数在老年皮层下动脉硬化性脑病患者中的变化研究[J]. 中国医药科学 2013(22)