论文摘要
文昌鱼属于脊索动物门头索动物亚门,长久以来一直被认为是现存的与脊椎动物亲缘关系最近的无脊椎动物。其形体结构、发育模式和基因组都代表了脊椎动物最简单的模式,为研究脊椎动物免疫的起源和免疫基因的进化提供了一个最理想的实验动物模型。虽然缺乏类似脊椎动物的适应性免疫系统,文昌鱼仍然能够在多种生存环境下健康生长,繁殖后代,它们的成功很大的程度上依赖于其有效的先天性免疫系统。补体系统是先天性免疫系统的重要组成部分,是一个复杂的限制性蛋白水解系统。补体成分可以通过经典途径、替代途径以及凝集素途径活化。补体B因子又称C3激活剂前体,是补体替代激活途径的关键酶之一,主要由肝脏合成。B因子及其同源基因的克隆在人、黑猩猩、鼠、非洲爪蟾、斑马鱼、七鳃鳗、海鞘、海胆、鲎、海葵等动物中都有报道,而且已有实验表明文昌鱼存在补体替代途径,但文昌鱼B因子基因的克隆及其进化分析迄今未见报道。本论文主要利用分子生物学方法,克隆得到文昌鱼具有完整编码框的B因子cDNA全长,并对B因子的表达和功能进行分析。文昌鱼B因子cDNA全长2362 bp,开放阅读框2259 bp,编码752个氨基酸的蛋白质（理论蛋白分子量为82.6 KDa）。文昌鱼B因子为嵌合蛋白,结构域组成为CCP-EGFCA-CCP-CCP-vWFA-SP,与哺乳动物B因子结构域相比在结构域CCP1与结构域CCP2之间另外具有一个EGFCA结构域,是Bf/C2家族的一个新成员。荧光实时定量PCR结果显示文昌鱼受脂多糖（LPS）刺激后,其肝盲囊中BbBf/C2表达量迅速升高且持续维持在升高水平,而后肠中BbBf/C2表达量上调较晚并在显著升高后迅速下降到基准水平。同样,Immuno-Dot Blotting结果显示文昌鱼受到LPS刺激后,其肝盲囊和后肠中BbBf/C2蛋白表达量都有显著升高,而前者表达量升高更显著。所有这些结果都表明肝盲囊和后肠都是文昌鱼受LPS刺激后的免疫反应器官,但是与脊椎动物肝脏同源的肝盲囊是文昌鱼受LPS刺激后BbBf/C2主要合成器官,在急性反应中具有重要作用。