不同黑木相思优良无性系的组织培养关键技术优化

不同黑木相思优良无性系的组织培养关键技术优化

论文摘要

黑木相思(Acacia melanoxylon)原产于澳大利亚,引入我国时间较晚,它具有较高的经济、生态、社会效益。本试验以黑木相思5个优良无性系组培苗为试验材料,从植物生长调节剂的种类及、浓度和对外界环境条件的调节控制以及采用新型LED光源进行研究,进一步探索影响黑木相思组培苗增殖的因素;研究了不同的生长素种类及浓度对黑木相思组培苗瓶内生根的影响,并且为寻求更加有利的黑木相思组培苗生根技术,研究了黑木相思组培苗的瓶外生根技术,优化了黑木相思的组织培养技术,为商业化节约成本育苗提供了依据和技术支撑。本试验的主要研究结果如下:1、不同激素不同浓度配比对黑木相思优良无性系组培苗丛生芽增殖的影响。在本试验中,采用正交设计,考虑细胞分裂素6-BA、生长素NAA、生长素IBA、赤霉素GA3的不同浓度配比下对黑木相思5个优良无性系丛生芽增殖的影响。5个优良无性系的平均增殖系数大小依次为:FM2(7.148)> FM4(7.088)>FM1(6.637)> FM10(6.440)>FM5(6.337)。不同基因型之间的增殖能力有所差异,并且对同一激素浓度大小的需求也有所不同,6-BA对5个黑木相思优良无性系丛生芽增殖影响最大。综合各因子的影响大小,最终得到5个黑木相思优良无性系增殖培养的最佳激素配方如下:FM1为MS+6-BA0.3mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+GA30.1mg·L-1;FM2为MS+6-BA0.1mg·L-1+IB A0.2mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+GA30.1mg·L-1;FM4为MS+6-BA0.1mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+GA30.2mg·L-1;FM5为MS+6-BA0.3mg·L-1+GA30.2mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+NAA0.1mg·L-1;FM10为MS+6-BA0.1mg·L-1+GA30.1mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+IBA0.3mg·L-1。2、不同封口材料对黑木相思优良无性系组培苗丛生芽增殖的影响。试验中研究了不同的封口材料对黑木相思不同优良无性系丛生芽增殖的影响,5个优良无性系表现出一致的结果,即使用透气纸作为封口材料下的丛生芽增殖系数会略高于使用塑料盖作为封口材料。3、不同光环境对黑木相思优良无性系组培苗丛生芽增殖的影响。试验结果表明,光照强度对无性系FM2、FM4、FM5丛生芽的增殖均达到了极显著的影响,对FM1的影响显著,对FM10影响不显著。5个优良无性系均在45μmol·m-2·s-1光照强度下出现最大的平均增殖系数,在研究中发现,随着光照强度的增加,组培苗长势均很好,茎叶较为粗壮,但不利于丛生芽的增殖分化。在研究不同光质对黑木相思不同优良无性系丛生芽增殖的影响方面,试验设计三种红蓝LED灯组合,分别为20%红光LED+80%蓝光LED组合、80%红光LED+20%蓝光LED组合、50%红光LED+50%蓝光LED组合。试验研究发现,不同光质组合LED灯对5个无性系丛生芽增殖影响的差异都不显著,并且在增殖分化上较日光灯处理下的要差。在光照周期方面,试验设计两种光周期对比分析:16h光期和8h暗期、12 h光期和12 h暗期。试验结果表明,光周期的改变对5个无性系丛生芽增殖的影响表现不一致,但从平均增殖系数来看,光照时间增加到16h后,5个无性系的平均增殖系数都存在不同程度的降低,并且两种光照周期对FM2和FM4丛生芽增殖的影响差异达到了极显著水平,对FM5达到显著水平,以上说明延长光照时间不利于黑木相思组培苗的增殖。4、不同激素不同浓度配比对黑木相思优良无性系组培苗瓶内生根的影响。试验采用正交设计,考虑NAA、IBA、2,4-D三种生长素的不同浓度配比对5个黑木相思优良无性系组培苗生根的影响。试验分析结果可知,这3种生长素中,NAA与2,4-D对黑木相思优良无性系组培苗生根影响较大。通过对生根率进行极差分析,得到5个黑木相思优良无性系生根培养的最佳激素配方如下:FM1为1/2MS+NAA0.2mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1+IBA0.5mg·L-1;FM2为1/2MS+NAA0.3mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1+IBA1.5mg·L-1;FM4为1/2MS+2,4-D0.5mg·L-1+IBA1.5mg·L-1+NAA0.3mg·L-1;FM5为1/2MS+2,4-D0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+IBA1.5mg·L-1;FM10为1/2MS+2,4-D0.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+IBA1.5mg·L-1。5、生根促进剂的种类、浓度和处理时间对黑木相思优良无性系组培苗瓶外生根的影响。试验中考虑NAA、IBA、ABT的浓度和处理时间对黑木相思不同优良无性系组培苗瓶外生根的影响,研究发现生长素的种类、浓度以及处理时间对黑木相思组培苗试管外生根影响差异是显著的。适合5个无性系组培苗瓶外生根的最佳生长素种类、浓度以及处理时间如下:FM1在100mg·L-1的ABT中处理5min,生根率达100%,平均根数为8.83根/株,平均根长为1.42cm; FM2在50mg·L-1的ABT中处理5min,生根率达100%,平均根数为10.66根/株,平均根长为1.33cm; FM4在100mg·L-1的ABT中处理5mmin,生根率达100%,平均根数为13.66根/株,平均根长为1.77cm:FM5在50mg·L-1的ABT中处理15min,生根率达100%,平均根数为9.50根/株,平均根长为1.89cm;FM10在100mg·L-1的ABT中处理25min,生根率达100%,平均根数为18.86根/株,平均根长为1.79cm。6、不同移栽基质对黑木相思优良无性系组培苗瓶外生根的影响。试验考虑3种基质:①泥炭土;②泥炭土+蛭石(1:1);③泥炭土+蛭石+珍珠岩(5:4:1)。试验结果表明,不同移栽基质对不同无性系组培苗瓶外生根影响差异显著,综合5个无性系的生根情况考虑,适合黑木相思组培苗瓶外生根的基质是泥炭土+蛭石+珍珠岩(5:4:1)。7、移栽基质的不同含水率对黑木相思优良无性系组培苗瓶外生根的影响。试验发现最佳基质含水率为40%。8、不同光照强度对黑木相思优良无性系组培苗瓶外生根的影响。在光照强度方面,试验考虑4570μmol·m-2·s-1、90μmol·m-2·s-1、135μmol·m-2·s-1这3种光照强度对黑木相思5个优良无性系组培苗瓶外生根的影响。经过多重比较分析结果得出,5个无性系分析结果一致:随着光照强度的增加,生根率、平均根数都增加,但平均根长逐渐减小。9、不同光周期对黑木相思优良无性系组培苗瓶外生根的影响。试验研究了不同光照周期(考虑12h/12h(光/暗)与16h/8h(光/暗)作对照)对黑木相思组培苗瓶外生根的影响,试验结果表明,不同光周期对黑木相思5个无性系生根率、根长的影响差异都不显著,但对平均根数的影响差异显著。延长光照时间平均根长变小,但平均根数增多。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 前言
  • 1.1 黑木相思繁殖存在的问题及无性系林业的意义
  • 1.2 影响植物组织培养因素的研究现状
  • 1.3 组培苗瓶外生根技术的研究进展
  • 1.4 组培苗瓶外生根的主要影响因素
  • 1.4.1 植物种类及苗木质量对组培苗瓶外生根的影响
  • 1.4.2 基质类型及含水率对组培苗瓶外生根的影响
  • 1.4.3 环境条件对组培苗瓶外生根的影响
  • 1.4.4 生根促进剂的种类、浓度和处理时间对组培苗瓶外生根的影响
  • 1.5 黑木相思组织培养技术的研究进展
  • 1.6 本研究的目的与总体思路
  • 2 材料与方法
  • 2.1 黑木相思优良无性系组培苗丛生芽增殖
  • 2.1.1 试验材料
  • 2.1.2 培养条件
  • 2.1.3 试验方法
  • 2.2 黑木相思优良无性系组培苗生根
  • 2.2.1 黑木相思优良无性系组培苗瓶内生根
  • 2.2.2 黑木相思优良无性系组培苗瓶外生根
  • 2.2.3 黑木相思优良无性系组培苗的驯化与移栽
  • 2.3 数据统计和分析
  • 3 结果与分析
  • 3.1 黑木相思优良无性系组培苗丛生芽增殖
  • 3.1.1 不同激素不同浓度配比对组培苗丛生芽增殖的影响
  • 3.1.2 不同封口材料对组培苗丛生芽增殖的影响
  • 3.1.3 不同光环境对组培苗丛生芽增殖的影响
  • 3.2 黑木相思优良无性系组培苗生根
  • 3.2.1 黑木相思优良无性系组培苗瓶内生根
  • 3.2.2 黑木相思优良无性系组培苗瓶外生根
  • 3.3 黑木相思优良无性系组培苗的瓶内与瓶外生根比较
  • 4 讨论与结论
  • 4.1 黑木相思不同优良无性系丛生芽增殖培养
  • 4.1.1 植物激素对丛生芽增殖的影响
  • 4.1.2 其他培养条件对丛生芽增殖的影响
  • 4.2 黑木相思不同优良无性系组培苗生根培养
  • 4.2.1 黑木相思不同优良无性系组培苗瓶内生根
  • 4.2.2 黑木相思不同优良无性系组培苗瓶外生根
  • 参考文献
  • 图版及说明
  • 致谢
  • 相关论文文献

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