奥曲肽对前列腺癌pc-3细胞SMAD4表达影响的实验研究

论文摘要

目的：观察奥曲肽（octreotide,OCT）对前列腺癌Pc-3细胞Smad4表达的调节及其对该细胞的抑制作用。方法：分别用浓度为0.1.0.3.1.0.3.0mg／L的奥曲肽对体外培养的人前列腺癌PC-3细胞进行药物处理,24h、48h、72h后,以MTT法测量OCT对Pc-3细胞增殖的影响,荧光显微镜下观察细胞形态的变化,以RT-PCR观察Smad4mRNA的表达。结果：1、对照组（不加药组）PC-3细胞生长活跃,不同浓度的奥曲肽（0.1、0.3、1.0.3.0mg／L）分别作用24小时后,存活率分别为（0.971±0.016）%、（0.853±0.015）%、（0.717±0.031）%、（0.743±0.029）%,作用48小时后的存活率分别为（0.918±0.015）%、（0.835±0.015）%、（0.682±0.018）%、（0.727±0.014）%,作用72小时后的存活率分别为（0.922±0.017）%、（0.841±0.013）%、（0.717±0.017）%、（0.739±0.003）%,组间比较差别有显著统计意义（P<0.01）；2、普通显微镜下观察细胞形态变化对照组24、48、72小时细胞形态正常,细胞呈梭形,胞核清晰可见,未见有细胞脱落漂浮；实验组中不同浓度奥曲肽处理后细胞均有不同程度脱落漂浮,以48小时1.0mg／L浓度最明显,且细胞出现颗粒增加和肿大等中毒现象3、荧光显微镜下对照组细胞核完整均一,着色暗淡,形态规则,可见少量染色质凝聚；药物作用后尤其是48、72小时后均可见大部分细胞质染色不均匀,染色质凝聚,细胞核裂解,可见核碎裂及凋亡小体。4、不同浓度奥曲肽作用48小时后Smad4 mRNA表达指数分别为0.113±0.006、0.227±0.025、0.546±0.027、0.552±0.009,均较对照组（0.027±0.002）表达下降,差别有显著统计意义（P<0.01）,1.0mg／L的奥曲肽作用24、48、72小时后,Smad4 mRNA表达指数分别为0.087±0.002、0.461±0.038、0.418±0.017,差别亦有显著统计意义（P<0.01）。结论：1、奥曲肽对于前列腺癌细胞有生长抑制作用,并有一定的时间和浓度依赖性2、奥曲肽明显上调了体外培养前列腺癌细胞的Smad4 mRNA的表达,有可能是奥曲肽抑制前列腺癌细胞生长的机制之一

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 材料和方法
• 1.1 实验对象
• 1.2 试剂和仪器设备
• 1.2.1 主要试剂
• 1.2.2 主要仪器设备
• 1.2.3 各种工作液的配置
• 1.2.4 试管、匀浆管等的处理
• 1.3 实验方法
• 第二章 结果
• 2.1 奥曲肽对PC-3细胞增殖的影响
• 2.2 普通显微镜下观察细胞形态变化
• 2.3 荧光显微镜下观察Hoechst33258染色后细胞形态学变化
• 2.4 奥曲肽对前列腺癌PC-3细胞Smad4mRNA表达的影响
• 第三章 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 攻读学位期间发表的论文
• 致谢