Oct4与P27、Skp2在乳腺病变中的表达及其相关性的研究

论文摘要

研究背景和目的:随着对干细胞和肿瘤起源研究的深入,人们认识到,干细胞的异常分化和增殖会导致肿瘤的发生。肿瘤的起源与干细胞基因的异常表达有着千丝万缕的联系。乳腺肿瘤虽然组织类型复杂,但其组织发生却有其同源性,都来自于乳腺上皮干细胞。干细胞癌变时,由于其故有潜能及微环境影响,可向不同表型分化,甚至转分化。目前,利用不同的分离乳腺干细胞的方法已经得到了一些常用的乳腺干细胞的标记物,但对于特异的乳腺干细胞标记物尚在不断的探索之中。胚胎干细胞基因Oct-4在维持干细胞的未分化状态和调节干细胞的分化过程起着关键性的作用,参与干细胞的自我更新。研究表明,Oct4在干细胞,包括胚胎干细胞和成体干细胞中维持较高水平的表达,而在已分化组织中表达大幅度下降或缺如,可能是有用的干细胞标记物。细胞周期研究取得的一些突破性进展使人们对细胞周期与肿瘤的发生、发展之间的关系的认识也不断加深。肿瘤也是一类细胞周期疾病,细胞增殖的失控是肿瘤组织最显著的特点。P27是一个新近发现的抑癌基因,是调节细胞周期的周期素激酶抑制因子,直接参与细胞的增殖和分化。Skp2（细胞S期激酶相关蛋白2）属于F-box蛋白家族,它通过作用于泛素-蛋白酶体系统进而调节P27的降解,在细胞周期调控中发挥重要作用。已有大量文献报道, P27的低表达和Skp2的过表达在多种恶性肿瘤发生发展中具有重要的作用。肿瘤发生发展的干细胞学说和细胞周期调控学说都是国内外研究的热点,本课题致力于细胞周期调控因子P27、Skp2的表达强弱与乳腺上皮干细胞癌变关系的研究,为更深层次揭示乳腺病变发生发展及演变过程提供新的思路。方法:1.采用免疫组化SP法分别检测10例正常乳腺组织、20例乳腺增生症、37例浸润性乳腺癌中干细胞标记物Oct4、腺腔上皮标记物CK8的表达情况,探讨Oct4在乳腺各组织中的表达及其与分化的关系。2.采用免疫组化SP法分别检测细胞周期调控蛋白P27、Skp2的表达情况,并对它们在乳腺正常组织、良性增生组织、乳腺肿瘤分化程度上的差异及它们各自之间的相关性进行观察总结。结果:1. Oct4在乳腺正常组织、增生、浸润癌组织中的表达逐渐增多,在此三种乳腺组织中的表达存在差异,P<0.05。乳腺癌中Oct4阳性表达率为43.2%,低分化的乳腺癌Oct4阳性表达率为100%,显著高于高分化的乳腺癌（18.2%）,差异具有统计学意义（P<0.05）。浸润型导管癌1级、2级和3级Oct4阳性表达率分别为18.2%、45.5%、100%,差异有统计学意义（P<0.05）。2. CK8在正常乳腺组织和乳腺增生病中均有表达,阳性率分别为90.0%、95.0%,37例乳腺癌中有25例表达,阳性率为67.6%,正常和增生组织与乳腺癌之间表达有明显差异（P<0.05）。3. P27在正常乳腺组织、乳腺增生性疾病和浸润性导管癌中均有表达,其阳性率分别为90.0%、85.0%、51.4%,各组织类型之间的表达有显著的差异（P<0.01）。4. Skp2在正常乳腺组织、乳腺增生性疾病、浸润性导管癌中均有表达,其阳性率分别为10.0%、20.0%、45.9%,各组织类型之间存在差异性（P<0.05）。5.经Spearman相关分析发现:乳腺癌中Oct4和CK8的表达呈现负相关,相关系数r=-0.242,P=0.048;乳腺癌中Skp2和P27的表达呈显著负相关,相关系数r=-0.665,P=0.00;乳腺癌中Oct4和Skp2的表达呈显著正相关,相关系数r=0.791,P=0.00结论:1. Oct4在乳腺癌组织中的表达水平高于正常乳腺组织和乳腺增生病,进一步证实了乳腺癌组织中可能存在具有自我更新和分化潜能的干细胞样细胞的理论研究。Oct4阳性乳腺癌细胞可能是正常乳腺干细胞向乳腺癌分化过程中的乳腺癌干细胞或“中间型细胞”。2. Oct4在乳腺癌组织中表达与分化程度关系密切,提示Oct4与乳腺癌恶性程度有关,可能是评估乳腺癌预后的重要生物学指标之一。3. Oct4在正常乳腺组织、增生组织和癌组织中表达呈逐渐增多趋势,即分化程度越低,表达越多;CK8作为腺腔上皮的标记物在正常乳腺组织和乳腺增生病中表达率高,在乳腺癌组织中的表达减少。Oct4与CK8的表达阳性数相关性分析显示,两者呈一定程度的负相关,说明乳腺上皮干细胞在向恶性程度逐渐转化过程中,细胞可能向腺腔上皮方向分化减弱,分化不成熟,分化程度下降。4. Skp2在乳腺正常上皮组织低表达,增生组织中表达稍高,在乳腺癌中表达最高并随着肿瘤分化程度的下降,Skp2的表达逐渐升高。而P27则呈相反的表达趋势,两者呈现一定程度的负相关。Skp2的过度表达伴P27的低表达提示肿瘤具有更高的侵袭性及预后不良。5. Oct4与Skp2在各乳腺组织类型中的表达显示,两者呈显著正相关,说明在乳腺干细胞癌变过程中,细胞周期调控因子Skp2的过表达可能促进了Oct4的表达,其机制可能是Skp2通过对P27的降解,使得乳腺干细胞发生转分化或者分化受阻,异常增殖,最终形成乳腺癌干细胞或“中间型细胞”。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢
• 四、附图