不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制的研究

不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制的研究

论文题目: 不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 呼吸内科

作者: 王辉

导师: 朱元珏,陈民钧

关键词: 不动杆菌属,耐药机制,碳青霉烯类,型碳青霉烯酶

文献来源: 中国协和医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:调查中国10家教学医院临床分离的不动杆菌属对抗菌药物的耐药性;对碳青霉烯类耐药的不动杆菌进行分子流行病学研究;研究不动杆菌对碳青霉烯类耐药的分子机制,确定β内酰胺酶、整合子、外膜蛋白(OMP)及外排泵在多重耐药和泛耐药不动杆菌属中所起的作用。 方法:收集2003-2004年两个年度北京、上海、广州等十家教学医院临床分离的非重复的187株鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法确定美罗培南、亚胺培南等抗菌药物对这些菌株的最低抑菌浓度(MIC);同时收集1999-2004年的中国7家大型医院临床分离出的128株碳青霉烯类耐药的不动杆菌(CRAB),采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和随机引物多态性DNA(RAPD)分型对这些菌株进行分子流行病学研究,确定这些耐药株的亲缘关系,并对北京协和医院CRAB的暴发流行进行临床回顾性分析;选取10个不同的耐药克隆株深入研究碳青霉烯类的耐药机制;等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点,抑制试验确定酶的类型;碱裂解法提取质粒;接合试验确定碳青霉烯类的耐药基因能否转移;对β内酰胺酶基因TEM、SHV、PER、CTX-M。VEB、GES和碳青霉烯酶基因IMP-、VIM-、OXA-23亚组、OXA-24亚组进行聚合酶链式反应(PCR)及序列分析;对整合子可变基因进行PCR及全长的序列分析。采用12%十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析CRAB菌株的Omp。采用利血平抑制试验检测外排泵的表达情况。体外在亚MIC浓度的亚胺培南的选择压力下,对全敏感株4As6、三代头孢菌素耐药株32号菌进行突变筛选研究,比较母体株和突变子耐药机制的差异,确定各种耐药机制所起的作用。 结果2003~2004年来自中国10家教学医院的数据显示,碳青霉烯类美罗培南、亚胺培南的敏感性明显降低,从2003年的92%降至2004年

论文目录:

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正文 不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制的研究

第一部分.医院内的不动杆菌的耐药状况及碳青霉烯类耐药不动杆菌的分子流行病学调查

第二部分.碳青霉烯类耐药的不动杆菌对碳青霉烯类等抗菌药物耐药的分子机制

第三部分.体外亚胺培南耐药突变子的筛选:外膜孔通道蛋白的缺失导致碳青霉烯类的耐药

全文结论

参考文献

文献综述1 碳青霉烯酶:未来困扰我们的难题

文献综述2 非发酵糖革兰阴性杆菌的耐药发展研究进展

个人简历

致谢

发布时间: 2006-09-27

参考文献

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不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制的研究
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