论文摘要
目的从凋亡水平比较不同渗透性X线造影剂对高胆固醇血症大鼠肾毒性，研究NFκB和AgⅡ在造影剂肾病（RCN）发病机制中的作用。探讨己酮可可碱（PTX）对造影剂肾病是否有保护作用及可能的作用机制。方法本研究选用48只健康雄性SD大鼠（重约150g左右）作为研究对象，随机分为正常饮食组8只（NN组）和高胆固醇饮食组40只（H组，4％.胆固醇和1％胆酸钠）。8周末，高胆固醇饮食组随机分为5组，每组8只，分别为高胆固醇饮食组（HN组）、高胆固醇饮食+高渗造影剂组（HH组）、高胆固醇+低渗造影剂组（HL组）、高胆固醇+等渗造影剂组（HI）组)、高胆固醇+高渗造影剂+己酮可可碱组（HHP组）。正常饮食组和高胆固醇饮食组大鼠分别从尾静脉注射等量生理盐水10ml／Kg，HH组、HL组、HI组和HHP组大鼠分别从尾静脉注射高渗造影剂76％泛影葡胺、低渗造影剂欧乃派克、等渗造影剂威视派克和高渗造影剂76％泛影葡胺，各造影剂均配制成相同碘浓度（300mgI／ml），注射剂量均为10ml／Kg。HHP组大鼠在注射造影剂前后12小时分别经腹腔注射己酮可可碱（PTX 50mg／Kg）。在注射生理盐水或造影剂后48小时杀鼠，下腔静脉取血测定各组大鼠的血清总胆固醇、甘油三酯、血肌酐、内生肌酐清除率（Ccr）、钠钾排泄分数及AgⅡ的浓度；另取肾组织常规固定、脱水、包埋、切片，光镜下观察肾组织改变；免疫组化法检测NFκB的表达；用TUNEL染色检测肾小管上皮细胞（HKC）的凋亡情况。结果1．所有给予高胆固醇饮食的大鼠血清总胆固醇水平明显增高（p＜0.05），但各组间血清甘油三脂水平无显著差异（p＞0.05）。2．HH、HL、HI三组的血清肌酐值和钠排泄分数明显高于HHP、HN和NN组，其中HH组血清肌酐值和钠排泄分数水平则明显高于HL和HI组，而HL和HI组间比较无显著差异；HH、HL、HI三组的Ccr明显低于HHP、HN和NN组，其中HH组Ccr水平则明显低于HL和HI组，而HL和HI组间比较亦无显著差异。HL、HI和HH组钾排泄分数显著增高，且呈依次递增趋势。3．所有注射造影剂的大鼠血浆AgⅡ水平显著升高，其中以HH组最显著。4．肾脏病理：4．1 HE染色：NN组未观察到明显的病理改变；HH组出现成片的肾小管坏死，肾小管上皮细胞空泡样变性和蛋白管型；HL和HI组则可见不同程度的肾小管上皮细胞水肿、空泡样变性及核浓缩溶解；HN组和HHP组则出现散在的肾小管上皮细胞水肿，无明显的空泡样变性，损害程度显著轻于HH组。4．2 TUNEL染色：HH组出现明显的肾脏细胞凋亡，且凋亡率明显高于其他各组（P＜0.01）。4．3免疫组化染色（NFκB）：NFκB主要在肾小球毛细血管袢的内皮细胞胞浆表达。HH组阳性细胞的平均灰度值明显低于其他各组（p＜0.01）。结论1．高胆固醇血症环境下注射不同渗透性造影剂均可导致造影剂肾损害，其中HOCM的肾毒性显著高于LOCM和IOCM，而IOCM与LOCM肾毒性无明显差异2、PTX对高胆固醇血症环境下所导致的RCN有保护作用。3、AgⅡ、NFκB在造影剂肾损害发病机制中可能起作用