GAD65基因修饰神经干细胞的构建及其治疗癫痫的初步应用

论文摘要

癫痫是由多种病因引起的慢性脑功能障碍综合征,是大脑神经细胞群反复超同步放电引起的发作性、突然性、短暂性脑功能紊乱,是功能神经外科的常见疾病。在临床上约有20%-30%癫痫患者虽经系统正规的抗癫痫药物治疗仍不能得到有效控制,成为难治性癫痫。传统手术治疗难治性癫痫的远期疗效只有60%左右,而且并非所有难治性癫痫患者都适宜手术,特别是癫痫灶弥散或不明确者并不具备传统手术的手术指征,因此有必要探索更安全、更有效的新治疗方案。 癫痫发病机制的一个核心环节是中枢神经系统兴奋/抑制的失衡,主要是兴奋性氨基酸神经递质与抑制性氨基酸神经递质平衡异常。在形态学上表现为癫痫灶内抑制性神经元（主要是γ-氨基丁酸能,如海马齿状回篮状细胞）选择性减少,癫痫灶内神经元上的抑制性突触减少,与非癫痫灶相比,相差约50%,还有脑内星形胶质细胞增生,以及受累脑区胶质化、脑组织萎缩等。因此用移植的方法增加γ-氨基丁酸能（gamma-aminobutyric acid,GABA）神经元的数量,以恢复兴奋性神经递质和抑制性神经递质的平衡,可能将从根本上改变难治性癫痫的预后。随着人们对“细胞分子神经外科”观念的普遍接受,近年关于细胞移植治疗癫痫方面的研究已经逐步开展,并取得了一定进展。移植物主要是GABA能胚胎神经细胞,谷氨酸脱羧酶（glutamic acid decarboxylase,GAD）基因修饰的永生化神经元,但是人类的胚胎脑组织来源很有限,并且面临着伦理学束缚,应用于临床还不现实;普通神经元不能分裂增殖,而永生化神经元又存在致瘤性,故都不能满足临床治疗需求。鉴于神经干细胞（neural stem cells,NSCs）具有自我更新能力和多分化潜能,一定条件下可以分化成神经系统的各种细胞,特别是移植到海马区以后,有很高的神经元分化率,因此在修复受损神经组织以及神经疾病基因治疗等方面有良好的应用前景;另外,神经干细胞具有向病灶定向迁移的特点,使之特别适合作为弥漫性病变或隐匿性病变的基因治疗载体。

论文目录

• 摘要
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• 正文
• 第一部分 神经干细胞体外长期培养方法的建立
• 研究背景
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 65基因修饰神经干细胞的构建'>第二部分 GAD₆₅基因修饰神经干细胞的构建
• 研究背景
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 65基因修饰神经干细胞治疗癫痫的初步研究'>第三部分 GAD₆₅基因修饰神经干细胞治疗癫痫的初步研究
• 研究背景
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 综述正文
• 参考文献
• 在读期间的论文、专著、项目和奖励
• 致谢
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