泮林牛其东/山东技师学院赵爱美/山东省立医院
【摘要】建立HPLC法同时测定感冒灵颗粒中对乙酰氨基酚和马来酸氯苯那敏含量。方法：采用BischoffC18(250mm×4．6mm，5μm)色谱柱，甲醇-0．05molL-1磷酸二氢钾溶液一三乙胺(10：90：0．02)(用磷酸调pH=3．4)为流动相，检测波长为216nm，柱温为30℃，流速为1．0mlmin-1，进样量为20μl。结果：对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏分别在40.13～240.77μgml-1(r=0．9993)和0.37～2.19μgml-1(r=0．9978)浓度范围内呈现出良好的线性关系；方法平均回收率分别为99.56％和99.00％；RSD分别为0.32％和0.50％。结论：该方法简便、快速，两组分分离度好，其他成分无干扰，测定结果准确可靠。可作为该制荆质量控制的有效方法。
【关键词】感冒灵颗粒；对乙酰氨基酚；马来酸氯苯那敏；HPLC法
感冒灵颗粒为临床常见治疗伤风感冒的药物，处方中除中药外主要成分为对乙酰氨基酚和马来酸氯苯那敏。现行国家药品标准巾采用紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚的含量[1]，而对马来酸氯苯那敏未作含量控制，本文采用高效液相色谱法，同时分离、测定小儿氨酚黄那敏片中两组分的含量，结果简便、快速、准确。
一、仪器与试药
UnimicroBiSep-1100高效液相色谱仪，日本岛津μV-2450型紫外分光光度计，CP-225D电子天平，SB2200超声处理器。
甲醇、三乙胺为色谱纯；磷酸二氢钾和磷酸均为分析纯；对照品(对乙酰氨基酚，批号：100018-200107；马来酸氯苯那敏，批号：100047-200305；供含量测定用，均购自中国药品生物制品检定所，含量均为100％)；小儿氨酚黄那敏片(规格为对乙酰氨基酚0．125g／片、马来酸氯苯那敏0．5mg／片)为市售，A厂，批号：0911123H、1102123H；B厂，批号：1002021、1001063；C厂，批号：201005003。依次分别编号：1，2，3，4，5。
二、方法与结果
（一）色谱条件[2]
色谱柱：BischoffC18(250mm×4．6mm5μm)；流动相：甲醇-0．05mol?L-1磷酸二氢钾溶液-三乙胺(15：85：0．02)(用磷酸凋pH=3．4)；检测波长为220nm。柱温：室温。流速：1.0ml?min-1，进样量：20μl；按外标法-峰面积计算。
（二）对照品溶液的制备
精密称取经105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品11.50mg置l00ml量瓶中,用流动相溶解至刻度，作为备用液；精密称取经105℃干燥至恒重的对乙酰氨基酚对照品25.05mg，置25ml量瓶中，用适量流动相溶解，并精密加入备用液2ml，用流动相稀释至刻度，作为对照品贮备液。精密量取对照品储备液3ml置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，用0.45μm滤膜滤过，即得。
（三）供试品溶液的制备
精密称取供试品适量(约相当于对乙酰氨基酚40mg)。置200ml量瓶中，加流动相适量，超声助溶后，再用流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45μm滤膜滤过，即得。
（四）阴性样品溶液的制备
按其质量标准中处方比例同法制备不含对乙酰氨基酚与马来酸氯苯那敏的阴性样品溶液。
（五）空白试验
取对照品溶液、阴性样品溶液和供试品溶液，按上述条件进样测绘HPLC图谱，对乙酰氨基酚与马来酸氯苯那敏的分离度好，阴性样品在两组分的出峰时间区域没有干扰峰，故对供试品的测定无干扰作用。结果见图1。
（六）线性关系的考察
精密吸取对照品贮备液各0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml分别置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值(A)为纵坐标，对乙酰氨基酚或马来酸氯苯那敏对照品溶液浓度(C)为横坐标绘制标准曲线，计算，得回归方程。对乙酰氨基酚A=40291C+136116，r=0.9993；马来酸氯苯那敏A=45721C+5778.8，r=0.9978，结果表明对乙酰氨基酚与马来酸氯笨那敏的溶液分别在40.13～240.77μg?ml-1和0.37～2.19μg?ml-1浓度范围内呈良好的线性关系。
（七）精密度试验
取对照品溶液重复进样6次，分别测定两组分的峰面积，对乙酰氨基酚与马来酸氯苯那敏的RSD分别为0.52％和0.84％。
（八）重复性试验
取同一批号供试品，精密称取6份，按样品测定方法平行测定两组分的含量，对乙酰氨基酚与马来酸氯苯那敏的RSD分别为0.80％和1.40％。
（九）稳定性试验
取同一批样品溶液，在室温放置，每隔2h测定1次，连续测定6次，结果对乙酰氨基酚与马来酸氯苯那敏含量的RSD分别为0．91％和1．92％，说明样品溶液在12h内测定，结果稳定性良好。
（十）回收率试验
取上述不含对乙酰氨基酚与马来酸氯苯那敏的阴性样品溶液，分别加入一定量的对乙酰氨基酚与马来酸氯苯那敏对照品适量，进样测定对乙酰氨基酚与马来酸氯苯那敏的含量，并分别计算回收率，结果见表l。
（十一）样品测定
取样品与对照品溶液，按上述色谱条件进样，记录峰面积，按外标法计算含量，并与UV法测定结果作比较，见表2。
三、小结
原标准含量测定仅测定对乙酰氨基酚，本方法同时测定两组分，操作简便，快捷，精密度和准确度都较好。从不同厂家的样品．发现对乙酰氨摹酚含量较好，而马来酸氯苯那敏含量不等，这可能与原标准中对马来酸氯苯那敏成分无含量控制有关，本法的建立，有利于更好地提高和控制药品质量。
【参考文献】
[1]国家药品监督管理局国家药品标准（试行).WS-10001-(HD-0214)[S]
[2]毛威．HPLC法测定小儿氨酚黄那敏颗粒中二组分的含量及马来酸氯苯那敏含量均匀度考察[J]．中国药品标准，2006，7(5)：59