体外动态力学刺激对SD幼鼠前脂肪细胞活力、增殖、凋亡及TNF-a表达释放影响的研究

论文摘要

目的:探讨动态力学刺激对SD幼鼠前脂肪细胞的活力、增殖、凋亡及肿瘤坏死因子（TNF-α）表达释放影响的研究,为推拿按摩治疗青少年单纯性肥胖和肥胖并发症的现代医学细胞生物学机制提供理论与实验依据。方法:体外培养SD幼鼠前脂肪细胞,从细胞生物力学角度,模拟推拿治疗的按摩作用方式,对细胞实施动态力学刺激,观察细胞形态学变化,检测细胞活力、细胞增殖指数和细胞凋亡率的变化,并观测动态力学刺激对细胞TNF-α表达释放的影响。结果:（1）实验中所采用的体外动态力学刺激未对前脂肪细胞的细胞形态产生明显影响。（2）动态力学刺激抑制了前脂肪细胞的活力和增殖活性,而对前脂肪细胞的凋亡无显著性影响。（3）动态力学刺激抑制了前脂肪细胞TNF-α的释放表达。结论:推拿按摩治疗青少年单纯性肥胖和肥胖并发症的作用机制一方面可能通过抑制前脂肪细胞的活力和增殖,使前脂肪细胞向脂肪细胞转化率降低而达到;另一方面可能通过抑制前脂肪细胞TNF-α的释放表达,降低脂肪细胞源性细胞因子的病理作用而实现。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 正文
• 1 实验研究
• 1.1 材料
• 1.1.1 实验动物及主要培养用试剂
• 1.1.2 主要检测试剂及试剂盒
• 1.1.3 主要实验器材
• 1.2 前脂肪细胞培养方法
• 1.2.1 前脂肪细胞原代培养
• 1.2.2 前脂肪细胞传代培养
• 1.2.3 前脂肪细胞鉴定
• 1.2.3.1 油红O 工作液配制方法
• 1.2.3.2 油红O 染色方法
• 1.2.3.3前脂肪细胞鉴定结果
• 1.3 前脂肪细胞不同频率动态力学刺激实验
• 1.3.1 前脂肪细胞在6 孔板上的接种培养及力学加载前处理
• 1.3.2 前脂肪细胞在24 孔板上的接种培养及力学加载前处理
• 1.3.3 实验设计及分组
• 1.4 指标检测
• 1.4.1 不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞排列及形态变化的检测
• 1.4.2 不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞生长活力的检测
• 1.4.2.1 MTT 比色法检测原理
• 1.4.2.2 MTT 比色法检测方法
• 1.4.3 不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞增殖活性及细胞凋亡率检测
• 1.4.3.1 流式细胞仪（FCM）概况及检测原理
• 1.4.3.2 标本收集
• 1.4.4 不同频率动态力学刺激前脂肪细胞TNF-α释放表达检测
• 1.4.4.1 ELISA 法检测原理
• 1.4.4.2 标本收集
• 1.5 结果观察及统计学处理
• 2. 结果
• 2.1 不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞排列及形态变化的影响
• 2.2 不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞生长活力的影响
• 2.3 不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞增殖活性及细胞凋亡率的影响
• 2.4 不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞TNF-α释放表达的影响
• 3. 讨论
• 3.1 传统医学对青少年单纯性肥胖的认识
• 3.2 现代医学对青少年单纯性肥胖的认识
• 3.3 推拿按摩治疗青少年单纯性肥胖症的机理探讨
• 3.4 推拿按摩治疗作用本质的物理学分析和细胞生物学实验方法选择
• 3.5 体外模拟推拿按摩不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞生长活力的影响及意义
• 3.5.1 体外模拟推拿按摩不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞生长活力的影响---
• 3.5.2 体外模拟推拿按摩不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞生长活力研究的意义
• 3.6 体外模拟推拿按摩不同动态力学刺激对前脂肪细胞的增殖及凋亡的影响及意义
• 3.6.1 体外模拟推拿按摩不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞的增殖及凋亡的影响
• 3.6.2 体外模拟推拿按摩不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞的增殖及凋亡的意义
• 3.7 体外模拟推拿按摩不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞肿瘤坏死因子释放的影响及意义
• 3.7.1 体外模拟推拿按摩不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞肿瘤坏死因子释放的影响
• 3.7.2 体外模拟推拿按摩不同频率动态力学刺激对前脂肪细胞肿瘤坏死因子释放研究的意义
• 4.结论
• 问题与展望
• 参考文献
• 附录一:缩略词表
• 附录二:脂肪细胞因子在单纯性肥胖中的研究进展（综述）
• 参考文献
• 附录三:致谢
• 附录四:个人简历