冬虫夏草菌株qsun-1特性研究

论文摘要

冬虫夏草是一种珍贵的药用真菌,含有虫草素、虫草酸和虫草多糖等有效成分,具有许多药理功能。天然的冬虫夏草生长环境特殊,生长周期长,产量低。本研究从冬虫夏草中分离冬虫夏草菌株,并对菌株进行培养,为天然冬虫夏草替代品的工业化生产提供依据。本研究对比了冬虫夏草子座组织和菌虫体组织菌丝萌发率判断冬虫夏草菌株分离的难易程度。将从子座中分离的菌株命名为qsun-1并对菌株qsun-1菌落形态、显微结构进行观察。以菌落直径为指标确定最适生长温度。利用单因素实验和正交实验对菌株qsun-1的液体发酵条件进行了优化,分别考察碳源及氮源种类、碳源及氮源浓度、MgSO4浓度、KH2PO4浓度、VB1浓度、pH、装液量、接种量、发酵时间对菌株qsun-1生长的影响。同时对麦芽汁培养基中菌株qsun-1的生长特性进行研究,分别考察还原糖浓度、金属离子种类及浓度、pH、发酵时间对菌株qsun-1生长的影响。研究结果表明,冬虫夏草子座组织菌丝体容易萌发,而菌虫体组织中可能由于易受杂菌污染菌丝体萌发受阻。固体培养菌株qsun-1得到其最适生长温度范围为15-18℃,该菌株在1%牛肉粉PDA培养10天后菌落明显隆起,纯白色,菌丝粗壮,菌落背面淡黄色,菌落直径30mm。液体培养的菌丝主要为管状菌丝,菌丝有较明显的分隔,粗细均匀,每节菌丝均透明。冬虫夏草菌株qsun-1液体发酵的最佳条件为：蔗糖1.5%、蛋白胨2.5%、MgSO40.15%、KH2PO40.25%、VB10.04%、pH7、装液量60mL/250mL、接种量3%、发酵时间6天。在最佳条件下,菌体干重达到18g·L-1、胞外粗多糖为1.0g.L’。对麦芽汁培养基中培养菌株qsun-1的发酵条件进行优化,得到的最佳条件为：还原糖6%、KH2PO40.2%、pH7,发酵时间4天,在最佳条件下菌体干重达到20g.L-1。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 冬虫夏草的生物学特征
• 1.1.1 冬虫夏草的形态
• 1.1.2 冬虫夏草的分布
• 1.1.2.1 冬虫夏草分布
• 1.1.2.2 影响冬虫夏草分布的生态因素
• 1.1.3 冬虫夏草的生活史
• 1.2 虫草属真菌的种类资源
• 1.3 冬虫夏草研究历史
• 1.4 冬虫夏草的有效成份
• 1.4.1 虫草素
• 1.4.1.1 虫草素的功能
• 1.4.2 虫草酸
• 1.4.2.1 虫草酸功能
• 1.4.3 虫草多糖
• 1.4.3.1 虫草多糖的功能
• 1.4.4 蛋白质和氨基酸
• 1.4.5 无机元素
• 1.4.6 其他成份
• 1.5 冬虫夏草无性型的研究
• 1.5.1 冬虫夏草无性型的概念
• 1.5.2 冬虫夏草无性型分离与鉴定
• 1.5.2.1 冬虫夏草无性型的分离
• 1.5.2.2 冬虫夏草无性型的鉴定
• 1.5.3 冬虫夏草无性型培养特征
• 1.5.3.1 菌落特征
• 1.5.3.2 产孢体特征
• 1.5.3.3 分生孢子特征
• 1.5.4 冬虫夏草无性型发酵研究现状
• 第二章 材料与方法
• 2.1 试剂
• 2.2 主要设备
• 2.3 主要材料
• 2.3.1 菌株
• 2.3.2 实验用培养基
• 2.4 实验方法
• 2.4.1 菌株qsun-1的分离
• 2.4.2 菌株qsun-1的培养及形态观察
• 2.4.3 菌株qsun-1发酵条件研究
• 2.4.3.1 不同碳源对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.3.2 不同蔗糖质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.3.3 不同氮源对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.3.4 不同蛋白胨质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 4质量分数菌株qsun-1生长的影响'>2.4.3.5 不同MgSO₄质量分数菌株qsun-1生长的影响
• 2PO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响'>2.4.3.6 不同KH₂PO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.3.7 正交试验
• 1质量分数对菌株qsun-1生长的影响'>2.4.3.8 不同VB₁质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.3.9 不同pH对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.3.10 不同装液量对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.3.11 不同接种量对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.3.12 菌株qsun-1生长曲线
• 2.4.4 菌株qsun-1在麦芽汁培养基中的生长特性
• 2.4.4.1 麦芽汁中还原糖含量对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.4.2 不同金属离子对菌株qsun-1生长的影响
• 2PO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响'>2.4.4.3 KH₂PO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.4.4 pH对菌株qsun-1生长的影响
• 2.4.4.5 菌株qsun-1在麦芽汁培养基中的生长曲线
• 2.4.5 样品测定
• 2.4.5.1 硫酸-蒽酮标准曲线绘制
• 2.4.5.2 胞外粗多糖的测定
• 2.4.5.3 DNS标准曲线绘制
• 2.4.5.4 发酵液中还原糖（残糖）的测定
• 第三章 结果与分析
• 3.1 菌株qsun-1的分离培养及形态观察
• 3.1.1 菌株qsun-1的分离
• 3.1.2 菌株qsun-1的生长特点
• 3.1.2.1 菌株qsun-1的菌落形态
• 3.1.2.2 菌株qsun-1的菌落生长情况
• 3.1.2.3 菌株qsun-1的显微结构
• 3.2 菌株qsun-1发酵条件的研究
• 3.2.1 不同碳源对菌株qsun-1生长的影响
• 3.2.2 不同蔗糖质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 3.2.3 不同氮源对菌株qsun-1生长的影响
• 3.2.4 不同蛋白胨质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 4质量分数对菌株qsun-1生长的影响'>3.2.5 不同MgSO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 2PO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响'>3.2.6 不同KH₂PO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 3.2.7 正交试验
• 1质量分数对菌株qsun-1生长的影响'>3.2.8 不同VB₁质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 3.2.9 不同pH对菌株qsun-1生长的影响
• 3.2.10 不同装液量对菌株qsun-1生长的影响
• 3.2.11 不同接种量对菌株qsun-1生长的影响
• 3.2.12 菌株qsun-1生长曲线
• 3.3 菌株qsun-1在麦芽汁培养基中的生长特性
• 3.3.1 麦芽汁中还原糖含量对菌株qsun-1生长的影响
• 3.3.2 不同金属离子对菌株qsun-1生长的影响
• 2PO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响'>3.3.3 KH₂PO₄质量分数对菌株qsun-1生长的影响
• 3.3.4 pH对菌株qsun-1生长的影响
• 3.3.5 菌株qsun-1在麦芽汁培养基中的生长曲线
• 3.4 讨论
• 3.4.1 虫草无性型菌株的分离方法
• 3.4.2 虫草胞外多糖的提取及测定
• 3.4.3 虫草无性型菌株发酵条件的研究
• 3.4.4 冬虫夏草产业化前景
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢