论文摘要
【目的】了解癫痫患者脑脊液中神经生长因子（nerve growth factor, NGF）水平,研究不同浓度NGF对人癫痫脑海马CA1区神经细胞总数,以及星形胶质细胞、神经元存活数量的影响,同时研究了不同浓度NGF对神经细胞Egr-1mRNA表达的影响,以探讨NGF对癫痫脑损伤神经细胞作用和机制。【方法】应用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay ,ELISA）分别测定癫痫组（n=28）及非癫痫对照组（n=21）脑脊液中NGF水平;采用解离细胞即刻培养技术,对经检查痫样放电起源于颞叶或海马,而病理检查未发现特异病理改变的人癫痫海马CA1的神经细胞（n=16）进行培养,并设立浓度分别为12.5, 50, 100 ng/ml的NGF加药组和未加NGF的空白对照组,培养4h后,通过免疫荧光细胞化学法,以双苯酰亚胺（Bisbenzimide,Bb）染核,联合细胞特异性标志蛋白GFAP、MAP2标记星形胶质细胞、神经元,计数存活的神经细胞总数,及星形胶质细胞和神经元数,并计算星形胶质细胞和神经元占总神经细胞的百分比,同时利用RT-PCR技术半定量分析不同浓度NGF对神经细胞表达早期生长反应基因-1（early growth response gene-1, Egr-1）mRNA的影响。【结果】1.癫痫组和非癫痫对照组脑脊液中NGF含量分别（27.31±6.36）pg/ml、（24.09±4.96）pg/ml,两组中脑脊液NGF水平无显著性差异（P>0.05）。2.在NGF浓度为12.5、50、100ng/ml时,海马CA1区神经细胞数分别为（82.02±11.08）、（104.71±14.24）、（127.11±14.35）个/视野,与未加NGF的空白对照组（67.71±9.21）个/视野相比,差异具有显著性意义（P<0.01）,神经元存活总数随NGF浓度增高而增加,与NGF剂量呈量效关系（P<0.01）。3.当NGF浓度为0、12.5、50、100ng/ml时,GFAP（+）的星形胶质细胞数分别为（23.11±4.39）、（30.73±5.16）、（44.25±6.76）、（59.57±6.23）个/视野;而MAP（2+）神经元数分别为（8.82±1.74）、（14.81±2.87）、（22.51±3.10）、（32.17±2.52）个/视野,星形胶质细胞和神经元存活数与NGF剂量呈量效关系,随NGF浓度增高而增加（P<0.05）。4.随着NGF浓度的升高,星形胶质细胞和神经元占神经细胞百分比有所升高,显示出相同的增高趋势。NGF浓度分别为0、12.5、50、100ng/ml时, GFAP（+）的星形胶质细胞和MAP2（+）的神经元占神经细胞百分比中位数（四分位间距）分别为34.94（31.16～36.91）%、38.49（34.70～39.94）%、42.36（40.22～45.13）%、45.92（43.79～51.53）%和13.01（10.65～15.55）%、18.35（16.37～19.92）%、21.94（21.36～22.84）%、25.33（23.98～26.84）%;比较不同浓度的NGF对GFAP（+）的星形胶质细胞和MAP2（+）的神经元占神经细胞百分比改变的影响时发现,差别无显著意义（P>0.05）。5.当NGF浓度为0、12.5、50、100ng/ml时,神经细胞表达Egr-1mRNA即AEgr-1/Aβ-actin分别为（0.46±0.14）、（0.63±0.14）、（0.80±0.15）、（1.12±0.12）,加药组与未加NGF对照组比较,存在显著性差异（P<0.01）,同样神经细胞表达Egr-1mRNA量与NGF剂量呈量效关系,随NGF浓度增高而表达量增加（P<0.01）。且在NGF作用下,神经细胞数与相应表达的Egr-1mRNA的量成正相关（r=0.780,P <0.01）。【结论】研究结果发现难治性癫痫人脑脊液中NGF水平较非癫痫对照组无明显升高;在（12.5～100）ng/ml范围内时,NGF可提高体外培养人癫痫脑海马CA1区神经细胞数,及GFAP（+）星形胶质细胞和MAP2（+）神经元数量,这一作用与NGF浓度的升高呈正相关,提示了NGF对神经细胞具有保护作用;比较不同浓度的NGF对星形胶质细胞和神经元存活率的提升作用,均显示无显著差异,提示了NGF对人癫痫海马CA1区星形胶质细胞和神经元均有保护作用;NGF对神经细胞表达Egr-1mRNA有促进作用,其表达量的增加与NGF浓度呈正的量效关系,提示了Egr-1在NGF介导的神经细胞保护中可能起重要作用。
论文目录
相关论文文献
- [1].睡眠不足会使记忆被清理[J]. 科学大观园 2017(18)
- [2].星形胶质细胞上调基因-1在乳腺癌中的表达及临床意义[J]. 中国肿瘤外科杂志 2013(06)
- [3].星形胶质细胞与脑水肿的形成[J]. 中风与神经疾病杂志 2013(02)
- [4].血管紧张素Ⅱ对人星形胶质细胞老化的影响[J]. 山西医药杂志 2013(02)
- [5].星形胶质细胞在癫痫发病中的作用[J]. 浙江大学学报(医学版) 2013(03)
- [6].反应性星形胶质细胞对中枢神经系统损伤的保护作用[J]. 社区医学杂志 2012(02)
- [7].反应性星形胶质细胞在脊髓损伤后作用研究进展[J]. 安徽医科大学学报 2012(04)
- [8].中药对星形胶质细胞活性影响的研究进展[J]. 河南中医 2012(06)
- [9].桩蛋白在两型星形胶质细胞及神经元中的差异表达[J]. 神经解剖学杂志 2011(04)
- [10].为什么会感觉到吃饱:大脑改变星形胶质细胞[J]. 科学大观园 2020(09)
- [11].硫辛酸抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞细胞因子及趋化因子的表达[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2014(04)
- [12].不同年龄小鼠脱髓鞘动物模型中脑内星形胶质细胞激活情况的观察[J]. 第三军医大学学报 2012(08)
- [13].小脑星形胶质细胞功能的最新进展[J]. 中国医药指南 2012(10)
- [14].研究人员发现星形胶质细胞可调节呼吸强度[J]. 中国科技信息 2010(17)
- [15].β-淀粉样蛋白对星形胶质细胞分泌组织蛋白酶B作用的研究[J]. 中国神经免疫学和神经病学杂志 2010(01)
- [16].星形胶质细胞在听觉形成及听觉中枢重塑中的作用[J]. 听力学及言语疾病杂志 2014(03)
- [17].原代神经元与星形胶质细胞的混合培养方法[J]. 生理学报 2013(01)
- [18].苦参碱对缺血性脑中风小鼠神经元及星形胶质细胞的保护作用[J]. 中国临床药理学与治疗学 2012(12)
- [19].星形胶质细胞在中枢神经系统非感染性炎症与免疫反应中的作用[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2012(23)
- [20].英国科学家确定星形胶质细胞新功能[J]. 中国当代医药 2010(27)
- [21].黄芩素抑制人巨细胞病毒感染星形胶质细胞的实验研究[J]. 微生物学杂志 2014(01)
- [22].星形胶质细胞与认知功能的研究进展[J]. 解剖科学进展 2014(03)
- [23].星形胶质细胞与阿尔茨海默病[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2014(09)
- [24].骨髓间充质干细胞对脑缺血大鼠星形胶质细胞影响的实验研究[J]. 医学研究生学报 2013(06)
- [25].脑内星形胶质细胞在实验室培育成功 对神经系统失调等疾病的治疗具有重要意义[J]. 科技传播 2011(11)
- [26].星形胶质细胞可转化为功能性神经细胞[J]. 临床合理用药杂志 2010(11)
- [27].低氧诱导星形胶质细胞血管内皮生长因子表达[J]. 中华老年心脑血管病杂志 2010(04)
- [28].人干细胞定向分化研究揭示星形胶质细胞多样性的奥秘[J]. 科学 2012(01)
- [29].颞叶内侧癫痫发病机制中星形胶质细胞作用的研究进展[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2012(10)
- [30].星形胶质细胞在调节突触可塑性中的作用[J]. 中国实用医药 2011(14)
标签：癫痫论文; 神经生长因子论文; 早期生长反应基因论文; 海马论文; 神经细胞论文;